天津市部分学校2023-2024学年高二下学期综合实践练习（二）生物试题（解析版）

高级中学名校试卷PAGEPAGE1天津市部分学校2023-2024学年高二下学期综合实践练习（二）一、选择题：（每题只有一个最佳选项，每题4分，共48分）1.某公司发现了一种源自松露的甜味蛋白，随后他们利用酵母菌通过发酵工程来生产该甜味蛋白。关于此技术，下列叙述错误的是（）A.为保证发酵过程的正常进行，可在发酵液中加入适量抗生素防止杂菌污染B.发酵过程中适当提高葡萄糖溶液浓度有利于酵母菌的生长繁殖C.借助转基因技术选育高产甜味蛋白的酵母菌菌种是发酵工程的中心环节D.发酵结束后，可破碎细胞，采用盐析、离心等方法从发酵液中提取甜味蛋白〖答案〗C〖祥解〗发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。【详析】A、抗生素能杀死细菌，但不能杀死真菌，因此为保证发酵过程的正常进行，可在发酵液中加入适量抗生素防止杂菌污染，A正确；B、发酵过程中适当提高葡萄糖溶液浓度有利于酵母菌的生长繁殖，B正确；C、发酵工程的中心环节是发酵过程，C错误；D、发酵结束后，可破碎细胞，采用盐析、离心等方法从发酵液中提取甜味蛋白，D正确。故选C。2.发酵产品的使用深入生活的方方面面。发酵工程可对细胞和细胞代谢产物进行工业化生产，传统发酵技术大大丰富了食物的品种，充分体现了劳动人民的智慧。下列关于发酵工程和传统发酵技术的说法，正确的是（）A.用发酵工程生产青霉素时，若发酵罐和培养基灭菌不彻底污染了杂菌，会因为某些杂菌分泌酶将青霉素分解掉而降低产量B.家庭制泡菜和变酸的葡萄酒表面长的菌膜分别是由酵母菌和醋酸菌形成，它们都是需氧型的原核生物C.发酵工程往往采用液体培养基进行发酵，发酵结束后会通过提取、分离和纯化的措施来获得单细胞蛋白产品D.与发酵工程相比，传统发酵技术中菌种来源于多种天然微生物，发酵过程经过严格灭菌，所以产品质量较高且品质稳定〖答案〗A〖祥解〗发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产人类所需的产品，一般包括菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。发酵工程在食品工业、医药工业及其他工农业生产上有重要的应用价值。【详析】A、用发酵工程生产青霉素时，若发酵罐和培养基灭菌不彻底污染了杂菌，会因为某些杂菌分泌酶将青霉素分解掉而降低产量，需要严格灭菌，A正确；B、家庭制泡菜和变酸的葡萄酒表面长的菌膜分别是由酵母菌和醋酸菌形成，但是酵母菌是兼性厌氧的真核生物，B错误；C、发酵工程往往采用液体培养基进行发酵，发酵结束后会通过提取、分离和纯化的措施来获得细胞代谢物，单细胞蛋白指微生物菌体，可通过过滤、沉淀方法获得，C错误；D、传统发酵技术的微生物是天然微生物，并未经过严格灭菌，D错误。故选A。3.猴痘是一种病毒性人畜共患病，在人类中出现的症状与过去在天花患者身上所看到的症状相似，B6R蛋白是猴痘病毒的抗原。为制备抗B6R蛋白的单克隆抗体，研究人员进行了相关实验，如图所示，其中①~④表示细胞。下列叙述正确的是（）A.细胞①含有从小鼠的脾中得到的能产生特定抗体的B淋巴细胞B.诱导细胞①②融合的常用方法与诱导原生质体融合的方法相同C.可将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养D.图中的培养瓶需要置于含有95%CO2和5%O2的混合气体中培养〖答案〗A〖祥解〗单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详析】A、单克隆抗体制备过程中需要将产生特定抗体的浆细胞与骨髓瘤细胞融合，给小鼠注射B6R蛋白的目的是使小鼠针对该抗原产生特异性免疫，从而使体内出现能产生抗B6R蛋白抗体的浆细胞，因此从小鼠脾脏提取的细胞①含有能产生特定抗体的B淋巴细胞，A正确；B、诱导动物细胞融合特有的方法是灭活的病毒，因此诱导细胞①②融合的常用方法与诱导原生质体融合的方法不完全相同，B错误；C、抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞说明其产生的抗体不是所需的抗体，因此不能培养该杂交瘤细胞，应将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠的腹腔内大量培养，C错误；D、图中的培养瓶需要置于含有95%空气和5%CO2的混合气体中培养，D错误。