无菌产品动态环境监测拜耳制药

1.引言本文目标是阐述相关无菌产品生产微生物和微粒控制概念和标准。这些概念对于无菌产品生产非常主要，但也可用于非无菌产品生产。环境监测重点在于其相关设施控制和符合标准。环境监测目标在于可帮助建立一个有针对性、易于管理和有预防功效程序。1无菌产品动态环境监测拜耳制药第1页为确保稳定生产环境，全方面环境控制程序应包含以下方面：

a.合理厂房设计和维护b.文件系统c.已验证/确认卫生清洁/消毒程序d.可靠过程控制e.良好设备管理和保养f.进入洁净区有效控制g.有效培训，证书/资格以及评定程序h.物料及设备质量确保环境监测是一个评定对生产环境控制有效性工具。进入制药厂洁净室和其它受控环境程序是无菌确保程序辅助。2无菌产品动态环境监测拜耳制药第2页2.

环境级别应基于科学合理标准设计和执行环境监测程序，并与生产所在地政府法规要求相一致。假如是为了供给国际市场，应以最严格要求作为环境监测基本标准。3无菌产品动态环境监测拜耳制药第3页4无菌产品动态环境监测拜耳制药第4页5无菌产品动态环境监测拜耳制药第5页6无菌产品动态环境监测拜耳制药第6页3.监督确保从事环境监测程序人员应含有科学方面知识，并经过对应培训和授权。应校准所使用设备，验证系统，正确制备培养基，全部操作程序应书面成文并遵照执行。7无菌产品动态环境监测拜耳制药第7页3.1清洁及卫生/消毒执行清洁和卫生程序是厂房控制关键部分。环境监测数据用于确定这些程序有效性。消毒剂选择包含：

a.必需接触时间评定

b.消除微生物种类

c.有效性确实定

d.待处理表面类型

e.毒性

f.残留

g.使用方法对已建立清洁和卫生程序进行验证应证实微生物降低。其目标是为了证实经培训清洁人员执行日常卫生程序能够确保所使用区域微生物控制是符合使用要求。采取环境监测过程中取得分离菌，对所选择清洁剂和消毒剂进行挑战试验是可靠方法。8无菌产品动态环境监测拜耳制药第8页3.2

取样点选择取样主要目标是为了提供有意义数据，这些数据能够帮助确定当前或潜在污染，相关a)特殊操作；b)设备；c)物料；d)加工过程污染问题。应从最有可能造成产品污染位置取样；然而，应慎重确定取样点位置是靠近，但不是接触产品。9无菌产品动态环境监测拜耳制药第9页日常监测选择取样点应考虑原因：a.在这些取样点，是否微生物污染最可能对产品质量有不利影响？b.实际生产过程中，哪些位置是最利于微生物增殖？c.一些日常监测点是否应轮换？d.哪些位置能代表最难以靠近或清洁/消毒区域？f.区域中哪些操作造成污染扩散？g.在指定位置取样是否严重干扰环境，造成搜集了错误数据或污染产品？取样是否仅在一班最终进行？10无菌产品动态环境监测拜耳制药第10页11无菌产品动态环境监测拜耳制药第11页3.3

取样频率单一取样方案不适合于全部环境。选择监测频率关键是能够确定潜在系统缺点。每个点检验频率能够少于系统或区域检验频率。在各种情况下，批生产时进行监测能够满足常规区域监测要求。12无菌产品动态环境监测拜耳制药第12页3.4警报和行动水平普通，行动水平必须符合官方或行业指南，警报水平可依据环境监测数据历史分析制订。一旦建立了警报和/或行动水平，应作为日常趋势分析一部分定时进行回顾。警报和行动水平不是产品规格扩充，但可作为确定改变标志，所以能够在产品质量受到不良影响前采取纠正办法。并非全部情况都需要使用警报和行动水平。普通，严格控制环境中污染不是在正态分布范围内。13无菌产品动态环境监测拜耳制药第13页3.5数据管理数据搜集：日常数据以统一统计格式聚集到指定数据库中。数据分析：14无菌产品动态环境监测拜耳制药第14页数据整理：

