医院感染标本的采集与注意事项

医院感染标本的采集及注意事项开县人民医院手术室内容提要一、空气消毒效果的监测二、洁净手术室空气监测三、手消毒效果监测四、物体表面消毒效果监测五、灭菌物品的监测六、内镜消毒、灭菌效果的监测七、消毒、灭菌剂的监测一、空气消毒效果的监测监测频次：见《开县人民医院感染监测内容及执行标准》（年12月3日），所有医院感染监测时间、监测频率均参照此标准。有医院感染流行，怀疑与医院环境卫生学因素或消毒灭菌效果有关时，应及时进行相关监测。采样采样时间：在消毒处理后、操作前进行。采样方法（平板暴露法）：监测前先检查平板是否污染，是否有气泡及霉点。将普通营养琼脂平板（直径为9cm）放在室内各采样点处，采样高度为距地面，采样时将平板盖打开，斜扣放于平板旁，暴露15min，在放置、收取平皿时，手不能在暴露平皿的正上方移动。一、空气消毒效果的监测

布点方法：室内面积≤30m²，设内、中、外对角线上的3点，内、外点布点部位距墙1m处；室内面积＞30m²，设4角及中央共5点，4角的布点部位距墙壁1m处。注意事项采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10min进行采样。平板摆放如取一条对角线，避免离门近的一条。工作人员不要靠近自动门，以免影响监测结果。一、空气消毒效果的监测二、洁净手术室空气监测洁净手术室空气沉降菌浓度的测定：采样前的准备工作：手术室与人员的准备：净化机组开机时间满30分钟后方可采样；采样者必须穿着无菌工作服，采样人员不超过2人。培养皿的准备：用于测定的培养皿必需进行空白对照试验；培养皿测点数根据手术室的面积与级别而定；采样布点位置应距墙面1m以上，高度应距地面80cm以上。

一、空气消毒效果的监测培养皿测点数根据手术室的面积与级别而定；监测样品：碘伏、安尔碘、戊二醛等。物体表面的采样（棉拭子法）：采样时间严格按照30分钟执行。采样方法：软式内镜内腔面，用20ml无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检出口收集。两次空白对照结果都必须为阴性。四、物体表面消毒效果监测空气洁净级别相同的房间，应每个净化级别至少监测一间房间的空气净化状况。灭菌物品采样，应严格遵守无菌操作，避免微生物污染。采样方法（平板暴露法）：监测前先检查平板是否污染，是否有气泡及霉点。工作人员不要靠近自动门，以免影响监测结果。四、物体表面消毒效果监测若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应中和剂。平皿水平夹角30º，采样30min后，在35℃—37℃下培养24h—28h。采样应在手术室处于清洁、静止、密闭的状态下进行；二、洁净手术室空气监测采样过程中的控制：采样应在手术室处于清洁、静止、密闭的状态下进行；培养皿放置妥当后人员迅速离开；采样过程中禁止人员进入,手术室门保持关闭状态；采样时间严格按照30分钟执行。采样点的布置：送风口集中布置的手术间，应对手术区和周边区分别检测，当送风口分散布置时，全室统一检测，但不应布置在送风口正下方。布点方法见沉降菌采样布点方法参考(空态或静态)二、洁净手术室空气监测采样注意事项布点时应从房间的里面开始，依次向外布放。收取平板时顺序由外向里依次收取。空白对照：每次采样设2次空白对照，第一次用于检测培养皿（不打开平皿），第二次每室或每区用一个平皿模拟操作过程（打开平皿，立刻合上），同其它平皿一起送培养。两次空白对照结果都必须为阴性。静态采样可放置在固定设备如手术床上。空气洁净级别相同的房间，应每个净化级别至少监测一间房间的空气净化状况。洁净手术部的洁净用房等级标准层流房间空气采样布点回风口空气动态平板法细菌菌落总数采样动态平板法，采样应在手术过程中进行。采样方式应按图的要求在距每个回风口前5cm的中部均匀摆放3个Φ90mm培养皿；平皿水平夹角30º，采样30min后，在35℃—37℃下培养24h—28h。三、手消毒效果监测手消毒效果的监测

采样时间：在接触患者、进行诊疗活动前采样。采样方法（棉拭子法）：被检人五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次（一只手涂擦面积约30cm²），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，立即送检。三、手消毒效果监测注意事项：若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应中和剂。醇类与酚类消毒剂，不需要加中和剂；含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需加入％硫代硫酸钠；洗必泰、季铵盐类消毒剂，需加入3％（W/V）吐温80和％卵磷脂；醛类消毒剂，需加入％甘氨酸；含有表面活性剂的各种复方消毒剂，需加入3％（W/V）吐温。洗手后不要接触未消毒的物品。用消毒巾擦干，或控干手上的水分。三、手消毒效果监测四、物体表面消毒效果监测采集方法物体表面的采样（棉拭子法）：用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积≥100cm²，连续采样4个，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内。门把手等不规则物体表面的采样（棉拭子法）：用棉拭子直接涂擦采样。四、物体表面消毒效果监测注意事项被采样本表面积＜100cm²取全部表面；被采样本表面积≥100cm²，取100cm²。不规则物体表面的采样，尽量准确估算实际面积。小型物体表面的结果计算，用cfu/件表示，（国家现无评价标准，可估计面积计算菌落总数，参照一般物表的标准进行评价）。若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应中和剂。四、物体表面消毒效果监测五、灭菌物品的监测采样：

采样时间：在灭菌处理后，存放有效期内采样。

采样方法：大件医疗物品：用无菌操作打开器械包（敷料包），用沾有无菌洗脱液的棉拭子反复涂抹手术钳、镊子等医疗器械（手术敷料），将棉拭子投入10ml无菌洗脱液中，将采样液混匀。小件医疗物品：直接将物品投入10ml无菌洗脱液中，将采样液混匀。五、灭菌物品的监测注意事项：送检时间不得超过6h，若样品保存于0℃～4℃，则不得超过24h。灭菌物品采样，应严格遵守无菌操作，避免微生物污染。无菌检验应该在洁净度为100级单向流空气区域内进行采样，对单向流向空气区域及工作台面，必须进行洁净度验证。五、灭菌物品的监测六、内镜消毒、灭菌效果的监测采样

采样时间：在消毒灭菌后、使用前进行采样。

采样方法：软式内镜内腔面，用20ml无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检出口收集。采样布点位置应距墙面1m以上，高度应距地面80cm以上。二、洁净手术室空气监测收取平板时顺序由外向里依次收取。小型物体表面的结果计算，用cfu/件表示，（国家现无评价标准，可估计面积计算菌落总数，参照一般物表的标准进行评价）。平皿水平夹角30º，采样30min后，在35℃—37℃下培养24h—28h。采样者必须穿着无菌工作服，采样人员不超过2人。二、洁净手术室空气监测七、消毒、灭菌剂的监测采样布点位置应距墙面1m以上，高度应距地面80cm以上。无菌检验应该在洁净度为100级单向流空气区域内进行采样，对单向流向空气区域及工作台面，必须进行洁净度验证。洁净手术室空气沉降菌浓度的测定：采样方法：软式内镜内腔面，用20ml无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检出口收集。四、物体表面消毒效果监测六、内镜消毒、灭菌效果的监测四、物体表面消毒效果监测洗必泰、季铵盐类消毒剂，需加入3％（W/V）吐温80和％卵磷脂；含有表面活性剂的各种复方消毒剂，需加入3％（W/V）