故选A。4.为加速我国北方冬春季秸秆原位还田的腐化过程，研究人员以冻牛粪为材料筛选出耐低温（10℃）的纤维素降解菌。已知刚果红染料能与培养基中的纤维素形成红色复合物，下列相关叙述中正确的是（）A.初筛菌种前，要利用固体培养基在37℃条件下扩大培养目标菌种B.应选择菌落直径与周围透明圈直径比值大的菌落进行纯化C.用于筛选的培养基是加入刚果红染料的牛肉膏蛋白胨培养基D.选用冻牛粪为材料与其富含纤维素及含耐低温微生物有关〖答案〗D〖祥解〗刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红与纤维素形成红色复合物；而当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。【详析】A、初筛菌种前，要利用液体培养基在10℃条件下扩大培养目标菌种，A错误；B、由于刚果红染料与纤维素形成红色复合物，因此出现以因纤维素降解菌为中心的透明圈，菌落直径与透明圈直径比值越小，分解纤维素的能力越强，B错误；C、用于筛选的培养基以纤维素为唯一的碳源的固体培养基，加入刚果红染料是鉴别作用，C错误；D、筛选耐低温的纤维素降解菌需要到其所生活的环境中寻找，冻牛粪中富含纤维素，有很多微生物，冻牛粪因温度低，故其内的微生物是耐低温微生物，D正确。故选D。5.P蛋白是非洲猪瘟病毒（ASFV）的重要抗原。为了能够快速诊断ASFV，研究者制备相应的杂交瘤细胞R3E9。有关叙述合理的是（）A.B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合获得的都是杂交瘤细胞B.杂交瘤细胞在培养过程中需要加入95%的O2和5%的CO2C.经过克隆化培养和抗体检测可筛选出能够产生P蛋白的R3E9D.体外培养R3E9可以获得针对P蛋白的单克隆抗体〖答案〗D〖祥解〗单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞；利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，用特定的选择培养基进行筛选，得到杂交瘤细胞；再进行克隆化培养和抗体检测，多次筛选后得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞；最后将所需的杂交瘤细胞在体外或小鼠腹腔内培养，从细胞培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。【详析】A、若只考虑细胞的两两融合，B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后可得到杂交瘤细胞、B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞3种融合细胞，A错误；B、杂交瘤细胞在传代培养中需要加入95%的空气和5%的CO2，B错误；C、克隆化培养和抗体检测可筛选出能够产生抗P蛋白抗体的R3E9，C错误；D、通过体外培养杂交瘤细胞可获得特定的单克隆抗体，D正确。故选D。6.关于制备单克隆抗体的过程，下列叙述错误的是（）A.为获得足量相应的B细胞，可多次给小鼠注射特定抗原B.细胞融合前，已免疫的脾细胞不需要经过原代培养扩大C.用PEG诱导细胞融合后，可加入过量培养基终止融合D.