应对监测数据进行总结和评定，以确定生产环境是否处于受控状态。

统计学方法是进行评定一个方法。

对于数据显著波动或菌群改变所产生影响分析，应基于有资质人所作出判断。

评定过程应考虑情况：a)出现高于普通值数值时，可能预示工艺规格不再适当。可能需回顾工艺参数。b)几个连续点或偏离可看作是一组，假如高于警报水平，表示需进行调查。c)数值显著波动或跳跃也是很主要，重复出现可能显示出周期性改变。d)一个或一个以上数据显著高于或低于大多数数据时，能够计算在内或不计算在内。15无菌产品动态环境监测拜耳制药第15页3.6分离菌检定检定环境和人员监测中取得微生物是监测程序主要部分。最初，检定许多分离菌可建立一个区域中所发觉微生物数据库。一旦数据库建立，日常检定应继续进行以确定分离菌是正常菌群一部分或是其它不一样微生物。分离菌检定也可用于环境调查，比如阳性无菌检验结果，阳性培养基灌封结果，警报和行动水平偏移，或引入一个可给出耐清洁剂信号普通生物体。菌群改变或系统中出现一个以前未检测到菌时，应进行调查。检定可为分离菌起源提供有用线索。比如，金黄色葡萄球菌通常在皮肤上发觉，铜绿假单胞菌经常与水相关。16无菌产品动态环境监测拜耳制药第16页3.7调查/纠正办法当偏移发生时，可能会与基准线有偏差。应进行调查以确定发生何种偏差以及采取何种办法来预防这类偏差再次发生。统计应显示偏差已确认而且采取了适当办法。当超出警报或行动水平时，可采取以下办法：a.通知相关管理者。 －开始调查，以确定偏离指定操作参数原因和结果。b.执行纠正办法，着手处理问题。c.回顾后续行动以评定纠正办法有效性。17无菌产品动态环境监测拜耳制药第17页18无菌产品动态环境监测拜耳制药第18页3.8文件文件统计中应考虑项目：

a)检验日期和时间b)检验方法/参考程序c)检验行动水平d)判别仪器e)位置f)区域分类g)平面图显示取样点h)取样点（关键点或非关键点）I)检验结果j)结果评定k)显示数据结果l)警报和或行动水平m)温度和培养时间n)查对检验结果o)汇报日期，同意日期，以及所使用培养基失效期。p)污染检定q)回顾者姓名r)汇报日期s)历史数据回顾t)变更控制系统u)所使用仪器校准日期v)确定行动或警报水平分析方法w)统计调查/纠正办法文件系统：1.缺点描述2.可能原因3.纠正办法相关责任人确实定4.行动步骤描述以及执行进度表5.行动有效性评定19无菌产品动态环境监测拜耳制药第19页4.监测系统4.1.1

最终灭菌最终灭菌环境控制程序与影响灭菌前产品生物负载和内毒素含量微生物菌群相关。

包含蒸馏水、灭菌冷却水、精制水、自来水、空气、表面、容器和盖子微生物程度。此程序最关键部分是已灌装待灭菌产品生物负载。这部分确保灭菌过程中出现芽孢（耐热）生物负载程度不超出经验证灭菌能力，而且到达期望灭菌水平。4.1.2无菌灌装监测取样点数量和频率通常大于已建立最终灭菌过程监测点数量和频率。灌装间内空气、水、人员、压缩空气、地面、墙壁、设备、表面。有效环境控制是无菌制剂生产过程一部分，是确保无菌关键原因。无菌灌装产品生产文件中应包含日常环境监测数据回顾。20无菌产品动态环境监测拜耳制药第20页洁净蒸汽检测频率：每个月一次

检测项目 程度内毒素 警报水平：=>0.12EU/ml；行动水平：>0.25EU/ml微粒数 光阻法（HIAC）:=>10微米max.500个/100ml =>25微米max.20个/100ml

微滤法（MF）: =>25微米max.100个/100ml =>50微米max.10个/100ml

金属微粒=>100微米

max.1/100ml化学性质 必须符合药典中注射用水要求。

21无菌产品动态环境监测拜耳制药第21页氮气检测频率：每个月一次

检测项目 程度

微生物数量 警报水平：10cfu/m3；行动水平：100cfu/m3

压缩空气

检验频率：每个月一次

检测项目 程度

微生物数量 警报水平：10cfu/m3；行动水平：100cfu/m3

22无菌产品动态环境监测拜耳制药第22页高压灭菌锅中水检验频率：微生物计数：每七天一次；内毒素：每两周一次；电导率：连续检测

检测项目 程度微生物数量 警报水平：5cfu/100ml；行动水平：10cfu/100ml

不得检出大肠杆菌、大肠菌群和铜绿假单胞菌内毒素 警报水平：0.12EU/ml；行动水平：0.25EU/ml电导率 max.15microS/cm

23无菌产品动态环境监测拜耳制药第23页4.2水监测水中微生物数量控制对于药品生产厂非常主要，因为水可用于制剂产品以及各种清洗和冲洗程序。水起源或供给应满足饮用水标准要求。这些要求确保水中无大肠菌群。假如使用点水使用前是循环，搜集同一循环中样品是适当。假如生产过程需要使用水管，那么取经过水管，而不是直接起源于水龙头样品。取样后马上进行微生物检验。假如不能马上进行检验，试验室收到样品后应在2-8°C条件下冷藏样品。取样和检验之间时间间隔通常不超出二十四小时。24无菌产品动态环境监测拜耳制药第24页纯化水

