生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座

优异精品课件文档资料生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第1页生物技术药品药代动力学特点及检测广州蓝韵医药研究有限企业专注于中药新药临床前研究，保健品研发生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第2页CumulativeRevenuesofSelectedBiotechnologyCompanies(Amgen,Genentech,Chiron,GenzymeandBiogen)生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第3页SelectedBlockbusterProteinPharmaceuticals生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第4页生物技术药品重组蛋白多肽类单克隆抗体及其片断寡核苷酸疫苗制剂基因治疗药品（核酸制剂）干细胞药品？生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第5页蛋白肽类药品药代动力学吸收分布代谢与排泄生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第6页蛋白肽类药品吸收小分子多肽：被动吸收大分子多肽：水溶性：细胞间隙脂溶性：膜脂扩散胞饮淋巴系统吸收：po干扰素；高度脂溶性？影响蛋白肽类药品吸收原因药品稳定性；细胞渗透性：MW1000，鼻粘膜》肠粘膜生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第7页CorrelationbetweenMWandthecumulativerecoveryofscrINFalpha-2a,cytochromec,inulinand5-fluoro-2-deoxyuridine(FUDR)intheefferentlymphinsheep生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第8页蛋白肽类药品吸收非肠道给药(ParenteralRoute)：IV>M＝SC＝IP>鼻腔>肺>直肠>回肠>阴道>颊>口服鼻腔给药(Intranasaladministration);Inhaleadministration;口服给药(Oraladministration)Peroraladministration经皮给药(Transdermaladministration);其它给药路径:结肠、回肠、子宫、阴道、颊、眼睛等。生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第9页IM和SC给药生物利用度IMAdministrationDrugBioavailability(%)Alefacept63Interferonalpha-2a>80Triptorelin83SCAdministrationDrugBioavailability(%)Anakinra95Cetrorelix85Darbepoetin37Follitropin66Ganirelix91Interferonbeta-1b50Teriparatide95生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第10页PharmacokineticsofIMADI-SSPEG20,000mw

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humanswithhepatocellular

carcinoma生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第11页Intranasaladministration易给药；鼻粘膜上皮细胞有大量微绒毛和广泛分布血管淋巴管；无肝首过效应；伪首过效应(Pseudo－first－passeffect)；多肽、蛋白酶（主要是氨肽酶）；calcitonin,oxytoxin,LH-RH,growthhormone,interferone,vaccines；分子量upto2KDa:pharmacologicallyacitive；血脑屏障：IGF-1。生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第12页InhalationadministrationEaseofadministrationlargesurfacearea(75m2)HighvascularityBypassoffirst-passmetabolismInsulinforTypeIIdiabetesDornase-alphaforcycticfibrosisProteasesinthelungLocaleffectsEffectofmolecularweight?生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第13页PlasmabioavailabilityoftherapeuticpeptidesversusMWafterpulmonaryadministration生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第14页OraladministrationGenerallynottherapeuticallyactive;Factorsforlackofsystemicbioavailability:highgastrointestinalenzymeactivitygastrointestinalmucosaasanabsorptionbarrier;cytochromeP4503Aandp-glycoproteinactivityAvailableoralforms:cyclosporine(30%)anddesmopressin(0.16%);Absorptionenhancers;encapsulationinmicroparticlesornanoparticles.生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第15页蛋白肽类药品分布分布容积小：0.04-0.2L/kgvs.1-20L/kg(小分子);分子量大;水溶性大;蛋白结合率高？中央室（Vc):3-8L=plasmavolume和平衡室(Vss):14-20L<2x中央室;蛋白结合:reduceclearance;Site-specificandtarget-orientedreceptormediateduptake生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第16页生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第17页蛋白肽类药品分布：血脑屏障血脑屏障：缺乏特异转运系统；存在蛋白分解酶；外排作用泵提升血脑屏障对蛋白多肽类药品摄取方法：脂质体鼻腔给药；脊髓管灌注或泵连续输注。生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第18页ZiconotidecerebrospinalCSFconcentrationasafunctionoftime生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第19页CSFZiconotidePharmacokineticResultsbyDoseGroup生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第20页小分子药品代谢Drugbiotransformationisdividedintotwotypesofreactions:phaseI(hydrolysis,oxidation,andreduction)phaseIIreactions:conjugation((uridinediphosphoglucuronosyltransferase(UGT),N-acetyltransferase(NAT),glutathioneS-transferase(GST),andsulfotransferase(ST)).生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第21页小分子药品代谢生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第22页蛋白肽类药品代谢与排泄（消除：elimination)蛋白水解酶（溶酶体、蛋白酶、组织蛋白酶、氨肽酶、二肽酶）:throughoutbodyProteosesPeptisases受体介导去除(receptor-mediatedendocytosis):t-PA－liver－lowdensitylipoproteinreceptor-mannose-asialogglycoproteinreceptor;insulin蛋白水解酶稳定：环孢菌素－P450?生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第23页蛋白肽类药品代谢与排泄肾脏肾小球：<30Kd,eg.,IFN,IL-2,肾小管近曲小管(proximaltubule)endocyticvesiclehydrolysisintopeptidefragments:IL-2,IL-11,growthhormone,insulinLuminalmembranes:hydrolysis:smalllinearpeptides:ANGI,ANGII,bradykinin,glucagon,LH-RHEndocytosedanddegradedinlysozymes:largerandmorecomplexproteinspeptidesPeritubularcapillaries:growthhormone肝脏:insulin,glucagon,epidermalgrowthfactor,antibodies,andt-PA胆道:血液:endo-oligopeptidase?肠道生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第24页蛋白肽类药品特点及其应用显著种族特异性：试验动物选择；免疫原性：ELISA;重复给药产生抗被测试药品抗体；体内有大量蛋白肽类物质包含结合蛋白：生物样品前处理：LC-MS；被测试药品尤其细胞因子给药量极小（ng-pg/ml):检测灵敏度；存在被测试药品内源性物质：本底效应；同位素法;suppressionviaphysiologicalregulationorfeedback,eg,infusingglucosetosuppressendogenousinsulin生物活性不但取决于药品一级结构,而且与其二级、三级结构相关：生物检定法；生物PD-PK模型生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第25页蛋白肽类药品样品检测方法免疫测定法(Immunoassays)酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linkedimmunosobantassay,ELISA);放射免疫测定法(Radioimmunoassay,RIA);免疫放射定量法(IRMA);同位素标识示踪法(Isotopelabeltraceassay)生物检定法(Bioassays);高效液相（HPLC）、液质联用（LC-MS）法:comparablesensitivityhigherselectivity;eg,plasmabradykininpeptideantagonist;毛细血管电泳(CE)、高效毛细血管电泳(HPCE)和毛细血管电泳色普(CEC)；RealtimePCR、proteinchips生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第26页ELISA法一抗（种族特异性）抗原（待测药品）二抗（酶偶联）显色酶底物酶标仪生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第27页ELISA法优点高度灵敏度:ng－pg/ml;较高特异性;易于操作、快速、不使用同位素、无辐射源,适合用于批处理;试剂使用寿命长；当前最惯用检测方法。缺点待测蛋白多肽免疫活性而非生物活性;不能区分含有抗原决定族代谢物片断；不能同时测定代谢物片断;不一样起源抗体结合性不一；受一些原因干扰生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第28页ELISA法干扰原因含有抗原决定族代谢物片断；被测试药品内源性物质；基质效应;被测试药品可溶性受体结合蛋白;低亲活力结合蛋白高亲活力结合蛋白重复给药产生抗被测试药品抗体：中和性或非中和性长久给药；生物等量性试验生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第29页ImmunogenicityofnativeADIandADI-SSPEGinmiceandrabbits

