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文档简介

论苦玄参化学成分和定量分析研究进展苦玄参为玄参科(scrophulariacea)植物苦玄参picriafelterraelour.的干燥全草,为广西常用中药,系玄参科苦玄参属唯一的一种植物,为一年生草本,其性寒味苦,具有清热解毒、消肿止痛的功能。用于感冒风热、咽喉肿痛、痄腮、胃热腹痛、痢疾、跌打损伤、疖痈、毒蛇咬伤〔1,2〕等证。在广西民间传统应用已有二百多年的历史,收载于广西中药材标准中,具有良好的应用前景。现将其近年来在化学成分和质量分析的研究进展综述如下。1化学成分迄今为止,苦玄参中的化学成分主要集中在葫芦苦素(cucurbitacin)三萜成分和黄酮类化合物的研究报道,国内外对苦玄参进行研究,发现其有效成分主要为四环三萜苷类。三萜成分是苦玄参中最早被报道的一类化学成分,由于它们与葫芦科植物中的苦味素结构相似,所以也有文献将其称为葫芦苦素(cucurbitacin)〔3〕。成桂仁等自苦玄参药材中共分离鉴定了6个葫芦苦素类苷元、1个皂酮、10个皂苷〔4~17〕和3个黄酮〔18〕。王力生等〔19〕从苦玄参乙醇提取物的较低极性部位中分离鉴定了6个化合物,即n-benzoylphenylalanyl-l-phenylalaninolacetate①,1-羟基-7羟甲基蒽醌②,9,16-二羟基-10,12,14-三烯-十八碳酸③,5,7,4'-三羟基黄酮④,β-谷甾醇⑤和胡萝卜苷⑥。化合物①~③的13c-nmr数据为首次提供。邹节明等〔20〕用硅胶和mci柱色谱分离纯化,得到2个不含呋喃环的葫芦苦素类化合物,分别鉴定为11,24-二酮-5,21-二烯葫芦素-3α-o-β-d-吡喃木糖基-16α-o-α-l-吡喃鼠李糖苷(脱氢拜俄尼苷)和己降葫芦苦素f,其中前者为新化合物,后者首次从苦玄参中分离得到。此外,他们还用采用大孔树脂、硅胶柱色谱纯化得到一个新的三萜皂苷—11,22-三羰基-16α-羟基-(20s,24)-环氧苦味素-5,23-二烯-2β-o-β-d-吡喃葡糖苷(苦玄参苷xi)〔21〕。现将已从苦玄参中分离鉴定的三萜成分和黄酮类化合物结构整理如下。1.1四环三萜类苷及苷元见表1~2,图1~6。表1四环三萜类苷及苷元结构式(略)表2四环三萜类苷及苷元结构式(略)表3黄酮类化合物结构式(略)2定量分析四环三萜苷类是苦玄参中主要活性成分,苦玄参ia和ib是其中的主要苷元,药理实验证明,苦玄参干浸膏有明显的抗炎及镇痛作用〔22〕。2014版《中国药典》正文中尚未收载该品种,但有些以其为原料的中成药如妇炎净胶囊等已收载入《中国药典》(2014年版及2014版)〔23〕。目前学者对苦玄参质量分析的研究主要集中在对苦玄参药材及其中成药中苦玄参苷ia含量的测定方面。2.1高效液相色谱法陈勇等〔24〕用rp-hplc法,采用c18ods2柱(5μm,4.6mm×250mm),以乙腈-0.3%磷酸(34∶66)为流动相,流速lml/min,柱温为25℃,检测波长为264nm,对不同产地、不同采收季节苦玄参中苦玄参苷ia进行含量测定。结果显示,苦玄参苷ia进样量在0.42~2.10μg的范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为100.4%,rsd=1.64%(n=6)。实验证明不同产地苦玄参中苦玄参苷ⅰa的含量不同,苦玄参采收季节不同是影响其含量的一个因素。邹节明等〔25〕将超滤技术用于苦玄参等药材有效成分的分离提取,以提取物中有效成分(苦玄参苷ⅰa)的转移率、药液的膜通量和干膏(固体物)降低率3个考察指标作为评价的标准,对苦玄参水提液进行超滤实验,用hplc法测定苦玄参苷ia的含量,结果在超滤前药液中的含量约为0.28%,而超滤后在药液中能达到0.22%以上,转移率能够达到80%以上,干膏降低率达到了45%以上,取得了良好的效果。