检测项目 程度

微生物数量 警报水平：50cfu/ml；行动水平：100cfu/ml

不得检出大肠杆菌、大肠菌群和铜绿假单胞菌

内毒素 警报水平：0.12EU/ml；行动水平：0.25EU/ml

电导率 警报水平：1.0microS/cm；行动水平：1.5microS/cm(连续)TOC 警报水平：250ppb；行动水平：500ppb(连续)

25无菌产品动态环境监测拜耳制药第25页注射用水检测频率：天天；微粒：每个月

检测项目 程度 微生物数量 警报水平：5cfu/100ml；行动水平：10cfu/100ml

不得检出大肠杆菌、大肠菌群和铜绿假单胞菌内毒素 警报水平：0.12EU/ml；行动水平：0.25EU/ml电导率 警报水平：1.0microS/cm；行动水平：1.5microS/cm(连续)TOC 警报水平：250ppb；行动水平：500ppb微粒 光阻法（HIAC）:=>10微米max.500个/100ml =>25微米max.20个/100ml

微滤法（MF）:=>25微米max.100个/100ml =>50微米max.10个/100ml

金属微粒=>100微米max.1/100ml

26无菌产品动态环境监测拜耳制药第26页4.3压缩空气监测应考虑以下几点：a)用于密封或保护无菌贮罐中产品压缩空气应经过疏水通风过滤器，并按一定频率进行监测，以确保过滤器能有效过滤细菌。b)用于无菌环境压缩气体/空气应采取无菌级过滤器过滤，并按一定频率进行检验，以确保气体/空气对环境无不良影响。c)全部不影响操作间中空气压缩气体可按较少频率进行监测。27无菌产品动态环境监测拜耳制药第27页4.4空气监测环境监测程序应包含有活性和无活性空气中悬浮微粒日常监测。起源于人体活菌与皮肤脱落物相关，所以无活性微粒数量高可能指示活性数量增加。人是环境中活性和无活性微粒主要起源。除满足法规中要求动态监测之外，静态监测也可能是必需。28无菌产品动态环境监测拜耳制药第28页4.4.1无活性微粒监测生产过程中有暴露过程产品，应证实环境中潜在污染是受控。0.5um或更大微粒通常作为环境污染指标。对5.0um微粒监测也可包含在内。通常使用监测方法是目视微粒计数。此方法原理是使带有悬浮粒子气体经过一个聚焦光源，使得光线在单个微粒表面发生散射。微粒尺寸和数量可同时测量。除便携式微粒计数器外，已研制出监测系统可永久安装在生产区域，连续监测生产过程，并有集中数据存放和报警功效。29无菌产品动态环境监测拜耳制药第29页4.4.2活性微粒监测空气中微生物通常与固体或液体微粒相关。生物体可能粘附尘粒或其它小载体，假如没有附着，也存在自由流动微粒悬浮在空气中。4.4.2.1监测点监测位置：在灌装/密封过程中，距离操作点不超出1英尺，而且在气流上游。除最初验证/确认时环境、人流和生产过程取样点之外，应选择其它监测位置。4.4.2.2

方法环境中主动气体取样是为了证实可能存在活性悬浮微粒是受控。个别国家要求使用平皿暴露法和主动空气取样法。空气中悬浮微粒监测程序可能要求使用主动和被动空气取样两种方法。30无菌产品动态环境监测拜耳制药第30页4.4.2.3设备表面空气取样器（SurfaceAirSampler）

SAS取样器工作原理：空气经过涡轮被吸入装置中，被吸在一个培养基平板表面。优点：轻便灵活独立电源带孔盖板可蒸汽灭菌可测量大量空气使用标准培养基板可测量气流

Slit-to-Agar(STA)空气取样器 在距裂缝口准确位置处，使用一可旋转琼脂平板，气体样品直接撞击固体营养培养基表面。优点：可测量大量气体可利用时间-浓度关系可使用微量取样探针可用于压缩气体取样缺点：设备大而不便有些设备不能蒸汽灭菌31无菌产品动态环境监测拜耳制药第31页离心取样器