杂交瘤细胞在体外培养时，常会发生接触抑制现象〖答案〗D〖祥解〗制备的抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体，可用于早孕检测，其制备过程：提取HCG→将HCG注射至小鼠体内→获取B淋巴细胞→B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合→筛选出杂交瘤细胞→克隆上述杂交瘤细胞，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞→体外或体内培养→单克隆抗体。【详析】A、制备单克隆抗体的过程中，需反复向小鼠体内注射特定抗原，刺激相应B淋巴细胞的产生，A正确；B、一般认为，已免疫的脾细胞(含浆细胞)中已含足够数量的能产生特异性抗体的细胞，不需要通过原代培养扩大细胞数量，高度分化的细胞也不能通过原代培养扩大细胞数量，B正确；C、通过添加适宜浓度的PEG进行融合，在原生质体融合一定时间后，加入过量的培养基进行稀释，稀释的目的是降低PEG浓度，使其失去融合作用，C正确；D、杂交瘤细胞培养时不会出现接触抑制现象，D错误。故选D。7.目前肺类器官主要有两种培养方式：其一是诱导多能干细胞(iPS细胞)生成；其二是将肺上皮干细胞与筛选后的体细胞进行共培养(过程如图所示)。下列叙述错误的是（）A.iPS细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织B.肺类装配体的培养需要适宜的营养、温度、pH等基本条件C.培养肺类装配体时需定期更换培养液以便清除代谢废物等D.肺类器官A和B细胞中的DNA相同，RNA和蛋白质存在差异〖答案〗A〖祥解〗胚胎干细胞必须从胚胎中获取，这涉及伦理问题，因而限制了它在医学上的应用。2006年，科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞，获得了类似胚胎干细胞的一种细胞，将它称为诱导多能干细胞(简称iPS细胞)，并用iPS细胞治疗了小鼠的镰状细胞贫血。现在，用iPS细胞治疗阿尔茨海默病、心血管疾病等领域的研究也取得了新进展。因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应，所以科学家普遍认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。【详析】A、成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，iPS细胞类似胚胎干细胞，可以分化成各种细胞或组织，A错误；B、在体外培养动物细胞，需要满足相应的条件，所以肺类装配体的培养需要适宜的营养、温度、pH等基本条件，B正确；C、培养肺类装配体时需定期更换培养液以便清除代谢废物等，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，C正确；D、由题图可知，肺类器官A和B细胞是由肺上皮干细胞分化而来，细胞分化的实质是基因的选择性表达，所以肺类器官A和B细胞中的DNA相同，RNA和蛋白质存在差异，D正确。故选A。8.细胞融合技术在植物、动物、微生物领域都取得了一系列成果，如白菜一甘蓝、单克隆抗体、利用光合细菌与嗜热菌选育出了耐高温的光合细菌等。下列有关叙述正确的是（）A.两种细胞完成细胞融合的标志是细胞核的融合B.在制备原生质体时，细胞培养液的渗透压应等于或略高于细胞内渗透压C.将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞D.植物体细胞杂交技术属于有性杂交，包括细胞融合和植物组织培养技术〖答案〗B〖祥解〗细胞融合的理论基础是细胞膜具有一定的流动性，动物细胞融合特有的方法是用灭活的病毒诱导融合。【详析】A、植物细胞和细菌细胞融合完成的标志是新细胞壁的形成，A错误；B、在制备原生质体时，处于高渗或等渗溶液中，可以保护原生质体不因吸水过多而涨破，B正确；C、将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞有多种类型，可经过筛选获得杂交瘤细胞，C错误；D、植物体细胞杂交技术是一项无性繁殖技术，D错误。