生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第30页SC生长激素（0.4IU/kg）后食蟹猴(n=7-8/组)血清生长激素浓度生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第31页普通ELISA、高灵敏度ELISA（additional增色放大系统）和化学发光ELISA法(luminol/过氧化氢底物)灵敏度和线性范围比较

(From汤仲明，）生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第32页放射免疫测定法和免疫放射定量法抗原，标识抗原，抗体灵敏度高，尤其免疫放射定量法需同位素惯用于激素浓度测定生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第33页同位素标识示踪法在目标蛋白多肽分子上标识同位素,从而判别目标蛋白多肽与内源性蛋白多肽该法需将目标蛋白多肽进行同位素标识,标识方法有外标法(化学联接法)和内标法(掺入法)2种；外标法：将标识物如125I经过化学方法偶联至完整蛋白中如蛋白中酪氨酸或赖氨酸等，惯用化学方法有氯胺T或Iodogen法内标法：可用即将标识以3H,14C或35S等同位素氨基酸加入生长细胞或合成体系中,从而取得含同位素蛋白多肽分子,但因其操作复杂而少用；标识后蛋白多肽表征：比放射性放射性纯度标识蛋白多肽生物活性。生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第34页同位素标识示踪法优点灵敏度高简便直观检测快速尤其适合用于蛋白肽类药品组织分布缺点同位素标识普通不能进行人体药品动力学研究;可能引发药品生物活性及代谢行为发生改变；因为蛋白多肽进入体内会被降解代谢,或标识氨基酸生物再利用，或与其它蛋白质结合,总放射性不能代表药品动力学过程生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第35页同位素标识示踪法与其它分析伎俩联合应用SDS三氯醋酸(TCA)沉淀法HPLC法生物技术药物的药代动力学特点及检测专家讲座第36页生物检定法利用被测蛋白多肽类药品某种特异生物反应,经过剂量(浓度)－效应曲线对目标蛋白多肽进行定量测定一个分析方法；分为离体分析法和在体分析法；离体分析法通常采取细胞体外培养技术,以细胞增殖、分化或细胞毒性为基础,以细胞数目标增减等为量效指标，如水蛭素(hirudin)凝血酶时间测定；在体分析法则利用蛋白多肽类药品在整体动物中引发特异生物学反应，如胰岛素降底小鼠血糖。生物技术