药物的鉴别实验

药物的鉴别实验第一节鉴别实验得项目一、药物得性状

药物得性状(description)反应药物得特有物理性质,包括:外观、溶解度和物理常数等。外观 指药品得外表感观和色泽,包括:药品得集聚状态、晶型、色泽以及臭、味等性质。 例:维生素B1:“本品为白色结晶或结晶性粉末;有微弱得特臭,味苦;干燥品在空气中迅即吸收约4%得水分”溶解度溶解度作为药物得一种物理性质,在一定程度上反映药品得纯度。《中国药典》采用“极易溶解、易溶解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或不溶”来描述药品得溶解性能。方法:称取研成细粉得供试品或量取液体供试品,置于25˚C±2˚C一定容量得溶剂中,每隔5min强力振摇30s;观察30min内得溶解情况,如无目视可见得溶质颗粒或液滴,则为完全溶解。物理常数 物理常数就是评价药物质量得主要指标之一。其测定结果对药品具有鉴别意义,也反映该药品得纯度。 《中国药典》收载得物理常数:相对密度、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、吸收系数等。熔点固体熔化成液体得温度、熔融同时分解得温度或在熔化时自初熔至全熔得一段温度。要求报告“初熔”(供试品在毛细管内开始局部液化出现明显液滴时得温度)和“全熔”(供试品全部液化时得温度)。例1 雌二醇:“本品得熔点为175～180˚C”。例2 醋酸地塞米松:“本品得熔点为223～233˚C,熔融时同时分解”。比旋度在一定波长与温度下,偏振光透过长1dm且每1ml中含有旋光性物质1g溶液时测得得旋光度称为比旋光度。比旋光度就是反映手性药物特性及其纯度得主要指标,可用以区别药品、检查纯度或测定制剂得含量。例:维生素C得比旋度为+20、5˚～+21、5˚。吸收系数在给定的波长、溶剂和温度下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。《中国药典》收载的吸收系数为百分吸收系数：在一定波长下，溶液浓度为1%(W/V)，厚度为1cm时的吸光度，用表示。吸收系数不仅可用于考察原料药的质量，同时可作为该药物制剂应用紫外分光光度法测定含量时的依据。无机药物的鉴别：根据其组成的阴离子和阳离子的特殊反应。有机药物的鉴别：采用典型官能团反应。鉴别实验只能证实是某一类药物，不能证实是哪一种药物。鉴别实验仅供确认药物质量标准中单一的化学药物，不适用于混合物或有干扰物质存在的情况。二、一般鉴别实验

有机氟化物的鉴别

供试品约7mg氧瓶燃烧法进行有机破坏吸收液：20mlH2O-6.5mlNaOH(0.01mol/L)燃烧完全后，充分振摇，取吸收液2ml加茜素氟蓝试液0.5ml再加12%醋酸钠的稀醋酸溶液0.2ml用水稀释至4ml，加硝酸亚铈试液0.5ml溶液显蓝紫色,并做空白对照试验方法原理

有机氟化物经氧瓶燃烧法破坏，被碱性溶液吸收成为无机氟化物，与茜素氟蓝、硝酸亚铈在pH4.3溶液中形成蓝紫色络合物。茜素氟蓝OOOHOHCH2NCH2COOHCH2COOHF-++Ce3+pH4.3蓝紫色OOOHOCH2NCH2COOHCH2COOHCeFOH12大家应该也有点累了，稍作休息大家有疑问的，可以询问和交流有机酸的鉴别

