进出口化妆品中紫外线吸收剂的测定 液相色谱法

进出口化妆品中紫外线吸收剂的测定液相色谱法本标准规定了具有防晒功能的化妆品中苯基苯并咪唑磺酸、对氨基苯甲酸、二苯酮-4、二苯酮-3、P-甲氧基肉桂酸异戊酯、4-甲基苄亚基樟脑、二乙氨基羟苯甲酰基苯甲酸己酯、PABA乙基己酯、丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷、奥克立林、甲氧基肉桂酸乙基己酯、水杨酸乙基己酯、胡莫柳酯、乙基己基三嗪酮、亚甲基双·苯并三唑基四甲基丁基酚、双·乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪(16种)紫外线吸收剂含量的高效液相色镨检测方法。本标准适用于具有防晒功能的化妆品中上述16种紫外线吸收剂的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法化妆品中的各种紫外线吸收剂、经浴剂超声提取、定容、离心、过滤后采用反相高效液相色谱技术，进行分离、测定。根据其保留时问定性，以外标法定量。4.1四氢呋喃，色谱纯4.2甲醇，色谱纯。4.4混合溶液：甲醇(4.2)四氢呋喃(4.1)水(250+450+300,体积比)。4.5标准品：苯基苯并咪唑磺酸、对氨基苯甲酸、二苯图4、二苯酮-3、P-甲氧基肉桂酸异戊酯、4-甲基苄亚基樟脑、二乙氨基羟苯甲酰基苯甲酸己酯、PABA乙基己酯、丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷、奥克立林、甲氧基肉桂酸乙基己酯、水杨酸乙基己酯、胡莫柳酯、乙基己基三嗪酮、亚甲基双-苯并三唑基四甲基丁基酚、双-乙基己氧苯酚甲氧苯基三嗪，纯度均》98%,相关信息详见表A.1。4.6紫外线吸收剂标准储备液：称取适量各标准品(45)(精确至0.1mg),用四氢呋喃(4.1)溶解，配制成适当浓度标准储备液，4℃以下避光保存。4.7紫外线吸收剂混合标准储备液：移取适量各紫外线吸收剂标准储备液(46),用混合溶液(4.4)稀释、定容，配制成混合标准储备液，其浓度见附录A表A.1,4℃以下避光保存51天平：感量00001g。5.2天平：感量0.001g。5.3液相色谱仪：配有紫外检测器。5.4超声波清洗器。5.5离心机：12000vmin。5.6注射式样品过滤器，配有有机相滤膜，滤膜孔径为0.45μm。6测定步骤6.1试样预处理称取化妆品样品0.25g(精确至1mg)于25mL具塞试管中，加入15mL.混合溶液(4.4),在超声波清洗器中超声振荡20min。样品完全分散后将溶液转移至50mL容量瓶中，用混合溶液(4.4)清洗试管，洗液并入容量瓶中，并用混合溶液(4.4)定容至刻度，摇匀后，取部分溶液至离心管中以12000/min高速离心15min,取上清液经注射式样品过滤器(5.6)过滤后得试样溶液。6.21色谱条件6.2.1.1色谱柱：ZORBAXSBC18[5μm,250mm×4.6mm(内经)].或相当者；0.2mL+300mL。梯度洗脱条件见表1。A;甲醇%0556.2.1.3流速：1.0mLmin。6.2.1.4检测波长：311mm。6.2.2工作曲线绘制移取0mL、0.1mL、0.50mL,1.00mL、2.50mL、5.00mL、10.00mL紫外线吸收剂混合标准储备液(4.7)于10mL容量瓶中，以混合溶液(4.4)稀释至刻度，摇匀，配制成混合标准工作液。分别取10μL混合标准工作液进行液相色谱测定，根据保留时间以各色谱峰的峰面积与其对应的紫外线吸收剂浓度作图绘制标准工作曲线，相关系数不应低于0.99。标准品色谱图参见图B.1.根据试样中紫外线吸收剂的含量，以混合溶液(4.4)稀释试样溶液(6.1)进行液相色谱测定，记录各色谱峰的保留时间和峰面积。如果试样溶液中被测物的含量超过混合标准工作液的线性范围，可稀释至合适浓度后再进行测定7结果计算和表述试样中各化合物的含量X以百分含量表示，按式(1)计算：X——被测紫外线吸收剂。%;G——从工作曲线上查出的样品溶液中紫外线吸收浓度，单位为毫克每升(mg/L);v——定容体积，单位为升(L);m——称样量，单位为克(g);在符合精密度要求条件下，结果取两次平行测定值的平均值，保留至小数点后两位。8测定低限和回收率测定低限和回收率参见附录C。4(规范性附录)标准品信息及混合标准储备液浓度表A.1标准品信息及混合标准储备液浓度储备液浓度/(mgL.)123456789甲氧基肉桂酸乙基己酯乙基己基三喃用(资料性附录)B.116种紫外线吸收剂标准品液相色谱图见图B.I。图B.116种紫外线吸收剂标准品液相色谱图说明：1——苯基苯并咪唑磺酸；2——对氨基苯甲酸；3——二苯酮-4;4——二苯酮-3;5—P-甲氧基肉桂酸导戊酯：6—-4-甲基苄亚基樟脑：7——二乙.氨基羟苯甲酰基苯甲酸己酯：8PABA乙基己酯；9——丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷：10——奥克立林；11——甲氧基肉桂酸乙基己酯；12——水杨酸乙基己酯；13——胡莫柳酯；14——乙基己基三嗪酮；15——亚甲基双-苯并三唑