生物技术实践历年高考真题

【答案】

专题13生物技术实践ABC

【解析】在果酒发酵后期，由于瓶中的营养物质减少，单位时间内产生的C。：的量减少，

【2012年高考试题】

所以拧开瓶盖的间隔时间可以延长，A正确；在糖源、氧气充足的条件下，酯酸菌可将葡萄

一、选择题

汁中的糖分解成醛酸，B正确；果酒发酵过程中，营养物质消耗，并且有水的生成，密度会

1.（2012年高考全国卷5）关于细菌的叙述中，正确的是

逐渐减小，C正确；将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，近瓶口表面的盐要铺厚一些，但底层不

A.不同种类细菌的生长均需要相同碳源

需要大量用盐，D错误.

B.常用液体培养基分离获得细菌单菌落

【考点定位】本题考查发醉食品加工的基本方法这一知识点，涉及果酒、果酯和腐乳制

C.细菌大量培养过程中，芽泡形成于细菌生长的调整期

作过程的原理和方法.属于了解层次.3.（2

D.培养基中含有高浓度NaCI有利于金黄色福萄球菌的筛选

012江苏高考18）下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是

【答案】D

A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCI溶液中的溶解度

【解析】自养型细菌可以利用无机碳源，异养型细菌只能利用有机碳源，A错误.分段

B.将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝

细菌并获得单菌落需要固体培养基，B错误.芽泡是细菌为适应不利的环境而产生的休眠体,

C,常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取

而调整期资源丰富，不会产生芽泡，C错误.金黄色葡萄球菌有耐高浓度盐的特点，D正确.

D.用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少

【考点定位环题主要考查微生物培养和分离的相关知识，着查学生的分析和理解能力,

【答案】C

难度中等.需要学生在平时识记常见微生物的生活特征和生活史，理解几种常见的培养基生

【解析】洗涤剂能够瓦解细胞膜，但不能增加DNA的溶解度，A错；将DNa丝状物放

一般作用.：

入二苯胺试剂中沸水浴中变蓝，不需要冷却，B错；常温下菜花句浆中有些酶类可破坏DNA,

12江苏高考21）下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，合理的是（）而影响DNA的提取，C正确；用玻棒缓慢搅拌滤液并不歌向DNA的含量，而在粗提取时，

A.在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长缓慢撑拌有利于DNA附着，D错

B,条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸【考点定位】本题主要是对实验内容的考查，主要是涉及"DNA粗提取与鉴定实验”这

C.果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小一实嗡中的原理、方法和操作步骤等内容.属于实验考查中比较基础的内容.4.（2

D.将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量012江苏高考17）下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是

A.从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小

B.作为消化酶使用时，蛋臼酶制剂以口服方式给药

C.尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用

D.将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCb和杂菌

【答案】C

纤维索酷能否耐受80℃高温，进行了以卜实验。

【解析】化学结合法可能彩响酶的活性部位而影响反应效果，而吸附法是物理方法不影

试管1试管2

响曲的分子结构，A正确；消化酶在消化道内起作用，B正确；尿糖试纸由于使用后不能将

第一步加入适量缓冲液加入等量纤维素酶溶液（缓冲液配制）

反应物和酶分开，而不能再次使用，c错；固定化酵母细胞在凝胶珠中，用无菌水冲洗可洗

第二步__________________________30min

去CaCI?和表面的杂菌，D正确

第三步加入__________________________

【考点定位】本题考查酶的应用，涉及固定化酶中的原理、操作和应用等知识.属于了

第四步60'C水浴保温lOmin

解层次・5.（2

012北京高考5）高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是

第五步加入__________________________

A.将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中

第六步沸水浴中加热2min,观察实验现象

B.将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上

结果与结论：①若，则表明该纤维素酶能耐受80C高温;

C.将转基因植物叶片接种到无菌培养基上

②若,则表明该纤维素醐不能耐受80℃高温；

D.将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上

（2）酵母菌发酵产生的乙醇属于（填“初级”或“次级”）代谢产物。

【答案】C

【答案】II⑴80七水浴保温适量纤维素液斐林试剂或既氏糖定性试剂

【解析】植物组织培养中的外植体必须在严格的无菌环境中进行培养，而且操作的各环

①试管1内呈蓝色，试管2内有砖红色沉淀产生

节都要注意严格火菌，必须尢菌操作，C对；葡萄酒的制作原理是利用酵母菌尢氧发酵时产

②试管1和2内均呈蓝色:来源：中*教*掰z*z*s"ep]