故选B9.大花蕙兰花色艳美，花期较长，且多在春节期间开放，具有极高的观赏价值。大花蕙兰多为杂交品种，种子繁殖无法保持其品种特性。使用组织培养技术将获取的大花蕙兰茎尖在短期内大量繁殖并保持其优良特性。下列叙述正确的是（）A.对茎尖进行植物组织培养，可获得抗病毒的试管苗B.诱导愈伤组织形成时需要每日给予适当时间的光照C.脱分化和再分化阶段需改变培养基中植物激素的比例D.进行组织培养前需要用纤维素酶和果胶酶处理茎尖〖答案〗C【详析】A、对茎尖进行植物组织培养，可获得不含有病毒的脱毒苗，该试管苗不能抗病毒，A错误；B、诱导愈伤组织形成时一般不需要光照，B错误；C、生长素与细胞分裂素的浓度、比例等都会影响植物细胞的发育方向，C正确；D、进行组织培养前需要对茎尖消毒处理，D错误。故选C。10.Cre酶是一种重组酶，LoxP是能被Cre酶识别的特异DNA序列。Cre/LoxP重组酶系统能够实现特异位点的基因敲除、基因插入等操作。一般而言，当一条DNA链上存在两个相同的LoxP序列且方向相同时，Cre酶能有效切除两个位点间的DNA序列，如图所示。下列说法正确的是（）A.Cre酶能将两个核糖核苷酸之间的磷酸二酯键断开B.无Cre酶存在的细胞因STOP的作用而无法发出荧光C.当有两个相同的LoxP序列时Cre酶就能有效切除一个D.启动子能启动绿色荧光基因翻译荧光蛋白的过程〖答案〗B〖祥解〗基因的表达包括转录和翻译两个步骤，转录是指以DNA的一条链为模板，按照碱基互补配对原则，合成RNA的过程。翻译是指以mRNA为模板，合成具有一定氨基酸排列顺序的蛋白质的过程。【详析】A、结合题意可知，Cre酶能将特定部位的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键断开，A错误；B、题意显示，当一条DNA链上存在两个相同的LoxP序列且方向相同时，Cre酶能有效切除两个位点间的DNA序列，图中的终止子会被切除，若无Cre酶存在，则图中STOP的作用会导致荧光蛋白基因不能表达，进而无法发出荧光，B正确；C、当有两个相同的LoxP序列且方向相同时，Cre酶就能有效切除两个位点间的DNA序列，包括其中的一个LoxP，C错误；D、启动子能启动绿色荧光基因的转录过程，D错误。故选B。11.施一公院士团队因对“剪接体的结构与分子机理研究”的突出贡献获得陈嘉庚生命科学奖。剪接体主要是由RNA和蛋白质组成，其作用是对最初转录产物加工，除去一些片段，并将剩余片段连接起来，形成成熟RNA。真核细胞中的基因表达过程为①转录②剪接③翻译三步，具体过程如下图所示。据图分析下列说法错误的是（）A.剪接体发挥作用的过程中涉及磷酸二酯键的断裂和形成B.剪接体剪接位置出现错误，不会导致基因序列发生改变C.图中③翻译时，核糖体在信使RNA上从左向右移动D.剪接体具有限制性核酸内切酶和DNA连接酶的双重功能〖答案〗D〖祥解〗DNA连接酶作用于磷酸二酯键，作用对象为DNA分子片段，形成重组DNA分子；DNA聚合酶作用于磷酸二酯键，作用对象为脱氧核苷酸，形成子代DNA分子。【详析】A、RNA的核糖核苷酸之间由磷酸二酯键连接，剪接体发挥作用的过程中涉及磷酸二酯键的断裂和形成，A正确；B、剪接体剪接的是RNA，剪接位置出现错误，不会导致基因序列发生改变，B正确；C、根据核糖体上的两个tRNA可知，核糖体在信使

RNA

上从左向右移动，C正确；D、限制性核酸内切酶和

DNA