郑成远等〔26〕采用rp-hplc法测定湖南张家界、广西梧州、安徽亳州、江西樟树和河南商丘5个产地苦玄参中苦玄参苷ia含量,色谱条件为:kro-masilc-18柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温35℃;流动相乙腈-0.5%醋酸=36∶64,流速1.0ml/min,检测波长264nm。结果显示各地苦玄参药材中苦玄参苷ⅰa的含量差异较大,安徽亳州和江西樟树所产苦玄参药材中苦玄参苷ⅰa的含量较高。邹节明等〔27〕以hplc法测定苦玄参苷ia的含量为指标,筛选适用的大孔吸附树脂型号,评价树脂吸附与解吸工艺,结果表明苦玄参提取物精制适用hpd50号树脂,吸附阶段泄漏点和饱和点分别在1.5和l1左右,解吸阶段的适用乙醇浓度分别为50%,苦玄参苷ia含量可提高4倍以上。甄汉深等〔28〕采用agilentzorbaxeclipsexdbc8色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),以乙腈-0.5%醋酸(32∶68)为流动相,流速1ml?min-1,检测波长264nm,测定广西两种不同产地种植的苦玄参药材的茎、叶中苦玄参苷ⅰa的含量。实验结果显示,苦玄参苷ⅰa在2.28~11.4μg范围内线性良好,平均加样回收率为101.1%,rsd=2.4%(n=5)。两种产地叶中苦玄参苷ⅰa均明显高于茎。胡慧玲等〔29〕用kromasilods-1hplc柱c18(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水-冰醋酸(38∶62∶0.5)为流动相,流速1.0ml/min,柱温40℃,检测波长264nm,对妇炎宁片中的苦玄参苷ia进行了含量测定。结果为苦玄参苷ia在线性范围为0.1~0.6μg范围内线性良好(r=0.9995),平均回收率为101.22%,rsd=2.16%(n=5),10批样品的平均测定结果为3.44mg/g。2.2薄层扫描法邹节明等〔30〕采用薄层扫描法测定不同产地苦玄参的根、茎、叶中苦玄参苷ⅰa和ⅰb的含量,以甲醇为溶媒,超声提取苦玄参各药用部位,提取物经大孔树脂d101精制后,点于含1%cmc-na的硅胶gf254板上,以氯仿-甲醇-水(4∶1∶0.1)为展开剂展开后,用camagtlcⅲ型线性扫描仪测定,检测波长为268nm,狭缝尺寸为8mm×0.6mm。结果显示,苦玄参苷ⅰa的点样量在1.1~5.4μg,苦玄参苷ⅰb在1.0~6.2μg范围内与各自峰面积呈良好的线性关系,r分别为0.9990和0.9992,加样回收率分别为98.3%和97.5%;在同一产地不同药用部位中,苦玄参苷ⅰa和ib的含量:叶中最高,茎中次之,根中最低;在同一药用部位中,叶中苦玄参苷ⅰa含量高于ⅰb,根和茎中苦玄参苷ⅰb含量高于ⅰa。陈勇〔31〕采用双波长薄层扫描法分别测定炎肿化毒片、炎见宁片和妇炎净胶囊中苦玄参苷ⅰa的含量,用5%cmc-na的硅胶gf254板,展开剂为氯仿∶甲醇=4∶1,在紫外灯下(254nm)检视定位,进行光谱扫描,扫描条件为:λs=270nm,λr=350nm,sx=3,反射式锯齿形扫描。结果表明苦玄参苷ⅰa的点样量在2.4~7.2μg间呈良好的线性关系,平均加样回收率为97.9%,rsd=1.8%(n=5)。蒋明廉〔30〕邹节明,王力生,严海,等.tlcs法测定苦玄参中苦玄参苷ⅰa和ⅰb的含量〔j〕.药物分析杂志,2014,25(6):654.〔31〕

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