高中三年级上学期生物《目的基因的检测和鉴定》教学课件

基因工程的基本操作流程目的基因的检测与鉴定基因工程的基本操作流程目的基因的筛选与获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定目的基因进入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性呢？？思考讨论：目的基因的检测与鉴定的实验方法DNARNA蛋白质转录翻译中心法则请同学们根据中心法则原理，思考：1.如何确定目的基因进入了转基因生物受体细胞并能维持稳定？2.如何确定转基因生物细胞中的目的基因一定能够进行表达？3.如何确定转基因生物获得了新的性状？DNARNA转录蛋白质翻译思路2：在RNA水平上，检测目的基因是否成功转录；思路1：在DNA水平上，检测目的基因是否成功插入；思路3：在蛋白质水平上，检测目的基因是否成功翻译；思路4：在性状水平上，检测生物特定性状是否成功表现。思考讨论：目的基因的检测与鉴定的实验方法特定性状控制1.检测转基因生物的DNA上是否插入目的基因

（2）方法：DNA分子杂交DNA探针，是一段带有检测标记（同位素、荧光分子或化学发光催化剂），且顺序已知的，与目的基因能发生碱基互补配对的DNA序列。（1）原理：DNA分子具有特异性DNA探针待测生物DNA①提取出转基因生物的基因组DNA，并将其切割成小分子DNA片段；②

制作探针，将含目的基因的DNA片段用放射性同位素等作标记；③

使探针和转基因生物的基因组杂交，若显示出杂交带，表明基因组中已插入目的DNA。（3）具体过程:1.检测转基因生物的DNA上是否插入目的基因2.检测转基因生物的目的基因是否成功转录为RNA

（2）方法：RNA分子杂交RNA探针，是一段带有检测标记（同位素、荧光分子或化学发光催化剂），且顺序已知的，与目的RNA能发生碱基互补配对的RNA序列。（1）原理：RNA分子具有特异性RNA探针待测生物RNA2.检测转基因生物的目的基因是否成功转录为RNA①提取出转基因生物的全部RNA；②

制作探针，将与含目的基因的RNA互补的RNA片段用放射性同位素等作标记；③

使探针和转基因生物的RNA杂交，若显示出杂交带，表明目的基因成功转录为RNA。（3）具体过程:①首先取出转基因生物的蛋白质；②

制备特定蛋白质相应的抗体；③

向基因生物的蛋白质组中加入抗体，若显示出杂交带，表明目的基因已成功翻译为蛋白质。（3）过程:3.检测转基因生物的目的基因是否成功翻译为蛋白质

（2）方法：抗原—抗体杂交（1）原理：蛋白质分子具有特异性，利用抗原与抗体特异性结合的原理例如：怎样检验抗虫基因在棉细胞内是否表达呢？没有抗虫基因的棉植株有抗虫基因的棉植株棉铃虫虫没有死虫被杀死没有表达若不能表达，要对抗虫基因再进行修饰。4.检测转基因生物是否表现出特定的性状，如抗虫、抗旱等目的基因成功表达常见转基因生物在个体水平上鉴定、检测的方法:转基因生物检测方法观察目标抗虫植物饲喂害虫害虫死亡抗病毒(菌)植物病毒(菌)感染未侵染上病斑抗盐植物盐水浇灌正常生长抗除草剂植物喷洒除草剂正常生长小结基因工程的基本操作流程目的基因的筛选与获取基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