连接酶的作用对象是DNA，剪接体剪接的是RNA，D错误。故选D。12.下图为数字PCR技术的原理示意图，下列相关叙述错误的是（）A.PCR每一循环包括变性、复性（退火）和延伸三步B.每个反应单位中都含有耐高温的RNA聚合酶C.每个反应单位有无荧光取决于是否含有靶分子D.数字PCR技术有利于提高病原体检测的灵敏度〖答案〗B【详析】A、PCR技术中的每个循环由变性、退火（复性）、延伸三个基本反应步骤构成，A正确；B、每个反应单位中都含有耐高温的DNA聚合酶，催化子链的延伸过程，B错误；C、荧光的出现是荧光探针水解导致的，荧光探针将首先与模板DNA的相应区段结合（靶分子），随着DNA复制延伸至荧光探针部位，导致荧光探针的水解进而产生荧光，显然，每个反应单位有无荧光取决于是否含有靶分子，C正确；D、根据荧光是否出现能检测目标DNA的存在，因此数字PCR技术更有利于提高病原体检测的灵敏度，D正确。故选B。二、综合题（每空2分，共52分）13.对厨余垃圾正确分类是减少细菌滋生污染环境的重要保障。某研究小组从一餐厨垃圾处理厂分离了能高效降解淀粉、脂肪等的细菌菌株并进行扩大培养和筛选，部分操作流程如下，请分析回答：（1）该研究小组从餐厨垃圾处理厂分离出目的菌种说明___________。（2）实验室中，配置好的培养基通常采取___________方式进行灭菌；倒平板时，防止杂菌污染的操作有___________（写出两点）。（3）若以上流程图是筛选降解淀粉的微生物的培养基，则应___________（加入/不加入）葡萄糖为微生物提供能源物质。鉴别降解脂肪的微生物的培养基中可以加入___________作为指示剂。（4）进行扩大培养的培养基与培养皿中的培养基，成分上的主要区别是___________。（5）经过步骤③，培养皿中出现了3种形态、颜色不一的菌落，这些菌落可以在此培养基上生长的重要因素之一是___________,这些菌落之间存在___________的种间关系。（6）菌落甲与乙周围都产生了透明圈（白色表示无蓝色，深色表示蓝色），产生透明圈的原因是___________。〖答案〗（1）寻找目的菌种要根据它对生存环境的要求到相应的环境中去寻找（2）①.高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）②.在超净工作台中操作；拔掉棉塞后，锥形瓶口通过酒精灯火焰进行灼烧灭菌；左手将培养皿打开一条缝，右手倒培养基，及时盖上培养皿皿盖；在酒精灯火焰旁倒平板（3）①.不加入②.苏丹Ⅲ染液（4）培养皿中是固体培养基，需要加入琼脂（5）①.可以获得生存必需的碳源（有机物）或可以分解淀粉、脂肪②.种间竞争（6）淀粉被细菌分解后，不能被碘液染色，从而形成透明圈【小问1详析】寻找目的菌种要根据它对生存环境的要求到相应的环境中去寻找，厨余垃圾富含淀粉、脂肪等物质，因此可从餐厨垃圾处理厂分离出目的菌种（高效降解淀粉、脂肪等的细菌菌株）。【小问2详析】配置好的培养基通常采取高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）；倒平板时，为防止杂菌污染，可在超净工作台中操作；拔掉棉塞后，锥形瓶口通过酒精灯火焰进行灼烧灭菌；左手将培养皿打开一条缝，右手倒培养基，及时盖上培养皿皿盖；在酒精灯火焰旁倒平板等。【小问3详析】以上流程图是筛选降解淀粉的微生物的培养基，淀粉可作为碳源，因此培养基中不加入葡萄糖为微生物提供能源物质。脂肪可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色，因此在鉴别降解脂肪的微生物的培养基中可以加入苏丹Ⅲ染液作为指示剂。【小问4详析】培养基M是扩大培养过程，可增加微生物的浓度，扩大培养的培养基为液体培养基；通过③接种到选择培养基上，该过程是为了筛选分离高效降解淀粉、脂肪等的细菌菌株，即培养皿中的培养基为固体培养基，需要添加凝固剂琼脂。【小问5详析】选择培养基上有淀粉和脂肪，经过步骤③，培养皿中出现了3种形态、颜色不一的菌落，说明这些菌落可以获得生存必需的碳源（有机物）或可以分解淀粉、脂肪。这些菌落在空间和资源上相互竞争，因此种间关系为为种间竞争。【小问6详析】淀粉与碘液变蓝，淀粉被细菌分解后，不能被碘液染色，从而形成透明圈，菌落甲与乙可分解淀粉，因此周围都产生了透明圈。14.下图为动物细胞培养的基本过程示意图。请回答下列问题：（1）培养时先要剪碎，然后用________酶分散细胞，制成B瓶中的细胞悬液。