江西省临川市2025届高三下学期联合考试生物试题含解析

江西省临川市2025届高三下学期联合考试生物试题注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．下表中人体不同细胞的寿命和分裂能力不同，以下说法错误的是细胞种类寿命能否分裂小肠上皮细胞1～2天能癌细胞无限增殖能红细胞120天不能白细胞5～7天大多数不能A．吞噬细胞的寿命比红细胞短，这与其吞噬病原体有关B．癌细胞的无限增殖是因为正常基因突变为原癌基因C．通常情况下，细胞的分化程度越高，细胞分裂能力越弱D．小肠上皮细胞寿命最短，与基因控制的衰老和凋亡有关2．果蝇的翅形圆形、镰刀形和椭圆形分别由复等位基因R、S和T控制，基因不位于Y染色体上，多只圆翅雌果蝇和多只椭圆翅雄果蝇进行了随机交配，F1的表现型及比例为圆翅雌果蝇∶椭圆翅雌果蝇圆翅雄果蝇∶椭圆翅雄果蝇∶镰刀翅雄果蝇=2∶2∶2∶1∶1．下列分析不正确的是（）A．果蝇翅形的遗传与性别相关联 B．雌、雄果蝇翅形基因型各有6种C．R对T为显性，T对S为显性 D．F1椭圆翅雌果蝇的基因型有2种3．制备单克隆抗体过程中，动物细胞培养需要先分离出单个细胞，然后再进行培养和筛选。这样做的目的是（）A．为了避免微生物污染B．保证获得细胞的遗传背景相同C．为了使细胞周期一致D．保证细胞得到充足的营养4．某研究小组进行“探究pH对过氧化氢酶的影响”实验时，准备了pH为1．0、2．0、3．0、4．0的四种缓冲液，下列说法正确的是（）A．因变量的检测指标是氧气释放量的多少B．本实验不必再设置空白对照组C．过氧化氢酶在动物肝脏细胞和红细胞中浓度均很高D．四组实验结果必定均不相同5．关于水盐平衡调节的说法，错误的是（）A．血压变化引起肾小管对血浆过滤量的变化而导致尿量变化B．该调节过程涉及多种激素和神经的协调作用C．细胞外液渗透压的改变可影响垂体合成抗利尿激素的量D．抗利尿激素能提高肾脏集合管对水的通透性6．关于组成细胞的元素和化合物的叙述，正确的是（）A．淀粉、糖原、蔗糖的基本组成单位都是葡萄糖B．细胞中的无机盐大都以离子的形式存在C．DNA、RNA的组成元素相同，且含有同种单糖分子D．脂肪由C、H、O、N四种元素组成二、综合题：本大题共4小题7．（9分）回答下列有关血红蛋白的提取和分离的问题：（1）血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：样品处理、粗分离、________和纯度鉴定。（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。①加入柠檬酸钠的目的是__________________________________。②样品处理包括____________、___________、分离血红蛋白溶液和透析。（3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中进行透析，这就是样品的粗分离。①透析的目的是：将样品中分子量较小的杂质蛋白除去。②透析的原理是_____________________________________________________。（4）通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，样品纯化的目的是______________________。（5）最后经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行_____________________。8．（10分）研究发现，癌细胞表面的PD-L1蛋白可与T细胞表面的PD-1蛋白结合，导致T细胞不能全面启动对癌细胞的免疫攻击，而使用抗PD-l抗体可使癌症患者的肿瘤快速萎缩，这种治疗方法叫做癌症免疫疗法。回答下列问题：(l)人和动物细胞的染色体上存在着原癌基因和抑癌基因，其中抑癌基因的主要功能是____________。(2)若较长时间受到致癌因子的作用，正常细胞就可能变成癌细胞，癌细胞具有的主要特征有___________（答出2点即可）。据大量病例分析，癌症的发生并不是单一基因突变的结果，至少在一个细胞中发生5~6个基因突变，才能赋予癌细胞所有的特征，由此推测癌症的发生是一种___________效应。(3)癌细胞表面的PD-Ll蛋白可与-T细胞表面的PD-1蛋白结合，体现了细胞膜具有___________的功能。抗PD-1抗体是癌症免疫疗法药物的关键成分，该药物不可以直接口服，原因是___________。(4)“化疗”是目前治疗肿瘤的主要手段之一，抗代谢药是一类化疗药物。某种抗代谢药可以干扰DNA的合成，使肿瘤细胞停留在分裂__期，从而抑制肿瘤细胞增殖。9．（10分）尿生成量与机体水盐平衡有关，抗利尿激素（ADH）是调节机体水盐平衡的重要激素。回答以下有关问题。（1）抗利尿激素在___________（器官）合成，能引起抗利尿激素分泌量增加的有效刺激是____________。（2）有研究表明，适量的乙醇会抑制ADH的分泌，某实验小组以雌性家兔为实验对象对该研究结果进行验证，实验步骤如下：①将健康的生理状态相同的雌性家兔均分为A、B两组。②A组注射适量的乙醇溶液，B组注射______________。③一段时间后测定A、B两组雌性家兔的________________。预测实验结果为_______________。（3）实验小组刺激雌性家兔的迷走神经，发现雌性家兔的尿量明显增加，说明参与尿量调节的信息分子除了抗利尿激素外还有__________________，机体调节尿量的方式是_________________。10．（10分）萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。11．（15分）近日，25年来最严重的蝗灾正在东非蔓延，对东非国的粮食安全和经济发展都构成了前所未有的威胁，而造成本次蝗灾的罪魁祸首就是沙漠蝗虫。如图为东非某草原蝗灾期间的部分食物网示意图（分解者与无机环境未画出），据此回答下列问题。（1）此食物网包含了_______条食物链，其中狼位于第_____营养级。（2）此食物网中，牧鸡与蛙的关系属于__________。（3）目前，控制沙漠蝗群和蝗蝻带的主要方法是，主要使用汽车和空中喷雾器以小剂量（称为超低量（ULV）配方）施用有机磷化学品，此方法属于______防治，这种防治方法具有快速、高效、使用方便等优点，但不建议频繁使用，为什么？__________（至少2点）（4）相比于杀虫剂治蝗，中国的“牧鸡治蝗”有效又环保，此种治蝗方法属于________防治。（5）若牧鸡的食物40%来自沙漠蝗虫，40%来自蜘蛛，其余来自蛙，那么牧鸡要增加20g体重，最多消耗草和水稻多少克？________

