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PAGEPAGE1第1章第2节二[基础达标]题组一微生物的选择培育1.选择培育基是依据某一种或某一类微生物的特别养分要求或对一些物理、化学抗性而设计的培育基。利用这样培育基可以将所须要的微生物从混杂的微生物中分别出来。为选择酵母菌和硝化细菌,应选用的培育基分别为()A.伊红美蓝培育基、含青霉素培育基B.含青霉素培育基、含氨的无机培育基C.含氨的无机培育基、含青霉素培育基D.含青霉素培育基、伊红美蓝培育基【答案】B【解析】酵母菌是真菌,通常可以用含青霉素的培育基进行选择培育,因为青霉素能抑制细菌生长,但不能抑制真菌生长。硝化细菌为自养型生物,能够利用氨转变为亚硝酸和硝酸所释放的能量把无机物转变为有机物以维持自身生命活动,利用含氨的无机培育基可以进行选择培育。2.某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物汲取和利用。以下说法错误的是()A.土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶B.能分解尿素的细菌也能以尿素的分解产物CO2作为碳源C.为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培育基时应选择尿素作为唯一氮源D.筛选分解尿素细菌的培育基含有KH2PO4的作用是供应无机盐和维持pH【答案】B【解析】脲酶可以将尿素分解为氨和CO2,供微生物利用,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源,A正确;能分解尿素的细菌是异养型微生物,不能利用CO2,B错误;为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培育基时应选择尿素作为唯一氮源,C正确;KH2PO4属于无机盐,作用是供应无机盐和维持pH,D正确。题组二微生物的数量测定方法3.用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时,通过统计平板上的菌落数就能推想出样品中的活菌数,缘由是()A.菌落中的细菌数目是固定的B.平板上的一个菌落就是一个细菌C.通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同D.平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌【答案】D【解析】用稀释涂布平板法进行微生物计数时,当样品的稀释度足够高时,培育基表面的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推想出样品大约含有多少活菌,D正确。4.下列关于统计统计数目的方法的叙述,不正确的是()A.采纳平板计数法获得的菌落数往往少于实际的活菌数B.当样品的稀释度足够高时,一个活菌会形成一个菌落C.为了保证结果精确,一般采纳密度较大的平板进行计数D.在某一浓度下涂布三个平板,若三个平板统计的菌落数差别不大,则应以它们的平均值为统计结果【答案】C【解析】当两个或多个细菌连在一起时,平板上形成的只是一个菌落,因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少。一般选择菌落数在30~300的平板计数,密度过大会使计数结果偏小,影响结果的精确性。涂布三个平板作为重复组,取其平均值计数能增加试验结果的劝服力和精确性。题组三能分解尿素的细菌的分别与计数5.培育基是微生物生长、分别、鉴别的养分基础,下列有关微生物培育及培育基的描述错误的是()A.牛肉膏蛋白胨培育基的菌落数明显大于选择培育基的菌落数目,说明选择培育基已筛选出一些菌落B.不论何种培育基,在各成分溶化后都要进行灭菌操作,灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌C.因为土壤中各类微生物的数量不同,所以为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分别D.微生物培育基的配方中必需包含的成分有碳源、氮源、水、无机盐、特别养分物质及琼脂【答案】D【解析】验证选择培育基是否具有选择作用,需设立牛肉膏蛋白胨培育基作为比照,若后者上的菌落数明显大于前者,说明前者是具有筛选作用的,A正确;不论何种培育基,在各成分溶化后都要进行灭菌操作,灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法,B正确;土壤中各种微生物的数量不同,细菌大约占70%~90%,其次是放线菌,真菌最少,故不同类型微生物,要按不同稀释倍数进行,C正确;微生物培育基的主要养分物质有碳源、氮源、水和无机盐等,有的还须要维生素等特别的养分,固体和半固体培育基须要琼脂,液体培育基不须要琼脂,D错误。6.某生物爱好小组欲配制培育基从土壤中选择能分解尿素的细菌,下列相关叙述正确的是()A.配制以尿素为唯一氮源的液体培育基可用于选择和视察尿素分解菌B.试验中设置比照,同时培育一个空白培育基可检验培育基灭菌是否彻底C.为获得1×102倍稀释的稀释液可将90mL无菌水加入10g土壤样品中D.试验中若须要统计能尿素分解菌的菌落数目,接种时只能用平板划线法【答案】B【解析】配制以尿素为唯一氮源的选择培育基可用于选择和视察能分解尿素的细菌,A错误;试验中设置比照,同时培育一个空白培育基可检验培育基灭菌是否彻底,B正确;为获得1×102倍稀释的稀释液可将90mL无菌水加入10g土壤样品中,C错误;试验中若须要统计能分解尿素的细菌的菌落数目,接种时需采纳稀释涂布平板法,D错误。7.通过试验测定土壤中的细菌数量,下列与此操作有关的叙述中,不正确的是()A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培育基,经高温、高压灭菌后倒平板B.取1×104、1×105倍的土壤稀释液0.1mL,分别涂布于各组平板上C.选择菌落数在300个以上的培育皿进行计数D.将培育皿倒置,37℃恒温培育24~48小时【答案】C【解析】用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培育基,经高温、高压灭菌后倒平板,A正确;取1×104、1×105稀释倍数的土壤稀释液各0.1mL,分别涂布于各组平板上,B正确;选择菌落数在30~300个的一组平板为代表进行计数,而不是选择菌落数在300个以上的培育皿进行计数,C错误;细菌培育时,要将培育皿倒置培育,并在37℃恒温培育24~48小时,D正确。8.下列有关土壤中能分解尿素的细菌的分别和计数的试验操作,错误的是()A.取土壤用的小铁铲和盛土样的信封在运用前都须要灭菌B.测定土壤中细菌的数量一般选用1×102、1×103、1×104倍的稀释液进行平板培育C.鉴定能分解尿素的细菌,利用了尿素分解成氨,从而使pH上升的原理D.用牛肉膏蛋白胨培育基作比照,来验证选择培育基是否有选择性【答案】B【解析】取土壤用的小铁铲和盛土样的信封在运用前都须要灭菌,A正确;土壤中细菌比真菌多,在测定土壤中细菌的数量时,一般选用1×104、1×105和1×106倍的稀释液进行平板培育,B错误;鉴定能分解尿素的细菌的原理:该细菌能产生脲酶,脲酶能将尿素分解成氨,从而使pH上升,使酚红变红色,C正确;用牛肉膏蛋白胨培育基作比照,来验证选择培育基是否有选择性,若有选择性,其上菌落数目要比比照组少得多,D正确。[实力提升]9.如图是从土壤中筛选能产脲酶的细菌的过程,下列叙述不正确的是()A.能产生脲酶的细菌可以分解利用尿素B.图中逐级稀释的程度会干脆影响细菌培育基上的菌落数量C.培育基中可添加KH2PO4、Na2HPO4以供应无机盐和作为缓冲剂D.培育基①应以尿素为唯一氮源,培育基②的作用是纯化培育能产脲酶的细菌【答案】D【解析】酶具有专一性,能产生脲酶的细菌可以分解利用尿素,A正确;稀释度越低,细菌培育基上菌落数越多,稀释度越高,细菌培育基上菌落数越少,所以逐级稀释的程度会干脆影响细菌培育基上的菌落数量,B正确;细菌的生长繁殖须要无机盐作为养分物质,培育基中添加磷酸二氢钾,磷酸氢二钠可供应无机盐同时也可以作为缓冲剂,C正确;培育基①为选择培育基,以尿素作为唯一氮源,培育基②为鉴别培育基,通过加入酚红指示剂,推断菌落四周指示剂是否变红,不是用于纯化培育能产脲酶的细菌,D错误。10.下图是探讨人员从红棕壤中筛选能高效分解尿素的细菌的过程示意图,有关叙述错误的是()A.在配制步骤②③的培育基时,应先调pH值后进行高压蒸汽灭菌B.步骤③纯化能分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌分散,可以获得单细胞菌落C.步骤③采纳涂布平板法接种,并需向牛肉膏蛋白胨培育基中加入尿素D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的实力【答案】C【解析】配制培育基时,应先调pH值后进行高压蒸汽灭菌,A正确;步骤③纯化能分解尿素的细菌的原理是将聚集的细菌通过涂布平板法分散,获得单细胞菌落,B正确;步骤③筛选能分解尿素的细菌,培育基中应以尿素为唯一氮源,C错误;步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的实力,D正确。11.三个培育皿中分别加入10mL不同的培育基,然后接种相同的大肠杆菌样液,培育36小时后,计算菌落数,结果如下表,下列选项正确的是()培育皿培育基成分菌落数/个Ⅰ琼脂、葡萄糖35Ⅱ琼脂、葡萄糖、维生素250Ⅲ琼脂、维生素0A.该试验采纳的是液体培育基B.该试验采纳平板划线法接种C.Ⅰ和Ⅲ比照,说明大肠杆菌的生长不须要维生素D.Ⅱ和Ⅲ比照,说明大肠杆菌的生长须要碳源【答案】D【解析】该培育基加入了琼脂,故为固体培育基,A错误;对微生物进行计数,应采纳稀释涂布平板法接种,B错误;Ⅰ与Ⅲ比照,有两个变量,不能证明是否须要维生素,C错误;Ⅱ和Ⅲ比照,自变量是有无葡萄糖,说明大肠杆菌的生长须要碳源(葡萄糖),D正确。12.尿素是一种重要的农业氮肥,但是尿素不能被农作物干脆汲取,只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后,才能被植物利用。请回答下列问题。(1)土壤中的某些细菌能分解尿素,是因为它们能合成____________________。(2)配制好的培育基常用________法进行灭菌。为了检测所用培育基平板灭菌是否合格,须要进行的操作是________________________________________________。(3)为了筛选到能分解尿素的细菌,在配制培育基时,应选择尿素作为唯一氮源,缘由是______________________________________________________;若平板上长出菌落,可通过加入显色剂初步鉴定该种细菌能够分解尿素,加入的显色剂是____________________。(4)一位同学在某浓度下稀释涂布了一个平板,统计的菌落数为230。该同学的试验结果________(填“有”或“无”)劝服力,缘由是__________________________。【答案】(1)脲酶(2)高压蒸汽灭菌将灭菌后的空白平板培育一段时间,视察培育基上是否有菌落产生(3)只有能够利用尿素的细菌才能在该培育基上生长酚红(4)无没有设置重复组【解析】(1)土壤中的某些细菌能够合成脲酶,脲酶能够将尿素分解为氨和二氧化碳。(2)培育基常用高压蒸汽灭菌法灭菌。检测培育基灭菌是否合格,须要将灭菌后的空白平板培育一段时间,视察培育基上是否有菌落产生,假如没有菌落产生证明培育基灭菌合格,否则不合格。(3)筛选能分解尿素的细菌时须要运用以尿素为唯一氮源的选择培育基,因为只有能够利用尿素的细菌才能在该培育基上生长,其他微生物不能分解尿素而不能生长。能分解尿素的细菌能够将尿素分解为氨而使pH上升,酚红指示剂能够与氨反应呈红色,故可以用酚红指示剂检测能分解尿素的细菌。(4)依据题意可知该同学没有设置重复组,所以结果没有劝服力。13.苯酚是工业生产排放的有毒污染物质,自然界中存在着能降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚,为了降解废水中的苯酚,探讨人员从土壤中筛选获得了能降解利用苯酚的细菌菌株,筛选的主要步骤如下图所示,①为土壤样品。请回答下列问题。(1)②中培育目的菌株的选择培育基中应加入______作为唯一碳源,②中不同浓度碳源的培育基________(填“影响”或“不影响”)细菌的数量,假如要测定②中活细菌数量,常采纳____________________法。(2)④为比照,④与⑤培育基的主要区分在于④的培育基没有加入任何碳源,⑤的培育基加入苯酚作为碳源,微生物在________中不生长,在________中生长;运用________________________法可以在⑥上获得单菌落。采纳固体平板培育细菌时进行倒置培育的缘由是____________________。(3)试验过程中如何防止其他微生物的污染?______________________。【答案】(1)苯
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