将细胞悬液转入C瓶中进行的初次培养称为________。（2）C、D瓶中的培养液为保证无菌、无毒的环境，需要添加一定量的________。培养过程中还需要提供O2和CO2等气体环境，CO2的作用主要是________。（3）动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。下图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。据图可知，培养________细胞一定需要添加血清。〖答案〗（1）①.胰蛋白（或胶原蛋白）②.原代培养（2）①.抗生素②.维持培养液的pH（3）正常〖祥解〗动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。【小问1详析】动物细胞培养时先要剪碎，然后用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分散细胞，制成B瓶中的细胞悬液，将细胞悬液转入C瓶中进行的初次培养称为原代培养。小问2详析】C、D瓶中的培养液为保证无菌、无毒的环境，需要添加一定量的抗生素；培养过程中还需要提供O2和CO2等气体环境，其中CO2的作用主要是维持培养液的pH。【小问3详析】分析曲线图：是否添加血清对于癌细胞的增殖影响不大，而对于正常细胞增殖影响很大，故培养正常细胞一定需要添加血清。15.某病毒是一种单链RNA病毒。该病毒的核酸检测采用“实时荧光定量RT­PCR”技术，通常在1～2h内即可得到检测结果。此方法是PCR技术和荧光检测技术的结合，利用荧光染料或荧光标记的特异性探针，对PCR产物进行检测分析。步骤如下：（1）利用样本中提取的RNA获得cDNA，过程①使用________酶。需要将样本中的RNA经过过程①形成cDNA后再进行PCR扩增的原因是_____________。（2）PCR技术一般要经历三十多次循环，每次循环可以分为变性、复性和延伸三步，每一个步骤都要控制好相应的温度，延伸的温度________(填“大于”“小于”或“等于”)复性的温度，而________(填“大于”“小于”或“等于”)变性的温度。在循环之前，常要进行一次________，以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率。（3）过程②中对cDNA序列进行扩增，需设计两种引物。下图为cDNA的部分序列，请问两种引物的结合位置是________。（4）在检测过程中，随着PCR的进行，反应产物不断累积，“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加，为了保证检测结果的准确性，一般要达到或超过阈值时才能判断为阳性，最终确诊。虽然RT­PCR技术是当前被广泛认可的检测手段之一，但仍然存在有“假阴性”现象，结合上述内容，分析可能产生“假阴性”的因素有________(填字母)。a．取样不规范导致所获样本量不足b．样本运输中出现了损坏c．检测样本被污染d．病毒相应关键序列发生了改变〖答案〗（1）①.逆转录##反转录②.PCR扩增必须以DNA为模板，RNA不能作为PCR扩增的模板（2）①.大于②.小于③.预变性（3）Ⅱ和Ⅲ（4）abcd【小问1详析】利用样本中提取的RNA获得cDNA属于逆转录的过程，故需要逆转录酶的催化。PCR扩增必须以DNA为模板，RNA不能作为PCR扩增的模板，所以需要将样本中的RNA经过逆转录的过程合成cDNA。【小问2详析】延伸的温度为72℃左右，复性的温度为50℃左右，变性的温度一般为90℃以上，所以延伸的温度大于复性的温度，小于变性的温度。为了让DNA双链充分解聚，与引物更好地结合，在循环之前，常要进行一次预变性。以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率。【小问3详析】在引物作用下，DNA聚合酶从引物3’端开始延伸DNA链，且DNA分子中互补的两条链均表现为反向平行关系，所以引物的结合