细菌感染的检查方法和防治原则课件

细菌感染的检查方法和防治原则ExaminationandStrategyofPreventionandTherapyforBacterialInfection检查与防治标本采集与送检的原则无菌操作区别取材尽快送检妥善保护

检查与防治病原菌的检查程序药物敏感试验标本直接涂片镜检分离培养生化试验血清学试验动物试验明确诊断初步诊断分子生物学技术其他检测技术检查与防治

形态学检查

ExaminationinMorphology

直接涂片镜检：染色法：革兰染色法抗酸染色法不染色法：悬滴法压片法负染色法：墨汁压片

检查与防治分离培养

isolationandcultivation

分离培养是微生物学诊断的金标准，是最可靠的传统诊断技术。（图为普通培养箱）检查与防治生化反应致病性测定药敏试验脓、痰、咽拭子脑脊液、分泌物直接涂片，革兰氏染色，镜检，细菌形态、排列、染色性 37℃血琼脂平板24~48小时观察细菌生长情况：菌落特点挑取可疑菌落涂片、染色、镜检纯分离血液，穿刺液肉汤（增菌培养）培养液混浊或溶血时，涂片、染色、镜检

病原性球菌的分离培养和鉴定检查与防治

厌氧罐厌氧袋检查与防治生化反应鉴定细菌的重要方法之一。针对一个菌落或纯培养物进行鉴定。检查与防治基本原则①用已知抗体检测未知抗原；②用已知抗原检测未知抗体。最简易的方法有玻片凝集试验。常用的方法有：凝集试验、沉淀试验、补体结合试验、ELISA、免疫荧光等。免疫学试验检查与防治检查与防治检查与防治ELISA病原体检查与防治

ELISA病原体Patientserum检查与防治EEELISA病原体PatientserumAnti-IgG检查与防治分子生物学技术

MolecularBiologicalTechniques

核酸杂交

nucleotidehybridization

原位杂交

insituhybridization

斑点杂交

dotblot

SouthernblotNorthernblot

PCR技术：多聚酶链反应

(polymerasechainreaction，PCR)检查与防治

PCR

是一种无细胞的分子克隆技术，能在体外将一个基因或一段DNA序列经过多次循环的DNA复制，在数小时内扩增上百万倍。利于诊断和研究。检查与防治检查与防治特异性预防免疫一、特异性预防免疫的发展简史1．经验免疫学时期（17世纪~19世纪）

*中国医学家用人痘苗预防天花*18世纪末英国医生Jenner接种牛痘苗预防天花

检查与防治天花病人局部痂皮磨成粉鼻吸入预防儿童天花中国古代“种人痘”（16~17世纪）检查与防治EdwardJenner(1749-1823)Jenner种牛痘图检查与防治2．经典免疫学时期（19世纪中叶-20世纪中叶）

免疫学与微生物学互相促进、共同发展

*多种病原菌被发现；*“病原菌致病”概念的提出；*疫苗的发明；*细胞吞噬作用的发现（细胞免疫）；*免疫血清具有抵御病原菌的作用（体液免疫）；*免疫化学研究取得重大进展；*初步认识多种免疫学现象的本质。检查与防治EliMetchnikoff(1845-1916)EmilvonBehring(1845-1917)RobertKoch(1843-1910)PaulEhrilich(1854-1915)提出体液免疫理论和抗体生成的侧链学说发现细胞吞噬作用，提出细胞免疫理论发现结核杆菌；提出病原菌致病的概念发现抗毒素并治愈一名白喉患者检查与防治3．近代和现代免疫学时期（自20世纪中叶至今）

*Burnet（1957年）克隆选择学说；*从器官、细胞和分子水平探讨免疫系统结构与功能。MacFarlaneBurnet（1899-1985）TopVirologist;TopEpidemiologistTopImmunologist;1960Nobelprizewinner检查与防治二、免疫系统的功能检查与防治免疫防御天然免疫屏障结构体表屏障：物理、化学、生物屏障

内部屏障：血脑屏障、血胎屏障吞噬细胞：中性粒细胞、单核/巨噬细胞NK、gdT、B-1、NKT、肥大细胞、体液中的抗菌物质：补体、防御素、炎性介质适应性免疫粘膜免疫系统体液免疫：抗毒素、抗菌抗体、抗病毒抗体细胞免疫CTLTDTH及其释放的CK检查与防治三、特异性预防免疫的现状

1、获得性免疫的产生方式主动免疫

自然主动免疫：隐性或显性感染人工主动免疫：接种疫苗或类毒素被动免疫自然被动免疫：通过胎盘、初乳人工被动免疫：注射抗毒素、免疫球蛋白、免疫细胞、转移因子等检查与防治比较人工主动免疫与人工被动免疫内容人工主动免疫人工被动免疫免疫物质抗原或类毒素抗体、免疫细胞、细胞因子免疫出现时间慢，2～4周快，即刻免疫维持时间长，数月至数年短，2～3周主要用途预防治疗或紧急预防

检查与防治特异性预防免疫制剂的种类与应用

将疫苗或类毒素接种于人体，使机体获得免疫力的一种防治微生物感染的措施。人工主动免疫主要生物制剂（一）疫苗（vaccine）灭活疫苗（inactivatedvaccine）减毒活疫苗（liveattenuatedvaccine）

亚单位疫苗（subunitvaccine）核酸疫苗（nucleicacidvaccine）DNA重组疫苗（DNArecombinatingvaccine）治疗性疫苗（therapeuticvaccine）

检查与防治

区别点死疫苗活疫苗制剂特点死，强毒株活减毒株接种剂量与特点量较大，2~3次量较小，1次保存及有效期易保存，约1年不易保存，4℃数周免疫效果较低，维持数月~2年较高，维持3~5年甚至更长比较死疫苗与活疫苗检查与防治（二）类毒素（toxoid）细菌外毒素经0.3%～0.4%甲醛液作用3～4周后，毒性消失但仍保留免疫原性，则为类毒素。类毒素中加入适量的磷酸铝或氢氧化铝等吸附型