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、B【解析】

1、细胞分化是指在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。2、衰老细胞的特征：（1）细胞内水分减少，细胞萎缩，体积变小，但细胞核体积增大，染色质固缩，染色加深；（2）细胞膜通透性功能改变，物质运输功能降低；（3）细胞色素随着细胞衰老逐渐累积；（4）有些酶的活性降低；（5）呼吸速度减慢，新陈代谢减慢。3、细胞凋亡是由基因决定的细胞编程序死亡的过程。在成熟的生物体内，细胞的自然更新、被病原体感染的细胞的清除，是通过细胞凋亡完成的。4、细胞癌变的根本原因是原癌基因和抑癌基因发生基因突变，其中原癌基因负责调节细胞周期，控制细胞生长和分裂的过程，抑癌基因主要是阻止细胞不正常的增殖。【详解】A、细胞凋亡的速率与它们的功能有关系，吞噬细胞能吞噬进入人体的细菌和病毒以及代谢产生的对人体有害的“异物”，吞噬后就死亡并被排出，所以其凋亡的速率很快，A正确；B、癌细胞的无限增殖是由原癌基因及抑癌基因突变引起的，B错误；C、通常情况下，细胞的分化程度越高，其全能性就越低，细胞分裂能力就越弱，C正确；D、人体不同组织的细胞寿命不同，是由遗传物质决定，与基因控制的衰老和凋亡有关，D正确。故选B。2、B【解析】

