mir145抑制人脐静脉血管内皮细胞增殖和迁移的机制分析

1/1mir145抑制人脐静脉血管内皮细胞增殖和迁移的机制分析华中科技大学硕士学位论文1MiR-145抑制人脐静脉血管内皮细胞增殖和迁移的机制研究华中科技大学同济医学院附属同济医院综合医疗科硕士研究生：

范良指导老师：

殷铁军教授中文摘要[1]目的研究microRNA-145（miR-145）对人脐静脉血管内皮细胞增殖和迁移的影响；探寻miR-145可能通过调控ADAM17进而发挥抗肿瘤血管生成的作用机制。

方法通过转染miR-145模拟物和无意义的阴性对照小RNA序列进入人脐静脉血管内皮细胞，使用细胞计数试剂盒-8(CellCountingKit-8，CCK-8)检测转染miR-145模拟物的实验组和转染无意义的阴性对照小RNA序列的对照组的HUVECs的增殖能力，Transwell小室检测转染后的实验组和对照组HUVECs的迁移能力。

应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测预测的miR-145候选靶基因ADAM17的mRNA表达水平，并通过免疫印迹(Westernblot)从蛋白水平检测ADAM17的表达。

结果转染48h后，转染阴性对照小RNA序列组的吸光度（A值）（0.440.01）明显高于转染miR-145模拟物组的A值（0.340.01）（Plt;0.01）；转染72h后，转染阴性对照小RNA序列组A值（0.860.05）也明显高于转染miR-145模拟物组的A值（0.600.09）（Plt;0.01）。

转染无意义的阴性对照小RNA序列组的HUVECs迁移穿过transwell小室膜的细胞数（20530个）明显多于转染miR-145模拟物组穿过小室膜的细胞数（1356个）（P＜0.05）。

转染miR-145模拟物组较转染无意义的阴性对照小RNA序列组的ADAM17基因的蛋白水平和mRNA均呈现下调，Westernblot灰度值为0.650.21，（P＜0.05）；RT-PCR的相对值0.340.15，（P＜0.01）。

结论miR-145能够显著抑制人血管内皮细胞的迁移和增殖能力，且miR-145可通过调节ADAM17基因的表达从而实现调控血管内皮细胞迁移和增殖功能。

关键词ADAM17；microRNA-145；迁移；增殖；肿瘤血管生成华中科技大学硕士学位论文2MechanismsofmiR-145regulatingproliferationandmigrationofHUVECsPostgraduate：

FanLiangSupervisor：

Prof.TiejunYinDepartmentofComprehensiveMedicine，TongjiHospital，TongjiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnologyAbstractObjectiveToinvestigatetheeffectofmicroRNA-145(miR-145)ontheproliferationandmigrationofHUVECs．MethodsMiR-145mimicandnegativecontrolfragmentweretransfectedintoHUVE