贵州省贵阳市清镇北大培文学校贵州校区2025届高三下学期联考生物试题含解析

贵州省贵阳市清镇北大培文学校贵州校区2025届高三下学期联考生物试题请考生注意：1．请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上，请用0．5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。2．答题前，认真阅读答题纸上的《注意事项》，按规定答题。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．将适量的胰岛素溶液分别皮下注射到I型糖尿病（胰岛素依赖型糖尿病）小鼠（甲）和正常小鼠（乙）体内，甲鼠未出现异常，而乙鼠出现行动迟缓、乏力等症状；再分别静脉滴注100ml适宜浓度的葡萄糖溶液，发现甲鼠出现糖尿，而乙鼠乏力等症状得到缓解。下列叙述正确的是（）A．实验中注射的胰岛素和葡萄糖溶液都直接进入血浆中B．第一次实验中注射到甲鼠体内的胰岛素一直发挥作用C．第二次实验中甲鼠的血糖上升幅度与乙鼠的一定相同D．乙鼠的血糖浓度变化为先降后升再降2．下列关于生物体中化合物的叙述，正确的是（）A．用双缩脲试剂处理花生种子匀浆，不会出现紫色B．核酸分子中嘌呤数和嘧啶数相等C．正常情况下，神经元兴奋前后细胞内的Na+浓度都低于组织液的Na+浓度D．人体吸收纤维素分子后，在内环境中水解为葡萄糖分子供细胞利用3．生物学家提出了“线粒体是起源于好氧细菌”的假说。该假说认为，在进化过程中原始真核细胞吞噬了某种好氧细菌形成共生关系，最终被吞噬的好氧细菌演化成线粒体。下列多个事实中无法支持该假说的是（）A．哺乳动物细胞的核DNA由雌雄双亲提供，而线粒体DNA则主要来自雌性亲本B．线粒体外膜的成分与真核细胞的细胞膜相似，而内膜则同现存细菌的细胞膜相似C．高等植物细胞的核DNA与蛋白质结合呈线状，而线粒体DNA裸露且主要呈环状D．真核细胞中有功能不同的多种细胞器，而线粒体中仅存在与细菌中类似的核糖体4．关于植物的向光生长，Hasegawa等人重复了温特的实验，发现用物理化学法测定燕麦胚芽鞘两侧扩散的生长素含量并没有区别。经过层析分析，发现琼脂块中至少有两种抑制物。据他们的实验，下列结论最可能错误的是（）A．两种抑制物之间存在相互作用B．向光一侧的抑制物活性高于背光一侧C．背光一侧的生长素含量大于向光一侧D．向光一侧的生长抑制物比背光一侧多5．下列关于内环境与稳态的叙述，正确的是（）A．血浆蛋白含量的变化不会影响组织液的渗透压B．内环境的变化会引起机体自动调节器官、系统的活动C．细胞的生命活动依赖于内环境，但细胞不参与内环境的形成和维持D．血糖浓度、尿液浓度、细胞外液渗透压的相对稳定都属于内环境稳态6．癌细胞表面的PD-L1蛋白可与T细胞表面的PD-1蛋白结合，导致T细胞不能全面启动对癌细胞的免疫攻击，使用抗PD-1抗体可使癌症患者的肿瘤快速萎缩。下列叙述错误的是（）A．癌细胞的清除体现了免疫系统的监控和清除功能B．PD-L1蛋白和PD-1蛋白结合，这体现了细胞膜的信息交流功能C．抗PD-1抗体作用于T细胞而不是作用于癌细胞D．癌症患者体内的PD-1蛋白表达不足会降低机体细胞免疫的能力7．下列有关实验试剂或实验方法的叙述，正确的是（）A．可选用蛋白质溶液、蛋白酶、淀粉酶和双缩脲试剂探究酶的专一性B．可选用斐林试剂和蒸馏水在50~65℃水浴条件下进行蛋白质的鉴定C．可用菠菜叶肉细胞观察质壁分离现象D．可用洋葱鳞片叶内表皮细胞作实验材料观察低温诱导植物染色体数目的变化8．（10分）在“制作并观察植物细胞有丝分裂的临时装片”活动中，观察到不同分裂时期的细胞如图所示：下列叙述错误的是A．装片制作过程中需用清水漂洗已解离的根尖便于染色B．观察过程中先用低倍镜找到分生区细胞再换用高倍镜C．图甲细胞所处时期发生DNA复制及相关蛋白质的合成D．图丙细胞中的染色体数目比图乙细胞中的增加了一倍二、非选择题9．（10分）热性惊厥（FC）是指当患儿上呼吸道感染或其他感染性疾病导致体温在38～40℃时发生的惊厥。与小儿脑发育不成熟、神经细胞结构简单、兴奋性神经递质和抑制性神经递质不平衡等有关。分析回答问题。（1）幼儿由于_______（体温调节中枢）发育不成熟，对体温的控制力不强。当机体发热时，神经细胞的代谢增强，中枢神经系统处于过度兴奋状态，使高级神经中枢_______产生强烈的放电，患儿全身或局部的骨骼肌不自主收缩，即出现肢体抽搐等现象。（2）脑中约60%～70%的突触利用谷氨酸作为主要的神经递质，患儿高热时神经细胞会释放大量的谷氨酸，图为其部分调节过程示意图。①大量的谷氨酸以________的运输方式从突触前膜释放，与突触后膜上的A受体结合，促进大量进入细胞内，激活________进而产生过量的NO，引起中枢神经系统麻痹或痉挛；同时使神经与肌膜对钠离子通透性增高引发_________（静息电位/动作电位），导致惊厥发作。②正常生理状态下，当细胞内过多时，通过________（结构）逆浓度将过多的排出，以避免可能引起的神经细胞衰老或死亡。（3）长期的反复发生的FC可移行为癫痫（EP），通过对156例FC患儿的脑电图（EEG）进行分析，得到FC的临床与EEG分析如下表所示。有关分析不正确的是_______。体温/℃FC发作EEG检查年龄/岁≤38.5＞38.5首次反复二周内二周后≤3＞3EEG正常例数101017427456510011EEG异常例数1530243134112817合计251319858797712828①首次发作体温越低，EEG异常率越高②FC患儿年龄越大，EEG异常检出率越低③若二周后EEG检查仍然异常，则需进一步治疗以避免FC可能移行为EP④减少长期的反复发生的FC对EP的预防有一定的价值10．（14分）下图是以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程简图，请分析并回答：（1）过程甲中使用的微生物是__________。在鲜苹果汁装入发酵瓶时，要留有大约_____的空间。经过10～12天后，在酸性条件下用重铬酸钾检测样液，如果颜色变为___________色，说明产生了酒精。（2）过程乙中使用的微生物是__________，可以从食醋中分离纯化获得，步骤如下：第一步：配制________（固体/液体）培养基。第二步：对培养基进行高压蒸汽灭菌。第三步：接种。微生物常用的接种方法有稀释涂布平板法和___________________。第四步：培养。温度控制在____________摄氏度范围内。第五步：挑选符合要求的__________。（3）在________的条件下，如果缺少糖源，乙中的微生物将甲过程的产物变为________，再将其变为醋酸。11．（14分）科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点。请分析回答下列问题：（1）在该过程中，研究人员首先获取了抗盐基因（目的基因），并采用____________技术对目的基因进行扩增，该技术扩增目的基因的前提是_________________________，以便根据这一序列合成引物，同时该技术必须用_____________酶；然后构建基因表达载体，其目的是_________________________。（2）用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaI酶切割，原因是________________________。（3）图中⑤、⑥依次表示植物组织培养过程中抗盐烟草细胞的____________、____________过程。（4）为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是_____________________________________________________________。12．豚鼠的毛色受等位基因E-e和F-f控制，其中基因E控制黑色素的合成，而基因F对黑色素有淡化功能，淡化的结果是基因型为E_Ff的个体毛色为灰色，基因型为E_FF的个体毛色为白色。不考虑突变，回答下列问题：（1）白色豚鼠的基因型有____种。白色雌、雄豚鼠交配，子一代____（填“会”或“不会”）出现黑色个体。（2）两只基因型均为EeFf的雌、雄豚鼠交配，若所得子一代中黑色：灰色：白色=________，则表明等位基因E-e和F-f的遗传遵循自由组合定律。（3）若基因型为EeFf的灰色豚鼠能产生EF、Ef、eF和ef四种配子且EF：ef=l：1．Ef：eF=1：1，则____（填“能”或“不能”）得出等位基因E-e和F-f的遗传均遵循分离定律的结论，理由是________________________________。根据以上配子类型及比例无法判断两对基因是否遵循自由组合定律，理由是____________。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、D【解析】

1.人体正常血糖浓度为0.8-1.2g/L。2.人体血糖的三个来源：食物、肝糖原的分解、非糖物质的转化；三个去向：氧化分解、合成肝糖原肌糖原、转化成脂肪、蛋白质等。3.胰岛素为降低血糖的唯一激素。【详解】A、实验中注射的胰岛素和葡萄糖溶液都是先进入组织液中，然后在进入血浆进行运输，A错误；B、由于第一次注射适量的胰岛素后甲鼠没有明显的变化，而静脉滴注100mL适宜浓度的葡萄糖溶液后，发现甲鼠出现糖尿，说明甲鼠体内第一次实验注射的胰岛素不起作用，B错误；C、由题意可知甲鼠患I型糖尿病，结合实验过程可知，注射的胰岛素对甲鼠没有发挥作用，静脉滴注100ml适宜浓度的葡萄糖溶液，甲鼠出现了糖尿，而乙鼠为正常鼠，血糖升高时，胰岛素可发挥作用使血糖降低，所以第二次实验中甲鼠的血糖上升幅度大于乙鼠，C错误；D、注射胰岛素后，乙鼠出现了行动迟缓、乏力等症状，说明乙鼠血糖下降了，然后注射葡萄糖后，乙鼠乏力等症状得到了缓解，说明血糖又上升了，随着乙鼠对葡萄糖的消耗，血糖又下降，即乙鼠的血糖浓度变化为先降后升再降，D正确。故选D。【点睛】本题主要考查血糖平衡的调节的有关内容，通过实验意在强化学生对血糖平衡的调节和实验设计与分析的相关知识的理解与运用能力。2、C【解析】

生物体内三种有机物的鉴定原理试剂成分实验现象常用材料蛋白质双缩脲试剂

A:0.1g/mLNaOH紫色大豆、蛋清B:0.01g/mLCuSO4脂肪苏丹Ⅲ橘黄色花生苏丹Ⅳ红色还原糖

本迪尼特试剂（水浴加热）甲:0.1g/mLNaOH红黄色沉淀苹果、梨、白萝卜乙:0.05g/mLCuSO4淀粉碘液

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蓝色马铃薯【详解】A、花生种子中含有丰富的蛋白质，故用双缩脲试剂处理花生种子匀浆，会出现紫色，A错误；B、DNA分子具有双螺旋结构，其中嘌呤数和嘧啶数相等，但是RNA是单链结构，则嘌呤数不一定等于嘧啶数，B错误；C、正常情况下，Na+主要分布在细胞外液中，故神经元兴奋前后细胞内的Na+浓度都低于组织液的Na+浓度，C正确；D、人体不能合成分解纤维素的酶，故人体摄入的纤维素不会进入内环境中，更不会利用纤维素供能，D错误。故选C。3、A【解析】

1、线粒体：真核细胞主要细胞器（动植物都有），机能旺盛的含量多。呈粒状、棒状，具有双膜结构，内膜向内突起形成“嵴”，内膜和基质中有与有氧呼吸有关的酶，是有氧呼吸第二、三阶段的场所，生命体95%的能量来自线粒体，又叫“动力工厂”。含少量的DNA、RNA。2、真核细胞和原核细胞的比较比较项目原核细胞真核细胞大小较小较大主要区别无以核膜为界限的细胞核，有拟核有以核膜为界限的细胞核细胞壁有，主要成分是糖类和蛋白质植物细胞有，主要成分是纤维素和果胶；动物细胞无；真菌细胞有，主要成分为多糖生物膜系统无生物膜系统有生物膜系统细胞质有核糖体，无其他细胞器有核糖体和其他细胞器DNA存在形式拟核中：大型环状、裸露；质粒中：小型环状、裸露细胞核中：和蛋白质形成染色体；细胞质中：在线粒体、叶绿体中裸露存在增殖方式二分裂无丝分裂、有丝分裂、减数分裂可遗传变异方式基因突变基因突变、基因重组、染色体变异【详解】A、哺乳动物细胞的核DNA由雌雄双亲提供，而线粒体DNA则主要来白雌性亲本，这与题干假说无关，A错误；B、线粒体外膜的成分与真核细胞的细胞膜相似，而内膜则同现存细菌的细胞膜相似，这支持题干假说，B正确；C、高等植物细胞的核DNA与蛋白质结合呈线状，而线粒体DNA裸露且主要呈环状，这与细菌拟核DNA相同，因此支持题干假说，C正确；D、真核细胞中有功能不同的多种细胞器，而线粒体中仅存在与细菌中类似的核糖体，这支持题干假说，D正确。故选A。【点睛】本题考查线粒体和原核细胞的相关知识，要求考生识记线粒体的结构，掌握线粒体与原核细胞的异同，最重要的是结合题干信息进行分析。4、C【解析】

植物向光弯曲生长的原理：（1）均匀光照或无光：尖端产生生长素→尖端以下部位生长素分布均匀→生长均匀→直立生长。（2）单侧光→尖端→影响生长素运输→尖端以下部位生长素分布不均匀→生长不均匀（背光侧快）→向光弯曲。【详解】A、由于在琼脂块中至少有两种抑制物，所以这两种抑制物之间存在相互作用，A正确；B、向光一侧的抑制物活性高于背光一侧，则向光侧生长速度比背光侧慢，所以会出现向光弯曲生长，B正确；C、根据题干信息，植物向光性不是生长素分布不均匀导致，可能与生长抑制物的分布和含量有关，且向光侧抑制物多于背光侧，C错误；D、向光一侧的生长抑制物比背光一侧多，则向光侧生长速度比背光侧慢，植物会向光弯曲生长，D正确。故选C。【点睛】本题需要考生抓住题干信息“侧扩散的生长素含量并没有区别，发现琼脂块中至少有两种抑制物”，结合教材中分析植物向光弯曲生长的原理进行解释即可。5、B【解析】

关于“内环境稳态的调节”应掌握以下几点：（1）实质：体内渗透压、温度、pH等理化特性和化学成分呈现动态平衡的过程；（2）定义：在神经系统和体液的调节下，通过各个器官、系统的协调活动，共同维持内环境相对稳定的状态；（3）调节机制：神经-体液-免疫调节网络；（4）层面：水、无机盐、血糖、体温等的平衡与调节；（5）意义：机体进行正常生命活动的必要条件。【详解】A、血浆渗透压的大小主要与无机盐和蛋白质含量有关，而组织液和血浆可以相互渗透，所以血浆蛋白含量的变化会影响组织液的渗透压，A错误；B、内环境的稳态是各个器官、系统的协调活动，共同作用的结果，内环境的变化会引起机体自动调节器官、系统的活动，B正确；C、细胞的生命活动不仅依赖于内环境，同时细胞产生的代谢产物（如水、二氧化碳等）是内环境不可缺少的成分，C错误；D、尿液不属于内环境，故尿液浓度的相对稳定不属于内环境稳态，D错误。故选B。【点睛】本题考查内环境的组成、理化性质、稳态的相关知识，意在考查识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论。6、D【解析】

体液免疫和细胞免疫过程：【详解】A、癌变细胞的清除体现了免疫系统的监控和清除功能，A正确；B、癌细胞表面的PD-L1蛋白可与T细胞表面的PD-1分子结合，体现了细胞膜的信息交流作用，B正确；C、抗PD-1抗体与T细胞表面的PD-1蛋白结合，C正确；D、癌症患者体内的PD-1蛋白表达不足，使癌细胞表面的PD-L1蛋白与T细胞表面的PD-1蛋白结合减少，减缓对T细胞功能的抑制，会提高机体细胞免疫能力，D错误。故选D。7、C【解析】

1、斐林试剂可用于鉴定还原糖，在水浴加热的条件下，溶液的颜色变化为砖红色（沉淀）。2、蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应。3、把成熟的植物细胞放置在某些对细胞无毒害的物质溶液中，当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分子就透过原生质层进入到外界溶液中，使原生质层和细胞壁都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来，也就是逐渐发生了质壁分离。4、低温可以抑制纺锤丝的形成从而诱导植物染色体数目加倍。【详解】A、双缩脲试剂和蛋白质发生紫色反应，而题干中的蛋白质溶液、蛋白酶、淀粉酶都是蛋白质，蛋白质分解成多肽依然可以和双缩脲试剂发生反应，所以不能选择这些材料和试剂鉴定酶的专一性，A错误；B、斐林试剂和蒸馏水在50~65℃水浴条件下进行的是还原糖的鉴定，而不是进行蛋白质的鉴定，B错误；C、菠菜叶肉细胞含有叶绿体，使细胞质呈绿色，所以可以根据叶绿体的位置改变，观察植物壁分离现象，C正确；D、洋葱鳞片叶内表皮细胞是高度分化的细胞，不能分裂，所以在低温条件下染色体数目也不会加倍，D错误。故选C。【点睛】本题考查课本基础实验的原理和选材，意在考查学生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。8、C【解析】

分析题图可得，甲图为植物有丝分裂前期的细胞，乙图为植物有丝分裂中期的细胞，丙图为植物有丝分裂后期的细胞，丁图为植物有丝分裂末期的细胞。【详解】装片在制作时需要先用盐酸解离，而因为染色用的染色剂为碱性，因此在染色前需要用清水漂洗以防止解离液和染色剂中和导致染色效果降低，A选项正确；观察过程需要从低倍镜开始，找到分生区细胞后再换高倍镜观察，B选项正确；图甲为有丝分裂前期的细胞，正在处于核膜消失，形成染色体的阶段，已经完成了染色体的复制和相关蛋白质的合成，C选项错误；图乙为有丝分裂中期的细胞，染色体数与普通体细胞相等，丙图为有丝分裂后期的细胞，由于着丝粒断裂，使染色体暂时加倍，故图丙细胞中的染色体数目比图乙细胞中的增加了一倍，D选项正确。故错误的选项选择C。二、非选择题9、下丘脑大脑皮层胞吐一氧化氮合酶动作电位泵②【解析】