多只圆翅雌果蝇和多只椭圆翅雄果蝇进行了随机交配，F1的表现型及比例为∶圆翅雌果蝇∶椭圆翅雌果蝇∶圆翅雄果蝇∶椭圆翅雄果蝇∶镰刀翅雄果蝇=2∶2∶2∶1∶1，表现型与性别相关联，推导出控制翅形的基因位于X染色体上，R对T为显性，T对S为显性，亲本雌蝇的基因型为XRXT、XRXS，比例为1∶1，雄蝇的基因型为XTY，F1椭圆翅雌果蝇基因型有2种；该果蝇群体中，雌果蝇翅形基因型有6种，雄果蝇翅形基因型有3种。【详解】A、由分析可知，果蝇翅形的遗传与性别相关联，说明相关基因位于X染色体上，A正确；B、结合分析可知，该群体中关于翅形的相关基因位于X染色体上，故雌果蝇翅形基因型有6种，分别为XRXR、XRXT、XTXT、XSXT、XRXS、XSXS，雄果蝇翅形基因型有3种，即为XRY、XSY、XTY，B错误；C、后代雌蝇的表现型中无镰刀型出现，且在亲本雄蝇表现为椭圆的情况下，故可知圆翅对椭圆为显性，椭圆对镰刀翅为显性，即R对T为显性，T对S为显性，C正确；D、由分析可知，F1椭圆翅雌果蝇的基因型有2种，即XTXS、XTXT，D正确。故选B。3、B【解析】

将已免疫的小鼠的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌特定抗体的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选，一次是通过选择培养基筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过专一抗体检测筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。【详解】由于小鼠生活过程中存在多种抗原感染，所以小鼠体内存在多种B淋巴细胞，从小鼠体内获取的经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，会形成多种杂交瘤细胞，同时也存在未融合的细胞和同种细胞的融合体，将这些细胞放在特定的选择培养基上培养，可筛选出杂交瘤细胞，但这些杂交瘤细胞产生的抗体是多种，为了筛选到能产生单一抗体的细胞群，可将上述杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，由于每个小孔内只有一个杂交瘤细胞，所以可筛选到产生特异性抗体的杂交瘤细胞，即两次筛选的目的是保证获得细胞的遗传背景相同。筛选的目的不是避免微生物污染，也不是使细胞周期一致和保证细胞得到充足的营养，综上分析，B正确，ACD错误。故选B。4、B【解析】

影响酶作用的因素很多，pH、温度和各种化合物等都能影响酶的作用，酶通常在一定pH范围内才起作用，而且在某一pH值下作用最强。【详解】A、因变量的检测指标是气泡的释放量，A错误；B、本实验可以通过实验组之间的相互对照来得出结论，不必再设置空白对照组，B正确；C、过氧化氢酶在动物肝脏细胞和血细胞中浓度都不高，因为酶具有微量高效的特点，C错误；D、由pH对酶活性的影响曲线可知：在不同的pH下酶活性可能相同，故四组实验结果可能出现两两相同的现象，D错误。故选B。5、A【解析】

水盐调节：（1）引起细胞外液渗透压改变的因素：食物过咸或饮水过量等。（2）参与调节的激素：抗利尿激素。①作用：增强肾小管和集合管对水的重吸收，从而减少尿量；②产生与合成：下丘脑；③释放部位：垂体。（3）参与调节的神经中枢：下丘脑水平衡的中枢和大脑皮层的渴觉神经中枢等。综上，渗透压的调节和水盐的平衡调节是神经调节和激素共同参与的生命活动的调节过程。【详解】A、肾小管腔内液体渗透压升高，肾小管重吸收水分会减少，会引起尿量增加，而不是血压变化的影响，A错误；B、该调节过程涉及多种激素和神经的协调作用，B正确；CD、血浆滲透压升高，刺激下丘脑渗透压感受器引起垂体释放的抗利尿激素增加，肾脏集合管对水的通透性增强，从而使细胞外液渗透压下降，CD正确。故选A。【点睛】本题重点考查水盐平衡的过程，属于识记级别的题型。渗透压的调节和水盐的平衡调节是神经调节和激素共同参与的生命活动的调节过程。渗透压的相对稳定，可以保证生活在液体中的细胞都能够维持正常的形态。6、B【解析】