水杨酸盐鉴别方法一：

取供试品的稀溶液，加三氯化铁1滴，溶液显紫色。原理：

本品在中性或弱酸性下，与FeCl3生成配位化合物，中性时呈红色，弱酸性时呈紫色。COOHOH水杨酸6+4FeCl3COO-O-2FeFe+12HCl鉴别方法二：

取供试品的溶液，加稀盐酸，即析出白色水杨酸沉淀，沉淀在醋酸铵试液中溶解。酒石酸盐方法：

取供试品的中性溶液，置洁净的试管中，加氨制硝酸银试液数滴，置水浴中加热，银游离并附在试管内壁成银镜。原理：COOHCHHOCOOHCHHO+Ag(NH3)2OHΔCOONH4CHOCOONH4CHO+2NH3+2H2O2Ag+供试品约50mg加稀盐酸1ml，缓缓煮沸使溶解，放冷加0.1mol/L亚硝酸钠溶液数滴加碱性β-萘酚试液数滴生成橙黄色到猩红色沉淀（视供试品不同）芳香第一胺类方法：原理：+NaNO2+2HClNH2R+NaCl+2H2OR+NaCl+H2ORN=N–OH+NaOHROH+方法：供试品约10mg加发烟硝酸5滴置水浴上蒸干，得到黄色残渣加乙醇2～3滴润湿加固体KOH一小粒，显深紫色托烷生物碱类原理：OROHO水解HOOCHO3HNO3HOOCHONO2O2NNO2托烷类三硝基衍生物KOH（C2H5OH）HOOCHONO2O2NNOHO莨菪酸醌型产物KOHHOOCHONO2O2NNOHOHOOCHONO2O2NNOKO深紫色钠盐、钾盐、钙盐的焰色反应 鉴别方法：

取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显个离子的特征颜色。 钠离子:鲜黄色；钾离子:紫色；钙离子:砖红色。 原理：

钠的火焰光谱主要谱线：589.0nm、589.6nm； 钾的火焰光谱主要谱线：766.49nm、769.90nm； 钙的火焰光谱主要谱线：622nm、554nm、442.67nm与602nm。无机金属盐铵盐 鉴别方法： 取供试品，加过量NaOH试液后，加热，即分解，发生氨臭；遇湿润的红色石蕊试纸，能使之变蓝色，并能使硝酸亚汞试液湿润的滤纸显黑色。 原理：NH4++OH-NH3+H2O4NH3+2Hg2(NO3)2+H2OOHgHgNH2·NO3+2Hg+3NH4NO3氯化物 鉴别一： 取供试品溶液，加稀硝酸使成酸性，滴加AgNO3试液，生成白色凝乳状沉淀；沉淀加氨试液即溶解，再加稀硝酸，沉淀复生成。 鉴别二： 取供试品少量置试管中，加等量MnO2，混匀，加H2SO4湿润，缓缓加热，即发生氯气，能使湿润的碘化钾淀粉试纸显蓝色。无机酸根硫酸盐 鉴别一: 取供试品溶液,滴加BaCl2试液,即生成白色沉淀;沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。 鉴别二: 取供试品溶液,滴加醋酸铅试液,即生成白色沉淀;沉淀在醋酸铵或NaOH试液中溶解。 鉴别三: 取供试品溶液,加盐酸,不生成白色沉淀(与硫代硫酸钠区别)。硝酸盐 鉴别一: 取供试品溶液置试管中,加等量得硫酸,小心混合,冷后,沿管壁加硫酸亚铁试液,使成两液层,接界面显棕色。 鉴别二: 取供试品溶液,加硫酸与铜丝加热,即发生红棕色得蒸气(NO2)。 鉴别三: 取供试品溶液,滴加KMnO4试液,紫色不应褪去(与亚硝酸钠区别)。三、专属鉴别实验

一般鉴别实验是以某些类别药物的共同化学结构为依据，根据其相同的物理化学性质进行药物真伪的鉴别，以区别不同类的药物药物的专属实验：在一般鉴别实验的基础上，根据各种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，来鉴别药物，以区别同类药物或具有相同化学结构部分的各个药物单体，达到最终确证药物真伪的目的。以后各章详解第二节鉴别方法药物的鉴别方法的要求：专属性强再现性好灵敏度高、操作简便快速常用鉴别方法：化学法光谱法色谱法生物学法一、化学鉴别法要求：反应迅速、现象明显；反应是否完全则不重要。化学鉴别法：呈色反应沉淀生成反应荧光反应气体生成反应使试剂褪色反应测定生成物的熔点（繁琐、费时、应用少）二、光谱鉴别法紫外光谱鉴别法 原理： 多数有机药物分子含有能吸收紫外可见光的基团而显示特征吸收光谱，可作为鉴别的依据。常用方法：测定最大吸收波长或同时测定最小吸收波长；规定一定浓度的供试液在最大吸收波长处的吸光度；规定吸收波长和吸收系数法；规定吸收波长和吸光度比值法；经化学处理后，测定其反应产物的吸收光谱特性。示例：地蒽酚的鉴别实验取含量测定下的供试品溶液，于240～400nm范围内测定吸光度，在257nm、289nm与356nm处有最大吸收。在257nm与289nm处的吸光度比值应为1.06～1.10；在356nm与289nm处的吸光度比值应为0.90～0.94。红外光谱鉴别法红外光谱法专属性很强,应用较广(固体、液体、气体样品),主用于组分单一、结构明确得原料药,特别适合于用其她方法不易区分得同类药物。在用红外光谱进行鉴别时,《中国药典》采用标准谱图对照法。试样制备方法: 压片法糊法膜法溶液法注意问题:固体药品得测定受晶型得影响采用压片法时,盐酸盐样品需使用KCl基质。傅立叶变化红外光谱仪系单光束型仪器,测定时需采用干燥得氮气吹扫来消除二氧化碳和水汽得干扰。本法对多组分药物或存在多晶现象得药物不适用。制剂得鉴别一般需采取提取分离后压片测试。仪器间得分辨率得差异及操作条件得不同可能影响药品光谱图,应将测定药品用得仪器上获得得聚苯乙烯薄膜光谱图与药典收录得聚苯乙烯薄膜光谱图加以比较。《中国药典》红外光谱图得波数范围:4000～400cm-1近红外光谱鉴别法通过测定被测物质在近红外谱区750～2500nm得特征光谱并利用适宜得化学计量学方法提取相关信息后,对被测物质进行定性、定量。近红外光谱特点:快速、准确、不破坏样品、既可离线检测,也可在线检测。近红外光谱鉴别法步骤: (1)建立参考谱库 (2)数据预处理 (3)数据评估 (4)数据库得验证(专属性和耐用性)原子吸收法利用原子蒸汽可以吸收该元素作为空心阴极灯发出得特征谱线得特征,根据供试品溶液得最大吸收和特征谱线得强度减弱程度进行定性、定量分析。核磁共振法通过测定供试品指定基团上得质子峰得化学位移δ和耦合常数进行药物得鉴别。三、X射线粉末衍射法化合物的晶体都有其特定的X射线衍射图谱。衍射极大点（或线）间的距离及其相对强度可用以进行结晶物质的定性或定量分析。dhkl：面间距；θ：掠射角；λ：X射线波长结晶物质的鉴别可通过比较供试品与已知物质的X射线粉末衍射图谱来完成。各衍射线的衍射角（2θ）、相对强度、和面间距是进行鉴别的依据。(布拉格方程)-formβ-form谷氨酸两种晶型的X射线衍射光谱四、色谱鉴别法利用不同物质在不同的色谱条件下，产生各自的特征色谱行为（比移值Rf值或保留时间）进行鉴别。采用与对照品在相同的条件下进行色谱分离，并进行比较，根据两者的保留行为和检测结果是否一致来验证药品的真伪。薄层色谱鉴别法（Thin-layerChromatography）与同浓度对照品溶液，在同一薄层板上点样、展开与检视，供试品溶液所显主斑点的颜色与位置应与对照品的主斑点一致，且主斑点的大小和颜色深浅也应大致相同。采用供试品溶液与对照品溶液等体积混合，应显示单一、紧密的斑点。选用与供试品化学结构相似的药物对照品溶液与供试品溶液的主斑点比较，两者比移值应不同。将③项下两种溶液等体积混合，应显示两个清晰分离的斑点。①②③④高效液相色谱鉴别法(HighPerformanceLiquidChromatography)