1、兴奋在神经元之间需要通过突触结构进行传递，突触包括突触前膜、突触间隙、突触后膜，其具体的传递过程为：兴奋以电流的形式传导到轴突末梢时，突触小泡释放递质（化学信号），递质作用于突触后膜，引起突触后膜产生膜电位（电信号），从而将兴奋传递到下一个神经元。2、体温调节是指：温度感受器接受体内、外环境温度的刺激→传入神经体温调节中枢→传出神经相应地引起内分泌腺、骨骼肌、皮肤血管和汗腺等组织活动的改变，从而调整机体的产热和散热过程，使体温保持在相对恒定的水平。【详解】（1）幼儿由于体温调节中枢下丘脑发育不成熟，对体温的控制力不强；当机体发热时，神经细胞的代谢增强，中枢神经系统处于过度兴奋状态，使高级神经中枢大脑皮层产生强烈的放电，患儿全身或局部的骨骼肌不自主收缩，即出现肢体抽搐等现象。（2）①根据以上分析可知，神经递质谷氨酸以胞吐的方式释放；与突触后膜上的A受体结合，促进大量Ca2+进入细胞内，激活一氧化氮合酶促进精氨酸转化为NO，过量的NO导致中枢神经系统麻痹或痉挛；同时使神经与肌膜对钠离子通透性增高，使得钠离子大量内流引发动作电位的产生，导致惊厥发作。②正常生理状态下，当细胞内Ca2+过多时，通过Ca2+泵将过多的Ca2+运出细胞，以避免可能引起的神经细胞衰老或死亡。（3）①分析表格中的数据可知，首次发作体温≤38.5℃，EFG正常的有10例，而EFG异常的有15例，体温>38.5℃的，EFG正常的有101例，而EFG异常的有30例，因此首次发作体温越低，EEG异常率越高，①正确；②分析表中数据可知，FC患儿年龄≤3岁的，EFG正常的100例，异常的28例，而FC患儿年龄>3岁的，EFG正常的11例，异常的17例，因此FC患儿年龄越大，EEG异常检出率越高，②错误；③根据表中数据可知，若二周后EEG检查仍然异常，则需进一步治疗以避免FC可能移行为EP，③正确；④根据表中数据FC的发作和二周前后EFG的检测情况可知，减少长期的反复发生的FC对EP的预防有一定的价值，④正确。故选②。【点睛】本题以热性惊厥为入手点，考查神经调节和体温调节的相关知识，在学习时一定要区分体温的调节中枢在下丘脑，冷热觉的产生在大脑皮层，学会构建知识框架和对知识进行延伸，要求考生具备较强的逻辑分析能力。10、酵母菌1/3灰绿醋酸（杆）菌固体平板划线法30-35菌落氧气充足（有氧）乙醛【解析】

1.果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。2.醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35

C。3.菌落：是指由单个微生物细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成以母细胞为中心的一团肉眼可见的、有一定形态、构造等特征的子细胞集团。【详解】（1）甲过程为酒精发酵，参与该过程的微生物是酵母菌。发酵瓶中要留有大约1/3的空间，以满足酵母菌初始有氧呼吸所需。经过10～12天，可根据在酸性条件下酒精与重铬酸钾发生化学反应变为灰绿色的特性检测酒精的存在。（2）乙过程为醋酸发酵，参与该过程的微生物是醋酸（杆）菌，该菌可以从食醋中分离纯化获得，分离纯化该菌需要制备固体培养基，灭菌后进行接种，接种微生物常用的方法有稀释涂布平板法和平板划线法，接种后需要将醋酸菌放在氧气充足、温度为30-35摄氏度范围内进行培养，因为醋酸菌适宜在该条件下生长，待长出菌落后，从中挑选符合要求的菌落作为发酵菌种。（3）由分析可知，在氧气充足（有氧）的条件下，缺少糖源时醋酸菌能将酒精变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【点睛】熟知酒精发酵和醋酸发酵的原理和流程是解答本题的关键！掌握微生物实验室培养的有关操作是解答本题的另一关键！11、PCR要有一段已知目的基因的核苷酸序列Taq（热稳定DNA聚合酶）使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因脱分化再分化将培育的烟草幼苗栽培于含有一定盐的土壤中，观察该烟草植株的生长状态【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）基因工程的第一步是获取目的基因，该基因工程中目的基因是抗盐基因，然后采用PCR技术对目的基因进行扩增，扩增目的基因的前提是要获得一段已知目的基因核苷酸序列以便合成引物，同时还必须用Taq（热稳定DNA聚合酶）酶；获得目的基因后，进行基因表达载体的构建，以保证目的基因在受体细胞中能稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。（2）图中的质粒和目的基因中SmaⅠ的酶切位点包含在质粒的抗性基因和目的基因中，因此在构建重组质粒时不能使用SmaI酶切割，若选择该酶会导致质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因被切割。（3）图中⑤为脱分化形成愈伤组织的过