1.糖类物质的分类列表如下：种类动物特有植物特有单糖六碳糖--半乳糖六碳糖--果糖动植物共有：六碳糖--葡萄糖；五碳糖--核糖、脱氧核糖二糖乳糖（每分子乳糖由1分子葡萄糖和1分子半乳糖脱水缩合而成）麦芽糖（每分子麦芽糖由2分子葡萄糖脱水缩合而成）；蔗糖（每分子蔗糖由1分子葡萄糖和1分子果糖脱水缩合而成）多糖糖原（肝糖原、肌糖原）淀粉、纤维素等2.脂肪是生物体内良好的储能物质，其组成元素是C、H、O；核酸是一切生物的遗传物质，包括DNA和RNA，组成元素包括C、H、O、N、P，核酸的组成单位为核苷酸，核苷酸由一分子五碳糖、一分子的磷酸和一分子的含氮碱基组成。【详解】A、淀粉、糖原的基本组成单位都是葡萄糖，蔗糖由一分子的葡萄糖和一分子的果糖组成，A错误；B、细胞中的无机盐大都以离子的形式存在，少数以化合物的形式存在，B正确；C、DNA、RNA的组成元素相同，都是由C、H、O、N、P组成，DNA中含有脱氧核糖，RNA中含有核糖，C错误；D、脂肪由C．、H、O三种元素组成，D错误。故选B。二、综合题：本大题共4小题7、纯化防止血液的凝固红细胞的洗涤血红蛋白的释放透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去纯度鉴定【解析】

血红蛋白的提取和分离一般可分为四步：样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。样品处理包括四个步骤，即红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液和透析。透析袋是利用半透膜制作的，半透膜可以让小分子可以自由进出，而大分子不能通过。样品纯化的目的是通过凝胶色谱法将相对分子质量大的蛋白质除去。【详解】（1）血红蛋白的提取和分离一般分为4步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。（2）①采取血液时要在采血容器中预先加入柠檬酸钠以防止血液凝固；②样品处理又包括红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液和透析4步。（3）①透析即是血红蛋白的粗分离，透析的目的是除去分子量较小的杂蛋白；②透析的原理是透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内。（4）样品的纯化是通过胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去。（5）最后经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。【点睛】本题考查蛋白质的提取和分离的相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力，属于考纲识记和理解层次的考查。8、阻止细胞不正常的增殖在适宜条件下，能够无限增殖；形态结构发生显著变化；表面发生了变化（或细胞膜上糖蛋白减少，细胞间的黏着性降低，易分散和转移）等累积进行细胞间信息交流抗体的化学本质是蛋白质，口服将会在消化道中被消化水解间【解析】

