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兽醫微生物學绪论及第壹章细菌的形态与构造1、微生物:是存在于自然界的壹大群体型微小、构造简朴、肉眼直接看不見,必须借助光學显微镜或電子显微镜放大数百倍、数仟倍,甚至数萬倍才能观测到的微小生物。2、微生物的种类:三型八大类(三菌四体壹病毒)①真核细胞型微生物:细胞核有核膜和核仁,细胞器完整,如真菌。②原核细胞型微生物:仅有原始核,無核膜、核仁。细胞器很不完善。DNA和RNA同步存在。有细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体。③非细胞型微生物:是最小的壹类微生物。無經典的细胞构造,只能在活细胞内生長繁殖。核酸类型為DNA或RNA。病毒属之。3、微生物的特點·体积小、面积大;·代謝能力强,代謝类型多;·生長繁殖快,轻易培养;·易变异,适应强;·种类多,分布广。4、细菌的基本形态细菌按其外形,重要有:球菌、杆菌、螺旋状菌。①球菌菌体呈球形或近似球形,根据细胞分裂的方向及分裂後的各子细胞的空间排列状态不壹样,可将球菌分為如下几种:單球菌、双球菌、链球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌等。②杆菌杆菌是细菌中种类最多的类型,因菌种不壹样,菌体细胞的長短、粗细等均有所差异。杆菌的形态:短杆状、長杆状、棒杆状、梭状杆状、月亮状、竹节状等;按杆菌细胞繁殖後的排列方式则有链状、栅状、“八”字状等。③螺旋菌:弧菌、螺菌。5、科赫法则·特殊病原菌在同壹疾病中查見,健康者中不存在;·该病原菌能被分离培养得纯种;·该纯培养物接种至易感動物,能导致同样病症;·自试验感染的動物体内能重新获得该病原菌的纯培养。6、细菌的衰老型或退化型:指在不良环境或老龄期時,细菌會出現与正常形状不壹样样的個体。若将其重新置于正常培养环境時可恢复正常状态。7、细菌的多形性:指处在衰老型或退化型状态的细菌虽然置于合适的环境中生長,其形状也与正常的不壹致,如嗜血杆菌。8、菌落:單個细菌在合适的固体培养基表面或内部,通過壹段時间培养後,生長繁殖出数量巨大的菌体,形成肉眼可見、有壹定形态的群体。可用于细菌的分离、纯化、计数和鉴定。9、菌苔:各“菌落”互相连接形成壹片。10、细菌活的非可培养状态(VBNC):指细菌处在不良环境条件下,细胞缩成球形,用常规措施培养不能生長繁殖,但仍是活的壹种特殊存在形式,在壹定条件下可复苏,并仍具毒性。11、细菌的构造·基本构造:细胞壁、细胞膜、细胞质、核体。·特殊构造:荚膜、S层、鞭毛、菌毛、芽胞。12、磷壁酸的功能·形成表面抗原决定簇的成分;·提高膜結合酶的能力(使细胞壁形成负電荷环境,以利于吸附镁离子,维持酶活);·保证革兰氏阳性致病菌(如A族链球菌)与其寄主间的黏连;·构成噬菌体的吸附位點。13、细胞壁①格兰阳性菌·肽聚糖·磷壁酸②革兰阴性菌⑴脂多糖(LPS)构成:·类脂A:無种属特异性,内毒素的重要毒性成分;·侧链多糖:即菌体抗原,有种、型特异性;·关键多糖:有属特异性。功能:·可以吸附Ca2+、Mg2+等阳离子;·為噬菌体提供特异性吸附受体。⑵外膜蛋白(OMP):包括微孔蛋白、脂蛋白。⑶周质间隙14、细胞壁的功能·维持菌体外形和提高机械强度,保护细菌耐受低渗环境;·阻挡有害物质進入菌体;·维持菌体内外离子平衡;·参与细菌的正常分裂;·表面带有多种抗原分子,可诱发机体的免疫应答。15、细菌细胞膜不含胆固醇。16、拟核:细菌不具有成形的核,無核膜、核仁,遗传物质称為拟核(核质)。核质由單壹密闭环状DNA分子反复回旋卷曲盘绕构成松散网状构造。17、荚膜①概念:某些细菌在其细胞壁外周产生的壹层包围整個菌体、边界清晰的黏液样物质,理化措施清除後并不影响细胞的生命活動。②功能·抗吞噬作用:荚膜具有抵御宿主吞噬细胞的作用,因而荚膜是病原菌的重要毒力因子。·抗有害物质的损伤作用:荚膜处在细胞的最外层,可保护菌体防止和減少受有害物质的损伤。·营养物质的贮存場所与废物排出。18、S层的功能·分子筛和离子通道;·屏障作用,保护细菌;·黏附宿主细胞;·重要的表面抗原。19、鞭毛的功能·是运動器官;·有抗原性;·与致病性有关。20、菌毛·与细菌的运動無关;·菌毛蛋白具有抗原性;·必须用電镜观测;·分壹般菌毛、性菌毛。21、细菌细胞壁缺陷型(细菌L型):细胞壁受损後仍能生長和分裂的细菌。在壹般环境中不耐受菌体内的高渗透压會涨破死亡,在高渗环境中仍可存活。革兰阳性菌细胞壁缺失後,原生质仅被壹层细胞膜包住——原生质体。革兰阴性菌肽聚糖层受损後尚有外膜保护——原生质球。将两個不壹样的原生质体或原生质球融合并再生成壹种细菌的技术,称原生质体融合技术。22、研究L-细菌的意义⑴诊断困难,由于L-细菌在壹般培养条件下不易成功,因此常误诊為非病原体感染;⑵對干扰细胞壁合成的药物敏感性下降,如青霉素,多黏菌素等;⑶由于细胞壁的少或無,使抗原性下降,L-细菌的感染可逃避正常菌抗体的袭击而長期存在;⑷与慢性病和某些复发性疾病有关;用药——导致L型——對药不敏感——深入感染等⑸运用L-细菌是進行细菌的基础研究。23、革兰氏染色①原理G+菌:肽聚糖含量高,交联度大,當乙醇脱色時,肽聚糖因脱水而孔径缩小,故結晶紫-碘复合物被阻留在细胞内,细胞仍呈紫色。G-菌:肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其构造收缩,因其含脂量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,酒精将细胞脱色,呈無色,沙黄(石炭酸复紅)复染呈紅色。②措施细菌標本固定、結晶紫初染、碘液媒染、生成結晶紫-碘复合物、95%酒精脱色、稀释的复紅复染。③用途:细菌形态鉴定、菌种鉴定④意义:鉴别细菌,选择抗菌药物,研究细菌對抗生素的敏感性、對結晶紫的敏感性,细菌的等電點,指导临床用药。24、革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌细胞壁成分比较革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌细胞壁厚度层次与否含磷壁酸脂多糖對青霉素敏感性對溶菌酶敏感性厚(15~80nm)重要為1层肽聚糖层有無高高薄(10~15nm)2层,肽聚糖层和外膜层無有低或不敏感较低25、芽胞:某些革兰阳性菌在壹定环境条件下,在菌体内部形成的壹种圆形或卵圆形的休眠体。芽胞形成後细菌即失去繁殖能力。①芽胞的构造,由外向内:外衣→外膜→皮质→芽孢壁→内膜→芯髓。②性质:壹种细菌只形成壹种芽胞,壹种芽胞发芽也只生成壹种菌体,细菌数量并未增長,因而芽胞不是细菌的繁殖方式。与芽胞相比,未形成芽胞而具有繁殖能力的菌体称為繁殖体(营养体)。③特點·對高温、干燥、辐射、化學药物有强大抵御力。·含水量低、壁厚而致密、通透性差、不易著色、折光性强。·芽胞内新陈代謝几乎停止,处在休眠状态,但保持潜在萌发力。·不是繁殖器官,壹种芽胞萌发只产生壹种营养状态的细胞。④意义·對外界不良环境有强大的抵御力,是细菌保留生命的壹种休眠构造;·消毒的指標是以杀灭芽胞為准(121℃/30min,朊病毒除外);·反恐怖战争需要。第二章细菌的生理1、细菌与真核生物新陈代謝的重要区别·生長和繁殖速度快·运用多种化合物作為能源能力强·营养需求多种多样·可运用超常流水线合成大分子物质·能产生特殊物质2、细菌物质摄取方式①單纯扩散(被動扩散)②增進扩散③积极运送④基团转位需要载体蛋白和能量,有两個突出特點:·转运過程中物质发生了化學变化;·重要存在于厌氧菌和兼性厌氧菌中。3、時代時间:壹种菌体分裂為两個菌体所需的時间。4、生長曲线:将细菌接种在液体培养基并置于合适温度中,定期取样检查活菌数,可发現细菌生長過程具有规律性。以時间為横坐標,以活菌数的對数為纵坐標,可得壹条生長曲线。5、细菌生長繁殖的四個時期①缓慢期:是细菌来到新环境的壹种适应過程。特點:·代謝活跃,合成并积累所需酶系统;·RNA含量明显增多,但DNA含量無变化;·细菌数不增長。②對数期:细菌生長迅速,以恒定速度進行分裂繁殖,活菌数以几何级数增長,到达顶峰,生長曲线靠近壹条斜的直线。此時病原菌致病力最强,形态、染色特性及生理活性较經典,對抗菌药物的作用较敏感。OD=0.4~0.6认為处在對数期。③稳定期:因营养的消耗、代謝产物的蓄积,细菌繁殖速度下降,死亡数逐渐上升,新繁殖的活菌数与死菌数大体平衡。细菌的形态及生理性状常有变化,格兰阳性菌此時可染成阴性,毒素、抗生素、芽孢多此時产生。④衰亡期:死菌数超過活菌数,细菌的菌体变形或自溶,染色不經典,难以進行鉴定。6、培养基①概念:是人工配制的基质,具有细菌生長繁殖必需的营养物质。培养基制成後,要經灭菌处理。②营养条件·基本营养·氧气:根据细菌對氧的需求,可分為需杨菌、厌氧菌及兼性厌氧菌·厌氧培养基:是為培养厌氧菌而设计的·温度:根据细菌對温度的适应范围,可将细菌分為嗜冷菌、嗜温菌、嗜热菌·酸碱度:多数病原菌的最适ph為7.2~7.6,鼻疽伯氏菌偏酸,霍乱弧菌偏碱7、培养基的分类①按营养成分·基础培养基:基本营养成分·营养培养基:在基础培养基中添加某些其他营养物质,如葡萄糖、血液、血清、生長因子等②按状态·固体培养基:1.5%~2%琼脂,用于细菌分离纯化·半固体培养基:0.5%琼脂,作穿刺试验·液体培养:扩增纯培养的菌体③按功能·鉴别培养基:在培养基中加入特定底物,观测细菌生長後的分解底物,從而鉴别细菌。·选择培养基:在培养基中加入某种化學物质,使克制壹类细菌生長,而有助于另壹类细菌生長,從而将後者选择出来。麦康凯培养基内含胆盐,能克制革兰阳性菌的生長,大肠杆菌及沙门菌可生長。·厌氧培养基:用于厌氧菌的分离、培养和鉴别。将壹般培养基放在無氧环境中培养,或者使培养基自身成為無氧环境。庖肉培养基是常用的厌氧培养基之壹,其中不含饱和脂肪酸和谷胱甘肽的肉渣起到了還原剂的作用。8、分离培养:将標本或培养物划线接种在固体培养基表面,因划线的分散作用,許多原混杂的细菌在固体培养基表面散開。9、液体培养基中的生長現象·浑浊:大多数细菌·沉淀:链状生長的细菌·菌膜:专性需氧菌,如結核杆菌、枯草杆菌10、生化反应:细菌對糖、蛋白质的分解能力不壹样,代謝产物各异,运用生物化學措施鉴别不壹样细菌称為细菌的生化反应。重要有氧化酶试验、VP试验、甲基紅试验、吲哚试验等。11、生物被膜:壹般生活在自然界中的细菌并非以游离的單個菌体形式存在,而是以群落形式出現,這种群落的重要体現形式称生物被膜。是壹种被自身产生的多聚基质包裹著菌细胞的构造群体,是细菌具有保护性的壹种生長模式,其构造中具有水和营养物质的通道。12、生物膜的特性①生長速度缓慢且不均壹。细菌生物膜是在不利环境下形成的,环境变化對其影响较小。在膜表面的细菌,由于营养等原因,分裂较快,体积较大,内层相反。②细菌毒力下降毒力强的细菌形成被膜菌後,壹般不會使動物致死。③耐药性提高④逃逸宿主的免疫监视多糖膜能減少免疫细胞和免疫分子的趋化,使被膜菌与宿主長期共存。13、密度感应(QS):多数细菌能合成并释放壹种称為自身诱导素(信息素)的信号分子,胞外信号分子浓度随细菌密度的增長而增長,到达壹种临界浓度時,信息素會启動菌体中有关基因的体現,调控细菌的生物行為,以适应环境的变化,這壹現象称群体感应调整。14、微生物种群间的关系:互生、共生、拮抗、寄生。15、正常菌群与其宿主之间形成共生关系,详细体現為营养、免疫、生物拮抗三方面。16、菌膜病:牙周炎、中耳炎、壞死性筋膜炎、心内膜炎。17、無特定病原体動物(SPF):指不存在某些特定的具有病原性或潜在病原性微生物的動物。18、感受态:细胞生活周期中壹种特殊的生理状态。第三章消毒与灭菌1、灭菌:指杀灭物体中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的措施。2、消毒:指杀灭物体中病原微生物的措施。只规定到达消除传染性的目的,對非病原微生物及其芽胞、孢子并不规定所有杀死。3、防腐:指制止或克制微生物生長繁殖的措施。4、無菌:指没有活微生物的状态。5、無菌操作:防止微生物進入机体或局部环境的操作技术。6、物理消毒灭菌法:热力灭菌法、辐射灭菌法、超声波灭菌法、滤過灭菌法。7、热力灭菌法:干热灭菌、湿热灭菌。①两者比较同壹温度下,湿热灭菌效力比干热灭菌大。原因:·湿热中细菌菌体蛋白较易凝固;·湿热的穿透力比干热大;·湿热的蒸汽有潜热存在。②干热灭菌法·火焰灭菌法·热空气灭菌法干热灭菌器合用于高温下不损壞、不变质的物品,如玻璃器皿、瓷器等。灭菌温度需160℃维持2h。③湿热灭菌法⑴煮沸灭菌⑵巴氏消毒法:以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物,而不致严重损害其营养成分和風味。·低温维持巴氏消毒法63~65℃/30min·高温瞬時巴氏消毒法71~72℃/15s·超高温巴氏消毒法132℃/1~2s⑶流通蒸汽灭菌法:是壹种常压蒸汽消毒法,细菌繁殖体15~30min可杀灭,但芽胞不全被杀灭。⑷间歇灭菌法/丁达尔灭菌法(反复多次流通蒸汽):用于不耐高温的培养基,如鸡蛋培养基、血清培养基、糖培养基的灭菌。⑸高压蒸汽灭菌8、辐射灭菌法①非電离辐射·可見光线·曰光·紫外线波長200~300nm部分有杀菌作用,试验室常用的紫外线杀菌灯紫外线波長為253.7nm,用于:微生物试验室、無菌室、手术室的空气消毒;不能用高温或化學药物消毒物品的表面消毒;诱变育种。·紅外线:紅外线烤箱·微波②電离辐射:α射线、β射线、γ射线、χ射线用途:忌热物品的灭毒消菌、食品保藏和育种等方面。9、超声波灭菌法目前超声波重要用于裂解细胞,提取细胞组分。10、滤過除菌法:通過机械、物理阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的措施,不能除去病毒、支原体以及细菌L型等微生物。11、消毒剂:用于杀灭病原微生物的化學药物。①分类·使菌体蛋白质变性或凝固,如酚类(高浓度)、醇类、重金属盐类(高浓度)、酸碱类;·损伤细菌细胞膜,如酚类(低浓度)、表面活性剂;·干扰细菌的酶系统和代謝,如某些氧化剂、重金属盐类(低浓度);·变化核酸的功能,如染料。②影响消毒剂作用的原因·消毒剂的性质、浓度和作用時间;·微生物的污染程度;·微生物的种类和数量;·环境中有机物;·温度、湿度、酸碱度;·化學拮抗物。12、防腐剂:用于克制微生物生長繁殖的化學药物。13、抗生素:某些微生物代謝過程中产生的壹类能克制或杀死另某些微生物的物质。14、细菌素:某种细菌产生的具有杀菌作用的蛋白质,只作用于同种不壹样菌株的细菌及亲缘关系相近的细菌。食品防腐领域的应用:细菌素Nisin已被60多种国家同意作為食品添加剂用于食品防腐。15、试验室生物安全的意义:防止病原微生物及其他有害生物或物质传入试验室;防止病原微生物等传出试验室;试验人员的自身安全防护。第四章细菌的感染与致病机理1、感染:病原微生物在宿主体内持续存在或增殖。2、发病:病原微生物感染後,對宿主导致明显的损害。3、病原菌:导致机体发病的细菌。4、致病性:病原菌在壹定条件下,能在宿主体内引起感染的能力称致病性。致病性是细菌种的特性之壹。5、毒力:病原菌致病力的强弱程度,同壹细菌的不壹样菌株,其毒力不壹样,毒力是菌株的特性。6、基因水平柯赫法则·在致病菌株中检出某些基因或其产物,而無毒力菌株中無;·有毒力菌株的某個基因被损壞,则菌株的毒力減弱或消除,或将此基因克隆到無毒菌株内,後者成為有毒力菌株;·将细菌接种動物時,這個基因应在感染的過程中体現;·在接种動物检测到這個基因产物的抗体,或产生免疫保护。7、半数致死量(LD50):能使接种的试验動物在感染後壹定期限内死亡二分之壹所需的微生物量或毒素量。8、半数感染量(ID50):某些病原微生物只能感染试验動物、鸡胚或细胞,但不引致死亡,用ID50表达其毒力。9、干扰或逃避宿主的防御机制①抗吞噬作用·不与吞噬细胞接触(破壞,链球菌溶血素)·克制吞噬细胞的摄取(荚膜、菌毛)·在吞噬细胞内生存(沙门菌、李氏杆菌)·杀死或损伤吞噬细胞②抗体液免疫机制·抗原伪装或抗原变异,金黄色葡萄球菌、SPA·分泌蛋白酶降解免疫球蛋白,嗜血杆菌分泌IgA蛋白酶·逃避补体,克制抗体产生,LPS、OMP、荚膜、S层③内化作用:某些细菌粘附于细胞表面後,能進入吞噬细胞或非吞噬细胞内部的過程。意义:宿主细胞為進入其内的细菌提供了壹种增殖的小环境和呵护所,使细菌逃避宿主免疫机制。也可随吞噬细胞的游走扩散至其他部位,导致广泛病变。10、外毒素①概念:某些病原菌在生長繁殖過程中所产生的對宿主细胞有毒性的可溶性蛋白质,大多数外毒素在菌体内合成後必须分泌于胞外。②特性·毒性作用极强·有高度的特异性·不耐热,多数在60~80℃經10~80min即失去毒性·對宿主不致热·抗原性强,刺激机体产生中和抗体③构成·A亚單位:毒素的活性中心,决定毒素的毒性效应·B亚單位:結合單位,协助A亚單位。可單独与细胞膜受体結合,從而阻断完整毒素結合细胞。刺激机体产生對应抗体,可作為良好的亚單位疫苗。11、抗毒素:外毒素刺激机体产生特异性抗体,可用于紧急治疗和防止。12、类毒素:外毒素在0.4%甲醛溶液作用下,通過壹段時间可以脱毒,但仍保留原有抗原性,称為类毒素。13、内毒素①概念:指革兰阴性菌外膜中的脂多糖(LPS)成分,细菌在死亡後破裂或用人工措施裂解菌体後才释放。②特性·毒性弱,很少致死·致发热、腹泻、呕吐·耐热·抗原性较弱,免疫应答局限性以中和毒性③构成·多糖侧链·关键多糖·类脂A:重要的毒性成分(保守)④检测·鲎试验:鲎变形细胞溶解物14、内毒素与外毒素的比较种类内毒素外毒素来源革兰阴性菌革兰阳性菌及部分阴性菌存在部位细胞壁成分、细菌裂解後释放活菌分泌或细菌溶解後散出化學成分脂多糖蛋白质稳定性好,160℃/2~4h破壞差,60~80℃/30min破壞毒性作用较弱,多种内毒素作用大体相似,起休克,发热强,對机体组织器官有选择性,引起特殊临床体現抗原性弱,能刺激机体形成抗体,但無中和作用,甲醛处理後不能形成类毒素强,能刺激机体形成抗毒素,經甲醛脱毒後能形成类毒素15、机會致病菌:正常菌群与宿主之间,正常菌群之间,通過营养竞争、代謝产物的互相制约等原因,维持著良好的生存平衡。在壹定条件下這种平衡关系被打破,本来不致病的正常菌群中的细菌可成為致病菌,此类细菌称机會性致病菌。16、细菌毒力減弱措施·長時间在体外持续培养传代·在高于最适生長温度条件下培养·在具有特殊化學物质的培养基中培养·在特殊气体条件下培养·通過非易感動物·通過基因工程的措施17、细菌毒力增强的措施:回归易感動物。第五章细菌的遗传变异1、细菌的遗传:指亲代细菌与子代细菌的相似性,它使细菌的性状保持相對稳定,是多种细菌存在的根据。2、细菌的变异:指亲代与子代及子代细菌之间的不相似性,细菌得以发展進化。3、细菌常見的变异現象·形态和构造变异·菌落形态变异·抗原变异·抗性变异·代謝变异·毒力变异4、质粒:细菌染色体外的遗传物质,编码细菌多种重要的生物學形状。·严紧型复制·按转移的特性,可分為接合性质粒、非接合性质粒·自杀性质粒·穿梭载体:指具有两個亲缘关系不壹样的复制子,能在两种不壹样的生物中复制。5、转位因子:是细菌基因组中能变化自身位置的壹类独特的DNA片段。6、毒力岛(PAI):指病原菌的某個或某些毒力基因群,分子构造与功能有别于细菌染色体,但位于细菌染色体之内。7、基因突变:指生物细胞遗传物质DNA分子构造忽然发生了稳定的可遗传变化。是生物進化的壹种重要原因。8、基因转移:外源性的遗传物质由供体菌進入受体菌细胞内的過程。重组:转移的基因与受体菌DNA整合在壹起。基因转移和重组的重要方式:转化、转导、接合、原生质融合等。9、转化:供体菌游离的DNA片段直接進入受体菌,使受体菌获得新的性状。10、转导①概念:以温和噬菌体為媒介,把供体菌的DNA小片段携带到受体菌中,通過互换与整合,使受体菌获得供体菌的部分遗传性状。②类型:普遍性转导(任何)、局限性转导(特定,λ)·普遍性转导:被装入的DNA片段可以是供体菌染色体上的任何部分。(完全转导,流产转导)·局限性转导:為噬菌体所介导的供体菌染色体上個别特定基因的转导。(特异性转导)12、接合:是两個完整的细菌细胞通過性菌毛直接接触,由供体细菌将质粒DNA转移給受体细菌的過程。第六章细菌的分类与命名1、古细菌無肽聚糖。2、微生物分类的最基本單元是种,另壹方面是属。3、菌株:是不壹样来源的某壹细菌的纯培养物。4、细菌的命名根据“国际细菌命名法规”的规定,學名用拉丁文,遵照“双名法”。每种细菌的拉丁文名称由属名和种名两部分构成,属名第壹种字母大写,其他均小写。5、细菌分类采用老式的双歧检索条目分类法。6、目前公认的细菌分类体系是《伯吉系统细菌學手册》。7、《国际系统与演化微生物學杂质》是细菌分类命名的世界公认的权威期刊。8、国际公认的菌种保藏权威机构是美国經典培养物保藏中心(ATCC)。第二拾壹章病毒的构造1、病毒子:壹种形态和构造上完整的病毒颗粒。2、病毒的特點⑴形体微小,能通過细菌滤器,在電子显微镜下才能观测;⑵没有细胞构造;⑶每种病毒只含壹种核酸,DNA或RNA;⑷既無产能酶系,也無蛋白质和核酸合成酶系,只能运用宿主活细胞内現成代謝系统合成自身的核酸和蛋白质成分;⑸對抗生素不敏感,對干扰素敏感;⑹以复制方式繁殖。3、痘病毒最大,圆环病毒最小。4、動物病毒中螺旋對称的病毒均属有囊膜的單股RNA病毒。5、除痘病毒外,所有脊椎動物DNA病毒均為20面体。6、病毒的化學构成:核酸、蛋白质、脂质、碳水化合物、其他构成。7、核酸的特點⑴病毒只含壹种核酸。构成病毒体的芯髓;⑵核酸类型多样化;⑶分子量小,基因组构造简朴,所含基因组数目少;⑷病毒基因组核酸复制多样化;⑸病毒核酸更轻易受宿主细胞的影响而发生基因突变和重组;⑹有些病毒清除囊膜和衣壳,裸露的DNA或RNA也能感染细胞,這种核酸称传染性核酸。8、感染性核酸具有条件·病毒核酸能作為mRNA或能运用宿主细胞的RNA聚合酶转录病毒的mRNA;·病毒核酸不分节段。9、将mRNA的碱基序列作為原则,与其相似的称正股,与其互补的称负股。某些病毒(布尼病毒、砂粒病毒)部分為正负链,称為双向。10、核酸可分單股或双股、线状或环状、分节段或不分节段。11、拟病毒又称类类病毒,卫星RNAs。指壹类包裹在真病毒粒子中的缺陷类病毒。拟病毒极其微小,仅由裸露的RNA(300~400個核苷酸)或DNA构成。是壹种环状單链RNA。被侵染的植物病毒被称為辅助病毒,拟病毒必须通過辅助病毒才能复制。12、蛋白质①构造蛋白:指构成壹种形态成熟的、有感染性的病毒颗粒所必需的蛋白质。是构成病毒衣壳的所有成分和囊膜的重要成分。②非构造蛋白:指由病毒基因组编码,在病毒复制或基因体現调控過程中具有壹定功能,但不結合于病毒颗粒中的蛋白质。③蛋白质功能·保护病毒核酸,使其免受核酸酶或其他理化原因的破壞;·参与病毒感染细胞的過程,决定病毒對宿主细胞的亲嗜性;·抗原性:诱导特异性抗体、致敏淋巴细胞。13、脂类、糖类·重要存在于囊膜中,脂溶剂可清除囊膜,使病毒丧失活性;·来自宿主细胞,与囊膜病毒的吸附和穿入宿主细胞的作用有关。14、病毒的命名要由公认的国际专家小组负责不用拉丁文双名法,而用英文或英語化的拉丁文,只用單名,目、科、属分别用拉丁文後缀“-virales”、“-viridae”及“-virus”。15、类病毒:没有蛋白质外壳的病毒,由环状RNA分子构成,在植物中发現。16、拟病毒:指壹类包裹在真病毒粒子中的缺陷类病毒。17、感染性核酸:是由病毒质粒或感染细胞中分离出的具感染性的核酸。18、朊病毒:只含传染性蛋白,無核酸。第二拾二章病毒的复制1、复制:病毒在活细胞内,以其基由于模板,在酶的作用下,分别合成病毒基因及蛋白质,再组装成完整的病毒颗粒。2、复制周期:從病毒進入宿主细胞開始,通過基因组复制和病毒蛋白合成,到释放子代病毒的全過程。3、病毒的复制周期:吸附和穿入、脱壳、生物合成、组装和释放。4、隐蔽期:病毒侵入易感细胞後的短時间内完全消失,细胞内也找不到。该感染的病毒颗粒,直到新的病毒子出現為止,這壹段時间称為病毒复制的隐蔽期。生物合成阶段,病毒处在隐蔽期。5、感染比:在壹种系统中,感染病毒细胞数与细胞總数之比。6、病毒的壹步生長曲线:在几乎100%感染比体系中,壹种病毒几乎同步感染所有细胞,并進行病毒复制。這种同步复制绘制出的病毒生長曲线,称病毒的壹步生長曲线。7、某些病毒能凝集紅细胞,称為病毒的血凝作用。8、病毒的特异抗体可克制其血凝作用,称為血凝克制作用。9、血吸附是壹种特殊形式的血凝作用,是将紅细胞吸附于病毒感染的宿主细胞表面。10、根据病毒基因组怎样转录称mRNA、怎样指令合成蛋白质,病毒的生物合成過程可基本归于6大类:双股DNA病毒、單股DNA病毒、單正股RNA病毒、單负股RNA病毒、逆转录病毒、双股RNA病毒。11、病毒的mRNA是多顺反子。第二拾三章病毒的遗传与進化1、突变:指基因组中核酸碱基次序上的化學变化,可以是壹种核苷酸的变化,也可以是成百上仟個核苷酸的缺失或易位。2、答复突变(第二位點突变或基因内校正):突变体通過第二次突变又完全或部分地恢复為本来的基因型和体現型。由于它的体現型效应被基因组第2位點的突变克制,因此又称克制突变。3、缺损型干扰(DI)突变株:是壹种缺失突变的产物。自身不能复制,在亲本野生株作為辅助病毒存在時才能复制,但又干扰亲本病毒的复制,导致後者数量減少。4、DI突变株特點⑴含正常的衣壳蛋白质⑵只含正常基因组的壹部分⑶只在正常同源病毒同步存在時繁殖,這時同源病毒成為辅助病毒⑷特异性干扰同源病毒的繁殖,經持续传代後,DI颗粒增多5、表型变异·毒力变异·抗原性变异(抗体逃逸变异株)·空斑变异(空斑变异株)·条件致死性突变株6、DNA病毒复制具校正功能,RNA复制缺乏校正机制,病毒RNA复制的錯误率遠高于病毒DNA。7、分子内重组:将两個有亲缘关系但生物學性状不壹样的毒株感染同壹宿主细胞,可发生核酸水平上的互换,产生兼有两亲本特性的子代,称重组。8、重配:對于分节段的RNA病毒,通過互换RNA节段而進行的重组称重配。9、赔偿作用:指在感染的细胞中,病毒蛋白之间由于互相作用的成果,拯救了壹种或两种病毒或增長了病毒的产量。10、表型混合①概念:两种病毒混合感染後,壹种病毒的基因组偶尔装入另壹病毒的衣壳内,或装入两個病毒成分构成的衣壳内,发生表型混合。②特點·两株病毒混合感染時,装配過程发生錯误形成;·重要体現為耐药性,抗原性等变化,基因并未变化,变化的生物學形状不能遗传。11、基因型混合:指两种病毒的核酸偶尔混合装在同壹病毒衣壳内,或两种病毒的核衣壳偶尔包在壹种囊膜内,但它們的核酸都未重组合,因此没有遗传性。第二拾四章病毒与细胞间的互相作用1、病毒是严格的细胞内寄生微生物,培养病毒必须用细胞。根据病毒的不壹样选用敏感動物(動物接种)、鸡胚(鸡胚接种)或离体细胞進行分离培养(细胞培养)。2、動物接种的优缺陷①長处:不需要复杂的仪器设备、技术简朴、易成功②缺陷:個体差异大、价格昂贵、数量有限、需要隔离畜舍3、鸡胚接种的优缺陷①長处:技术简朴、来源充沛、价格低廉、数量可大、不需特殊设备②缺陷:诸多病毒不能适应(重要是哺乳動物的病毒)4、细胞培养:指运用机械、酶或化學措施使動物组织或传代细胞分散成單個乃至2~4個细胞团悬液進行培养。①長处⑴每個细胞生理特性基本壹致,對病毒易感性相等⑵無個体差异,精确性和反复性好⑶可严格执行無菌操作⑷细胞培养自身就能显示病毒的生長特性⑸应用空斑技术可進行病毒的克隆化②细胞的类型根据细胞来源、染色体特性及传代次数,可分為三种类型:⑴原代细胞:動物组织經胰蛋白酶消化处理,使细胞分散而得到的细胞。⑵二倍体细胞株:将長成單层的原代细胞消化分散成單個细胞,继续培养传代,其染色体数与原代细胞同样,保持其二倍染色体数目的细胞,称為二倍体细胞。⑶传代细胞系:能在体外持续增殖传代的细胞,大多数由癌细胞或二倍体细胞突变而成。5、细胞培养的措施⑴静置培养:试验室常用,细胞悬液装瓶,5%CO2温箱静置培养,细胞沉降并贴附在玻面上生長分裂,最终長成單层。⑵旋转培养:大规模生产疫苗,细胞在玻瓶内生長時,玻瓶不停缓慢旋转,细胞贴附于玻瓶四面,長成單层。⑶悬浮培养⑷微载体培养6、细胞病变效应(CPE):由病毒感染导致的细胞损伤,在光學显微镜下观测。⑴细胞圆缩,如痘病毒和呼肠孤病毒等;⑵细胞聚合,如腺病毒;⑶细胞融合形成合胞体,如副粘病毒和疱疹病毒;⑷有些病毒能形成包涵体。7、合胞体:病毒感染後导致感染细胞及相邻细胞细胞膜融合的产物,体現為若干细胞的相邻

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