版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
1/1S007红细胞ABO血型(正反定型)、RhD鉴定标准化操作规程S007红细胞ABO血型(正反定型)、RhD鉴定标准化操作规程标准化操作规程作业指导书SOPREG007.01赣州市人民医院输血科SOPREG007.01标准化操作规程作业指导书SOPREG007.01赣州市人民医院输血科红细胞ABO血型(正反定型)、RhD鉴定标准化操作规程一、目的为保证血液及血液成分的红细胞ABO血型与RhD血型在临床上同型输注,确保临床输血安全、有效,根据《临床输血技术规范》第十五条特制定本标准化操作规程。
二、方法采用微柱凝胶凝集试验检测红细胞ABO血型(正反定型)与RhD血型。
三、原理将人红细胞血型抗原与相应的抗体发生的凝集反应在微柱检测系统中进行。
微柱检测系统的上端为反应室,将葡萄聚糖凝胶作为凝集反应的介质装入检测卡微柱凝集检测管中,卡片上从左向右顺序第一支至第三支微管凝胶中均分别充以抗A、抗B、抗D单克隆抗体IgM试剂,检测人红细胞ABO、RhD抗原。
第四支至第六支微管中只有凝胶,第四支微管作阴性对照管,第五支和第六支微管作为ABO血型反定型管。
微柱凝集检测管中的凝胶的间隙起分子筛作用。
凝集反应阳性的红细胞凝决留在微柱凝集检测管的上面或中间,反应阴性未凝集的红细胞将通过凝胶的间隙,沉积在微柱凝集检测管的底部。
四、适用范围适用于输血前患者红细胞ABO血型(正反定型)确认与RhD血型复查。
五、仪器设备SOPREG007.01标准化操作规程作业指导书SOPREG007.01赣州市人民医院输血科普通离心机;血型血清学多用离心机;37℃免疫微柱孵育器;六、试剂1、试剂名称:
ABO、RhD血型试剂卡(单克隆抗体);试剂生产厂家:
长春博迅生物技术有限责任公司;批准文号:
国药准字S20063037;包装规格:
聚丙烯卡12检测人份/盒;贮藏条件;18-25℃避光保存;有效期:
自检定合格之日起12个月;试剂单克隆抗体效价:
抗A效价128;抗B效价128;抗D效价32;特异性试验合格。
2、试剂名称:
人ABO血型反定型用红细胞试剂盒;试剂生产厂家:
上海血液生物医药有限公司;批准文号:
国药准字S20060059;包装规格:
A1、B、O试剂各1支,10ml/支;贮藏条件;2-8℃保存,不能冰冻;有效期:
自检定合格之日起2个月;试剂性能:
外观、溶血率%、特异性、抗原性均符合检定规程要求。
七、检测样本要求1、标本类型:
静脉血(EDTA抗凝剂:血液=1:10)。
2、标本采集:
见输血科标本管理标准化操作规程。
3、标本储存和运输:
新鲜血2~8℃贮存时间不超过72小时。
4、标本拒收状态:
标识不准确、标本稀释、细菌污染,严重溶血等不能测定。
八、操作步骤1、将被检者血样标本在3400r/min(1200g)离心5分钟;2、将微柱凝胶试剂卡进行标编号;SOPREG007.01标准化操作规程作业指导书SOPREG007.01赣州市人民医院输血科3、待检者与标准红细胞稀释悬液的制备:
采用塑料试管将被检者红细胞(10ul压积红细胞加入1.2ml生理盐水中)及标准红细胞(0.5ml标准红细胞试剂+3.0ml生理盐水)配制成0.5~0.8%红细胞生理盐水悬液。
4、将待检者红细胞稀释悬液分别加入第一至第四管中,每管50ul;5、将待检者血清分别加入第五支和第六支微管中,每管50ul;6、将A型和B型稀释标准红细胞悬液分别加入第五支和第六支微管中,每管50ul;7、即刻使用血型血清学多用离心机离心5分钟,2分钟900rpm,3分钟1500rpm,取出肉眼判定结果。
8、结果判定:
见表1。
(1)阳性结果:
红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶中形成的特异性抗原抗体复合物浮在凝胶表面或胶中,为阳性反应。
反应强度:
特异性红细胞抗原抗体复合物位于胶表面,为强阳性反应;复合物在胶中为弱阳性反应;愈靠近胶底部颗粒愈小,反应愈弱。
(2)阴性结果:
被检红细胞抗原无相应的抗体结合,不出现特异性抗原抗体复合物,红细胞沉于微柱凝胶的底部。
(3)对于红细胞RhD血型阴性的样本,应进一步作红细胞RhD阴性确认试验。
表1微柱凝胶凝集试验检测红细胞ABO、RhD血型结果鉴定SOPREG007.01标准化操作规程作业指导书SOPREG007.01赣州市人民医院输血科血型DA阳B性OABDA阴B性OAB抗A+--++--+抗B抗D阴性对照A1细胞B细胞-+--+++-+--+-++++-------++--+----+++----九、质量控制1、对新进批号的试剂应作抗体效价验定。
2、此检测项目应参加卫生部临床检验中心组织的室间质评,且成绩合格;3、每次做血型鉴定应做室内质量控制,且要求在控。
4、严格执行查对制度,判断结果后应仔细核对、记录,避免笔误等引起的差错。
5、检测标本应在2~8℃保存留一周,以备复查。
十、生物参考区间ABO血型:
A型,B型,O型,AB型;RhD血型:
阳性,阴性。
十一、干扰因素1、冷凝集素:
在恶性肿瘤或病原体感染后有时冷反应性自身抗体可异常增高造成溶血。
2、自身抗体:
红细胞被自身抗体强烈致敏后将干扰ABO定型,且自身抗体的存在会导致交叉配血不合。
SOPREG007.01标准化操作规程作业指导书SOPREG007.01赣州市人民医院输血科3、弱凝集:
当患者红细胞上抗原异常可能会导致减弱的或缺少的凝集反应,如亚型红细胞抗原性较弱、新生儿、老年人及少数恶病质患者红细胞抗原形成不足或敏感性降低。
4、细菌性凝集:
常见有类B凝集,A型或O型病人因大肠杆菌O86感染,从而使红细胞上获得类B抗原,能与抗B抗体发生凝集,表现为B或AB型。
其不受温度影响,病情好转类B凝集即消失。
另外红细胞被细菌或细菌酶污染,红细胞上的T抗原被激活,与供血者中抗T抗体发生凝集。
5、混合外观凝集现象:
主要见于患者有近期输血史、骨髓移植、胎盘出血、白血病或其他原因如嵌合现象、A3亚型及Tn多凝集反应。
6、不规则抗体:
可通过测定唾液中的血型物质来鉴定ABO血型。
7、亚型:
亚型红细胞抗原性较弱易产生弱凝集;8、假凝集:
常见于某些肝病、传染病、多发性骨髓瘤、霍金氏病、心肌梗塞、感染等病;9、血浆样本血型鉴定时应注意排除纤维蛋白原和补体的干扰;十二、注意事项1、检测标本必须正确有标识,其血液量、红细胞或血浆的质量符合实验要求和受血者当前的免疫学状态;2、输血前检查要求是输血前3天内的血样(预防受血者在输血前的3个月之内可能有妊娠或输血等免疫史而可能产生不规则抗体)。
3、标本血液离体后要求尽快送检,至检测完毕最长不能超过3d,每次检测后受血者和供血者的血标本应在2℃~8℃保存7天;SOPREG007.01标准化操作规程作业指导书SOPREG007.01赣州市人民医院输血科4、每批次试剂均应进行效价测定,试剂使用前应仔细检查试剂的贮存条件是否符合要求、是否变质失效;5、注意离心力、温度红细胞浓度及抗原抗体的比例对试验结果的影响;6、患者使用的药物影响的处理:
如果使用右旋糖酐、PVP等治疗,应注意将红细胞洗涤;如果受者使用肝素治疗,则应用硫酸鱼精蛋白对抗,使样本凝结;7、疑存在冷凝集素的病人标本的血型鉴定时应用37℃生理盐水洗涤3次再测定,并放37℃免疫微柱孵育器10分钟后观察结果。
8、疑存在自身抗体的病人标本的正定型血型鉴定时应用37℃~45℃生理盐水洗涤红细胞三次或者用放散后的红细胞(放散方法需不破坏红细胞结构);9、疑为亚型应通过亚型定型试剂来具体定型。
鉴定血型时要注意正反定型的结合,加用抗H和抗A、B型标准血清、A2红细胞等检查唾液中的血型物质,必要时作吸收放散试验以确定。
若血清中存在不规则抗体可在反定型用O细胞加以鉴定,有些亚型因为抗原的某些位点缺失,也会产生相对于缺失抗原位点的抗体,这些抗体的产生有助于亚型的判定。
10、疑为红细胞被细菌或细菌酶污染产生的假凝集可臵37℃免疫微柱孵育器10分钟后观察结果,此种凝集在4℃和37℃之间随着温度的升高凝集程度逐渐减弱,在37℃时最弱或消失。
11、出现混合外观凝集的情况时一般要核对标本,必要时可重新抽取SOPREG007.01标准化操作规程作业指导书SOPREG007.01赣州市人民医院输血科血样;12、红细胞出现弱凝集、假凝集应进行红细胞形态显微镜镜检,假凝集用生理盐水稀释或洗涤红细胞可使凝集消失。
13、对于初筛为D阴性的供血者,要分别用不同批次的IgG抗D试剂间接抗人球法进行Rh阴性确认,供血者弱D型血作为D阳性血发放。
14、受血者一般只做IgM抗D试验,若为阴性应输注D阴性血
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 苏教版教材的纸张质量
- 山东省济宁市微山县2025年初三1月阶段性测试数学试题理试题含解析
- 创新倒数教学北师大版数学教案设计
- 三年级科学课堂上的塑料之旅
- 苏教版四年级上册数学练习题详解与分析
- 北师大版成比例线段学习方法解析
- 探索新版人教历史与社会教材
- 水的净化人教版全新解读
- 五年级苏教版数学下册挑战练习解析
- 蛋白质的合成与功能研究解析
- “三好学生”“优秀学生干部”申报表(小戈丈)
- 现金出入账明细表月份
- 纸张白度&亮度201308
- 支撑体系支锚刚度及材料抗力计算
- 消毒产品验收制度
- 专题7—输电线路防灾减灾设计研究
- 第三章一元一次方程ycx集体备课
- 平面构成的起源与发展
- 生物质燃料棒项目可行性研究报告立项申请
- 医院临时聘用人员薪酬管理办法
- 承运商管理制度-x
评论
0/150
提交评论