1、癌细胞是指受到致癌因子的作用，细胞中遗传物质发生变化，变成不受机体控制的、连续进行分裂的恶性增殖细胞。原癌基因能调节细胞的正常生长和增殖，抑癌基因可抑制细胞的不正常分裂并阻止细胞的癌变。2、细胞癌变的原因包括外因和内因，外因是各种致癌因子，包括物理致癌因子、化学致癌因子和病毒致癌因子；内因是原癌基因和抑癌基因发生基因突变。3、癌细胞的主要特征：（1）失去接触抑制，能无限增殖；（2）细胞形态结构发生显著改变；（3）细胞表面发生变化，细胞膜上的糖蛋白等物质减少，导致细胞间的黏着性降低。【详解】（l）抑癌基因的主要功能是阻止细胞不正常的增殖。（2）癌细胞具有的主要特征有在适宜条件下，能够无限增殖；形态结构发生显著变化；表面发生了变化，如细胞膜上糖蛋白减少，细胞间的黏着性降低，易分散和转移等。据大量病例分析，癌症的发生并不是单一基因突变的结果，至少在一个细胞中发生5～6个基因突变，才能赋予癌细胞所有的特征，由此推测癌症的发生是一种累积效应。（3）癌细胞表面的PD﹣Ll蛋白可与T细胞表面的PD﹣1蛋白结合，体现了细胞膜具有进行细胞间信息交流的功能。抗PD﹣1抗体是癌症免疫疗法药物的关键成分，由于抗体的化学本质是蛋白质，口服将会在消化道中被消化水解，因此该药物不可以直接口服。（4）DNA的合成在细胞分裂的间期。因此某种抗代谢药可以干扰DNA的合成，使肿瘤细胞停留在分裂间期，从而抑制肿瘤细胞增殖。【点睛】本题考查细胞癌变的相关知识，要求考生识记癌细胞的特征，掌握癌细胞形成的原因，识记癌细胞的特征，识记癌细胞的治疗，能运用所学的知识准确解答，属于考纲识记和理解层次的考查。9、下丘脑细胞外液渗透压升高等量的生理盐水尿量A组尿量比B组多神经递质神经--体液调节【解析】

水盐平衡的调节。1．体内水少或吃的食物过咸时→细胞外液渗透压升高→下丘脑感受器受到刺激→垂体释放抗利尿激素多→肾小管、集合管重吸收增加→尿量减少，同时大脑皮层产生渴觉（饮水）；2．体内水多→细胞外液渗透压降低→下丘脑感受器受到刺激→垂体释放抗利尿激素少→肾小管、集合管重吸收减少→尿量增加。【详解】（1）抗利尿激素是下丘脑神经分泌细胞合成的，通过垂体释放的激素，能促进肾小管、集合管对水分的重吸收，从而使细胞外液渗透压下降，显然细胞外液渗透压升高能引起抗利尿激素分泌量增加。（2）实验目的是验证适量的乙醇会抑制ADH的分泌，据此可知实验中的自变量是有、无乙醇刺激，因变量是抗利尿激素的分泌量的变化，也可检测抗利尿激素的作用效果，即尿量变化，据此实验步骤为：①分组编号：将健康的生理状态相同的雌性家兔均分为A、B两组。②给与不同处理：A组（实验组）注射适量的乙醇溶液，B组（对照组）注射等量的生理盐水。③一段时间后测定A、B两组雌性家兔的尿量变化。由于使用乙醇后，抑制了抗利尿激素分泌，则A组家兔体内抗利尿激素减少，导致尿量增多，故实验结果为A组家兔尿量对多于B组，则能得出适量的乙醇会抑制ADH的分泌的结论。（3）实验小组刺激雌性家兔的迷走神经，发现雌性家兔的尿量明显增加，说明参与尿量调节为神经调节--体液调节，其中涉及的信息分子除了抗利尿激素外还有神经递质，即机体调节尿量的方式是神经--体液调节。【点睛】熟知水盐平衡调节的过程是解答本题的关键！掌握抗利尿激素的合成、释放部位以及作用效果是解答本题的另一关键！10、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是显微注射技术．此方法的受体细胞多是受精卵。将目的基因导入微生物细胞：原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，最常用的原核细胞是大肠杆菌，其转化方法是：先用Ca2+处理细胞，使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。3、重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。第四步：目的基因的检测和表达1、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。2、其次还要检测目的基因是否转录出了mRNA，方法是采用用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。3、最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原——抗体杂交。4、有时还需进行个体生物学水平的鉴定，如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。【详解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA连接酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒；大肠杆菌作为受体细胞，需要用氯化钙处理，以便重组质粒的导入。（2）①根据题意和图示分析，经过4次PCR技术后获得了新的基因，这是一种定点的基因突变技术。②与研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），因此4次PCR应该分别选择如图所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR