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荠菜对乙酰乳酸合成酶抑制剂类除草剂靶标抗性检测技术规程2018-07-27发布2018-12-01实施I1荠菜对乙酰乳酸合成酶抑制剂类除草剂靶标抗性检测技术规程本标准规定了荠菜[Capsellabursa-pastoris(L.)Medik.]对乙酰乳酸合成酶(acetolactatesyn-本规程适用于荠菜对乙酰乳酸合成酶抑制剂类除草剂产生靶标抗性的有关检测。下列文件对于本文件的应用是必术可少的。凡是注地上部生物量受除草剂的抑制程度来评价其对除草剂敏感性的方法使杂草生物量降低50%的除草剂剂量。抗性指数resistanceindex(由于靶标基因DNA分子中碱基对的取代，导致mRNA的某一密码子发生变化，从而引起编码的4检测程序2m²,成熟种子量不少于2000粒。选择无荠菜种子、无除草剂残留的农田地表土，混合20%～30%的草炭土，混小于10cm的培养钵；待测种群及敏感对照种子用0.05%～0.1%的赤霉素溶液浸泡12h～24h后冲洗25℃,光照时间8h～10h条件下培养。待荠菜长至2叶期，待植株长至3叶期，用待测除草剂(ALS抑制剂类除草剂)进行茎叶喷雾处理，除草剂剂量采用敏(1)计算株防效(%)。E——存活植株数占总处理植株数的百分比，单位为百分率(%);4.3.2剂量反应曲线法待植株长至3叶期，用待测除草剂(ALS抑制剂类除草剂)进行茎叶C——待测指标下限，单位为百分率(%);D——待测指标上限，单位为百分率(%);b——斜率。按式(3)计算抗药性指数RI。RI——抗药性指数；4.4靶标基因检测3CpNA=OD₂6o×A×50Bank上的登记号为AY042819.1)和荠菜的ALS(GenBank上的登记号为HQ88064代；377位精氨酸被组氨酸取代；574位色氨酸被亮氨酸/甘氨酸/精氨酸取代；653位丝氨酸被苏氨酸/天冬酰胺/异亮氨酸取代；654位甘氨酸被天冬氨酸/谷氨酸取代(氨基酸序列以拟南芥为参照)。靶标基因序列的测序峰图中这些位点发生相应的突变，即判断为有靶标抗性，荠菜2个ALS序列的任意一5.4抗药性判断如果检测结果中5.1、5.2和5.3均满足条件，即

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