生酒精，在无氧条件下，大部分微生物都不能生存，随着发酵的进行，酒精度噌大，也有杀

⑵次级

菌的作用；而制作腐乳时，主要是将毛霉等微生物接种在豆腐上，此过程的加盐、加卤汤等

操作均有一定的杀菌作用；选择培养基只能允许目的菌生长，会抑制其他杂菌生长，因此不

是严格无菌操作时A、B、D选项的情况下比C选项的受影响要小.

【考点定位】本题考查对传统发酵技术的应用、微生物的培养和植物培养技术中无菌操

作的掌握.重点要求考生熟悉相应操作过程中的注意事项，这种类型的题目考查的内容相对

固定，重点放在细节，难度中等。二非

选择题

6.（2012重庆高考30—11）11.乙醇可部分替代石油燃料，利于纤维素酶、醉母菌等可将纤维素

转化成乙醉、耐高温纤维素酶可以加速催化纤维素的水解，从而有利于酵母菌发醉产生乙醇。

（1）某研究小组将产纤维素酶的菌株，通过诱变和高温筛选获得新菌株，为探究新菌株所产

【解析】II⑴根据实验是探究纤维素酶能否耐受80C高温，所以应先对纤维素酶用80C【答案】（1）脱分化（或去分化）；再分化

高温处理，常用方法为水浴80c保温.对酶进行高温处理后，然后再加入适量的纤维素的（2）琼脂低高压蒸汽灭菌

作用的底物一-纤维素，利用纤维素的能使纤维素水解为还原糖，来检验经高温处理的酶是（3）70%果胶酶

否还有活性，还原糖可用斐林试剂或班氏糖定性试剂检测.（4）防止有机溶剂的挥发

①如果纤维素酶能耐受801c高温，则经80c高温处理后，依然能使纤维素水解，经斐【解析】（1）由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程称为脱分化，脱分化产

生的愈伤组织继续进行培养，又可重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化.

林试剂检测能出现砖红色沉淀

（2）培养基中常用的廉固剂是琼脂.同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比

②反之，不能出现砖红色沉淀.

例彩响植物细胞的发育方向.生长素和细胞分裂素用量的比值低时，有利于芽的分化；反之

⑵乙醇时酵母菌无明显生理功能，并非是酵母菌生长和繁殖所必需的物质，这样的物质

则利于根的分化.培养基应用高压蒸汽灭菌锅灭菌.

为次生代谢产物.

（3）外植体消毒所用酒精的体积分数是70%.酶解法将愈伤组织分离成单细胞所用的

【考点定位】此题考查光合作用和书上第一个实验的变式实验，联系的知识点较多，要

酶是果胶酶和纤维素酶.

求学生有一定的数据函数图冢处理分析能力，难度较大.光合作用在教学中仍为教学重点.

（4）用萃取法提取植物有效成分时，应在加热瓶口安装冷源回流装置，目的是防止加

教学中应加以重视.7.（2

热时有机溶剂挥发.

012山东高考34）【生物一生物技术实践】

【试题评价】本题以辣椒素为切入点，考查了植物组织培养的过程，组织培养培养基的

辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。

成分,植物激素对组织培养过程的影响，对外植体消毒的方法及萃取过程的注意事项等内容，

基础性强，难度不大.（

I外植体I.伤沪织I里一麻理———«►8.20

I细胞分离（12广东高考29）食品种类多，酸碱度范围广。生物兴趣小组拟探究在食品生产应用范围较广的蛋

白酶，查阅相关文献，得知：

―►I高产细胞剧—I细席培养物I

（1）pH对不同蛋白酶的活力影响有差异。据图12可知，更适宜作为食品添加剂，

（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的和过程。

理由是o蛋白酶的活力可用的量来表示。

（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是-培养基中的生长素和细胞分裂

素用量的比值（填"高''或"低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的

灭菌方法是。

（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是。用酶解法将愈伤组织分离成单细

胞时，常用的酶是和纤维素酶。图12

（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是.（2）该蛋白酶的提取工艺流程如下:

加好保妙剂加65%乙・调找取液pH12高考全国新课标卷39）为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究

,A­（0.睚~0.（5。〜9.0）r沉淀物—测修活力

4t组积匀浆一►上Ji•液--------------------------

（也悔配的）（单位：U）小组在MS培养基中加入6-BA和IAA,配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、

兴趣小组分别对酶保护剂浓度、提取液pH进行了探究实验。结果显示，酶保护剂浓度在0.02〜生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生从芽外植体的比率

0.06moI/L范围内，酶活力较高；提取液pH在6.0〜8.0范围内，酶活力较高。他们认为，要进一步（m）,以及再生从芽外植体上的从芽平均数（n）,结果如下表。

提高粗醐制剂的酷活力，以达到最佳提取效果，还需对酎保护剂浓度和提取液进行优化，并确

pH浓度mgl"

培养基编号m.%n7个

定以此为探究课题。请拟定该课题名称，设计实验结果记录表。6-BAIAA

1076.73.1

【答案】（1）木瓜蛋白酶由图可以看出，木瓜蛋白酶的活性不随pH的变化而变化

20.177.46.1

0.5

单位时间内底物消耗（产物产生）30.266.75.3

40.560.05.0

（2）课题：探究酶保护剂的最适浓度和提取液的最适pH

单位时间内底提取液的pH回答下列问题：

物的消耗量6.06.26.46.66.87.27.47.67.88.0（1）按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为和两类。上述培养基中,

0.026-BA属于类生长调节剂。[来源：中+教+网z+z+s+tep]

酶保

0.03（2）在该实验中，自变量是,因变量是,自变量的取值范围是o

护剂

0.04（3）从实验结果可知，诱导从芽总数最少的培养基是号培养基。

的浓

0.05（4）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入（填“6-BA”或“IAA”）。

度

0.06

【解析】U）审题结合图形和文字，在题目中已经提供了信息食品种类多，酸碱度范

围广，所以选择的食品添加剂应该有较广的酸喊适应范围.从图形中，可以看出木瓜蛋白

酶的适应范围最广，所以可以选作食品添加剂。酶的活力，一般用酣催化的底物消耗量或者

产物生成量来表示.

（2）实嗡设计，应该明确实验目的：探究酶保护剂的最适浓度和提取液的最适pF值,

所以可以将酶保护剂的浓度和提取液的PH值作为自变量，因变量为单位时间内底物的消耗

要JCSX，

【考点定位】本题以蛋白酣在食品方面的应用为背景，考查了蛋白酣的应用、活力测定、

蛋白酶的提取流程等内容和学生绘制表格的能力，难度不大.9.(20

【答案】（1）大量元素微量元素细胞分裂素【答案】（15分）

（2）IAA的浓度菊花再生丛芽外植体的比率和外植体上的丛芽平均数0-0.5mg.l>（1）毛霉肽氨基酸脂肪酶甘油脂肪酸（每空2分，共12分）

（3）1（4）6-BA（2）微生物（2分）

【解析】（1）根据植物的需求量，元素可以分为大量元素和微量元素，6-BA属于细胞（3）风味（1分，其他合理答案也给分）

分裂素类的生长调节剂.【解析】

（2）根据实验目的和实验中的步骤中的数据，可以看出IAA的浓度是自变量，菊花再（1）薛过程中起作用的微生物有多种，如青霉、酵母、曲雀、毛霉等，其中起主要作

生丛芽外植体的比率和外植体上的丛芽平均数是因变量；由图表数据可以看出的浓度范

IAA用的是毛霉，毛霉产生的蛋白酣可将豆腐中的蛋白质水解成多肽和氨基酸，产生的脂肪酶能

围是

0-0.5mg.L-.够将豆腐中的脂肪水解为甘油和脂肪酸.

（3）再生丛芽的外植体数乘以外植体上丛芽平均数即为丛芽总数，所以最少的是：号

（2）发酵过程中加盐腌制，不仅可以调制风味，而且能够抑制杂菌等其他微生物

培养基.

（3）腐乳制作后期加入卤汤，卤汤不仅可以防腐，还可以使腐乳具有独特的风味（或

（）诱导试管苗生根需要生长素用量和细胞分裂素用量的比值比较高，所以培养基中

4香味）.

不需要加6-BA.

【考点定位】本题考查腐乳制作的原理和流程，设计到具体操作过程的作用和意义，均

【试题评价肺题主要是对植物组培知识的考查，提问涉及必修一和必修三的一些知识，

为课本上理解识记内容，难度不大.11.

再加上以实嗑分析的形式考察中学生物实嗡的基础知识，综合性强.难度较小.10.

（2012上海卷四）回答下列关于微生物和酶的问题。（10分）

（2012海南卷30）【，物——选修I：生物技术实践】（15分）

高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高

回答下列关于腐乳制作的问题：

温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图15所示。

（1）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品。多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作

用的微生物是,其产生的蛋白酎可将豆腐中的蛋白质水解为和—

OIW活性测定

:其产生的能将豆腐中的脂肪水解为和。

（2）发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制生长。

咱热借样品

（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤。卤汤具有一定的防腐作用外,■15

还能使腐乳具有独特的.44.①过程称为,②过程是为了。

45.I号培养基称为（按功能分）；该培养基中除了加入淀粉外，还需加入另一种

重要的营养成分。

A.琼脂B.葡萄糖C.硝酸钺D.碳酸氢钠

46.一般对配制的培养基采用高压灭菌，其中“高压”是为了o【答案】

在高温淀粉酶运用到工业生产前，需对该酶的最佳温度范围进行测定。图16中的曲线①表示44.稀释单个菌落的筛选（或筛选）

醉在各种温度下酶活性相对最高酶活性的仃分比。将酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活史.选择培养基C

性最高的温度卜.测其残余酶活性，由此得到的数据为酹的热稳定性数据，即图16中的曲线②。46.杀死培养基中的细菌芽泡

47.C

相4S.A

对

•

活【解析】

性

(

求44.由图中显示，在①前后试管中细菌数目减少，可推知此过程为稀释，②过程后使用

)

划线法对细菌进行固体培养基培养，可推知此过程为分离纯化嗜热菌.

1a_i---1----1----i----=30

304050607080901004二由图示可知表示过程是嗜热菌分离纯化的过程，I号培养基为选择培养基.在培养

温度（C）

微生物的培养基中，碳源和氮源必不可少，所以除淀粉外还应加入硝酸锭。

H1646细萌芽泡是在极端环境中产生的，具有耐高温等特点，只有用高温高压，才能杀死

47.根据图中的数据，判断该胸使用的最佳温度范围是o细菌芽泡，防止培养基污染.

A.40℃—50℃B.50℃—60℃C.60℃—70℃D.70℃-80℃47.在使用该酶时，应保证活性较高、酣的热稳定性较好的温度范围。由图中数据可知，

48.据图判断下列叙述错误的是o60C~70c符合要求.

A.该酶只能在最佳温度范围内测出活性

4s.酶活性受温度影响，在不同的温度下，都可以测定施的活性，A错误；由曲线①可知，

B.曲线②35℃数据点是在80℃时测得的

该酶的最适温度是30C，曲线②中的数据是将§5在不同温度下保温足够长的时间，再在防

C.曲线①表明80℃是该防活性最高的温度

活性最高的温度下测其残余的活性，对于B选项而言是将该廨在35c下上时间保存，然后

D.曲线②表明该酶的热稳定性在70℃之后急剧下降

在SQC下测定该函活性，B、C正确。曲线②显示，酣的热稳定性从3QC开始不断下降，

在70c后，急剧下降，D正确.

【考点定位】本题综合考查了微生物的培养、分离、纯化的方法步骤，培养基的成分，

常用的灭菌方法及其适用情况，酶发挥作用的适宜温度及温度与酶活性的关系等嫩荣，同时

考查了学生的识图能力和分析问题的能力，难度不大.【2011

年高考试题】

I、（2011江苏卷）下列果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是

A.腐乳制作所需要的适宜温度最高答案：D

B.果醋发醉包括无氧发酵和有氧发醉解析：愈伤组织是处于未分化的状态，所以没有特定结构和功能，所以A选项错误；二倍体植

C.使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌株的花粉经脱分化与再分化后得到的植株是单倍体，高度不育，所以B选项错误；人工种子就是

D.使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，

答案：D所以C选项错误；可通过添加适量NaCI的培养基培养淘汰不耐盐个体，筛选出耐盐个体，所以

解析：果酒制作酵母菌繁殖适宜温度2。度左右，酒精发酵时适宜温度在18、25度，果酯D选项正确。

4、（2011江苏卷）在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的

制作适宜温度及、35度，腐乳制作适宜温度15度、18度，所以心选项错误；醛酸菌为好

是

氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，所以B选项错误；果酒、果醋和

A.用蒸储水将NaCI溶液浓度调至0.14mol/L,滤去析出物

腐乳制作使用的菌种分别是是鼻母菌、酯酸菌、毛霉等。所以C选项错误；D选项正确。,

B.调节NaCI溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质

（2011江苏卷）下列有关酶的制备和应用的叙述，正确的是

C.将丝状物溶解在2moi/NaCI溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色

A.醐解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内能

D.用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同

B.透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化

答案：B

C.棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤

解析：用蒸溜水将NKI溶液浓度调至C14mcl/L,析出物就是DN&不能滤去，所以A选

D.多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心

项错误；B选项正确；将丝状物溶解在2mcl/N式I溶液中，加入二豕胺试剂后需水浴加热

答案：A

才呈蓝色，所以C选项错误；鸡血细胞可直接加入蒸簿水使细胞破裂释放DNA,而菜花

解析：的解法去除细胞壁，吸水涨破法使细胞破裂释放出胞内酶，所以A选项正确；S

做材料时需加入洗涤剂溶解细胞膜，使DNA释放，所以D选项错误.5.

的分离和纯化不可以用酸解法，所以B选项错误；纤维素酶本身不能去除衣物上的污垢，它

的作用主要是去除棉纺织品表面的浮毛以及表面附着的沉积性顽渍，同时可以使纤维的结构（2011广东卷）以下关于猪血红蛋白提纯的描述，下g河8的是

变得蓬松，从而使渗入到纤维深处的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接触，从而达到更好的去

A.洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂

污效果，所以C选项是错误的；蛋白的在胃液中发挥作用，应在多§5片的最外层，所以D

B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少

选项错误.

C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测

3.（2011江苏卷）下列有关植物组织培养的叙述，正确的是

D.在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋臼比分子量较小的杂蛋白移动慢

A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞

B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株

C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子

D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得

答案c：答案：（1）压榨过涯（2）稀释涂布平板法高压蒸汽灭菌锅紫外线消毒

解析：本题考查血红蛋白的提取，属于对识记、理解层次的考查.在凝胶色谱柱中，分（3）碳源和氮源越慢（4）大小

子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快，分子量小的分子穿过多孔凝胶颗解析:本题考查选修1相关知识，对于柚皮精油的提取一般用压榨法，再采用过港去除

粒内部，路程长，流动慢，血红蛋白比分子量小的杂蛋白移动快，D错误.A正确，洗涤的基因固体杂质；对于筛选菌种一般用固体选择培养基，通常接种方法是平板画线法和稀释涂

目的是去除杂蛋白以利于后续步骤的分离纯化，加入的是生理盐水，缓慢搅拌lOnim低速布平板法，培养基灭菌通常用高压蒸气灭菌，对于工作台一般消毒的方法处理，通常用紫外

短时间离心，重复洗涤三次，直至上清液不再呈现黄色，表明红细胞已洗涤干净.B正确，线消毒，尿素为微生物提供氮源和碳源，电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋

哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核与众多的细胞器，提纯时杂雷白较少.C正确，血红蛋白白质，则其分子量越大，电泳速度越慢；抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑

是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液（如菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的大小来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果

果操作都正确能清楚的看到血红蛋白的红色区带均包狭窄、平整随着洗脱液缓慢流出）.

这使得血红蛋白的分离过程非常直观，简化了操作.7.（2011新课标全国卷）有些细菌可分解原油，从而消除由原