工作原理：空气经过涡轮被吸入装置中，微粒因为地心引力而沉积在固体营养采集培养基（带状）表面。优点：轻便灵活独立电源搜集顶部可蒸汽灭菌可测量大量空气可测量气流缺点：培养带起源单一表面真空取样器

取样器使用不锈钢容器，填充有营养培养基培养皿置于容器中。利用真空系统将空气样品（和微粒）吸在培养平板表面。优点：整个取样部分可蒸汽灭菌可用于压缩气体取样可遥控放置可测量气流可取样大量气体缺点：设备有些粗笨（带有真空系统）32无菌产品动态环境监测拜耳制药第32页液体气雾捕集法

此种方法是使空气经过一个管子，管子出口在液体搜集培养基液面下。优点：可选择培养基，比如磷酸盐缓冲液(PBS)或培养基（培养基中可能需加防沫剂）有生长力细胞在液体培养基中更易存活价格廉价缺点：

样品处理可能会引发污染过滤法

此方法使用空气取样器，取样器采取真空系统将空气吸过一个过滤器，使得颗粒聚集在过滤器上。无菌转移此过滤器，并在适当营养培养基上进行培养。优点：可测量大量气体过滤器培养基和可用孔径选择广泛可测量气流缺点：搜集样品膜必须放置在营养培养基上33无菌产品动态环境监测拜耳制药第33页平皿放置法

此方法使用有固体营养培养基细菌培养皿，细菌培养皿直接暴露在环境中。

空气中微粒沉积在琼脂表面，培养后可直接计数。优点：使用简便经济实际上任何培养基都可使用可沿着灌装线放置可连续监测，经过更换培养皿延长监测时间不需要提供能量缺点：微生物数量与空气体积无关。沉积微粒受微粒大小、温度和经过其表面气流/空气量影响。假如暴露时间太长，平皿会变干。34无菌产品动态环境监测拜耳制药第34页空气中微生物监测平皿放置法：频率和程度cfu/25cm2微生物数量级别需氧菌霉菌和酵母菌厌氧菌警报水平行动水平A.无菌灌装： 最少每季度4h最少每年4h0 0 -每一灌装前准备工作最少30' -每一无菌连接操作最少30' -整个灌装期间(max.4h/平皿) -灌装后

最终灭菌产品:

灌装过程中最少天天4小时B.无菌灌装 最少每季度4h最少每年4h1 5 -整个灌装期间(max.4h/平皿) -灌装后

最终灭菌产品:

灌装过程中最少天天4小时C.最少每七天4h 最少每季度4h最少每年4h950D最少每个月4h 最少每季度4h 最少每年4h10100E.最少每个月1h

最少每季度1h 最少每年1h13 100

35无菌产品动态环境监测拜耳制药第35页4.4.3表面监测所使用培养基类型可能影响取样点代表菌群检测。培养基中可加入中和剂，使得经过化学消毒剂处理表面钝化。1.接触平板法

通常使用接触平板是因为其使用方便，并可提供定量结果。

普通平板直径是50mm，而且是经填充，所以培养基形成半球型。

培养基表面可被压成一个平坦表面，因而采样面积大约25cm²。

然后培养皿按照要求培养时间放置在培养箱中。缺点：不适合用于不规则表面假如培养基是湿，可能发生微生物聚集培养基残留物必须从取样点移走36无菌产品动态环境监测拜耳制药第36页2.擦拭法

此方法适合用于无法使用接触平板设备和不规则表面。

擦拭物类型包含棉花、达克龙(聚酯纤维)和藻酸钙。藻酸钙纤维能够溶化，所以可将全部搜集微生物释放到溶液中。缺点：方法和取样可能影响结果需经处理才能培养样品3.表面冲洗法

此方法最适合用于需确定内表面生物负载大表面积区域。

无菌水是惯用用于冲洗内表面液体；然后可经过膜过滤法搜集和检验。缺点：多数设备不适用需大量操作方法和取样过程可能影响结果37无菌产品动态环境监测拜耳制药第37页表面微生物监测频率和程度cfu/25cm2微生物数量级别需氧菌霉菌和酵母菌厌氧菌警报水平

行动水平A.无菌灌装最少每季度一次最少每年一次0 0-每一灌装前准备工作-每一无菌连接操作 -最少每班一次 -灌装后

最终灭菌产品：

最少每七天一次

闲置A级洁净区域:

最少每七天一次B.无菌灌装 最少每季度一次最少每年一次15 -最少每班一次 -灌装后

最终灭菌产品：

最少每七天一次

闲置B级无菌室:

最少每七天一次C.最少每七天一次

最少每季度一次最少每年一次 525D.最少每个月一次

最少每季度一次最少每年一次 550

38无菌产品动态环境监测拜耳制药第38页主动取样频率和程度(RCS) 微生物数量级别需氧菌霉菌和酵母菌厌氧菌警报水平行动水平A.无菌灌装最少每季度一次最少每年一次0 0-最少每班一次最终灭菌产品：最少每七天一次闲置无菌室-最少每七天一次

B.无菌灌装最少每季度一次最少每年一次<510最少每班一次最终灭菌产品：-最少每七天一次闲置无菌室-最少每七天一次C.最少每七天一次最少每季度一次最少每年一次30100

D.最少每个月一次最少每季度一次最少每年一次20200

E.最少每个月一次

最少每季度一次最少每年一次220500

39无菌产品动态环境监测拜耳制药第39页4.5人员监测人是无菌环境中污染主要起源。培训/任职资格培训/任职资格包含以下几方面a.

人员卫生/习惯1.头发、皮肤、手指甲和衣服清洁2.无化装品、指甲油、修剪手指甲、指甲胶、口香糖、糖果3.不允许吃东西、喝水、咀嚼口香糖或吸烟b.

疾病1.汇报全部感冒、流感、传染病、伤口、晒伤2.汇报全部疾病或慢性皮肤病c.着装1.工厂或洁净区专用统一洁净服2.不佩带手表或珠宝3.保护性衣服d.

微生物介绍1.微生物种类普通起源e.

无菌技术介绍f.

更衣程序1.人员更衣程序是经证实适当（比如，未增加污染）。2.除前额、面罩、颈部、头后部、衣服拉练、手臂、手指日常监测点外，更衣程序还可包含其它取样点。3.日常监测可包含洁净服两前臂和两手手指取样。全部侧面可能也需要进行评定。40无菌产品动态环境监测拜耳制药第40页再培训a.更衣证书假如来自洁净服或手指涂抹样品超出警报/行动水平，应在进入经同意无菌区域时，对员工进行相关程序再培训并再次证实合格。b.日常监测假如来自洁净服或手指涂抹样品超出行动水平，可能需要对员工进行相关程序再培训或再次取样。假如出现超出警报/行动水平趋势，应考虑将该员工指派在无菌区域外担任新职责。全部在无菌环境中工作员工都应接收再培训并再次证实合格。全部与无菌生产相关员工应最少每年参加一次模拟生产测试（培养基灌装）。41无菌产品动态环境监测拜耳制药第41页无菌室人员检验频率：

无菌灌装每班和全部相关人员，包含维修人员最终灭菌产品最少每七天每班1位员工

监测点 程度

微生物数量ClassA:警报水平:0cfu/25cm2;行动水平:0cfu/25cm2 ClassB:警报水平:1cfu/25cm2;行动水平:5cfu/25cm2

不得检出杆菌，革兰氏阴性菌，霉菌和酵母菌42无菌产品动态环境监测拜耳制药第42页43无菌产品动态环境监测拜耳制药第43页4.6产品或组分生物负载非无菌产品进行生物负载检验以确定其微生物总量。仅生物负载量不能提供足够信息。可能需要评定生物负载耐热性或D值。假如生物负载耐热性超出了灭菌方法所能到达程度，即使是在程度内总生物负载量也可能引发重大问题。44无菌产品动态环境监测拜耳制药第44页45无菌产品动态环境监测拜耳制药第45页谢谢!46无菌产品动态环境监测拜耳制药第46页EnvironmentalMonitoring

–apracticalapproachDr.BerndKalkertSep.2nd,

2024/7/1947Environmentalmonitoring无菌产品动态环境监测拜耳制药第47页1.IntroductionThepurposeofthisdocumentistoidentifymicrobiologicalandparticulatecontrolconceptsandprinciplesastheyrelatetothemanufactureofsterilepharmaceuticalproducts.Theconceptsforsterileproductmanufacturingarethemoststringentapplication,buttheseconceptscanalsobeappliedtonon-sterileproductmanufacture.Thefocusisenvironmentmonitoringasitrelatestofacilitycontrolandcompliance.Thiswascompiledtoaidinsettingupaprogramthatismeaningful,manageable,anddefendable.

48无菌产品动态环境监测拜耳制药第48页Inordertoensureaconsistentlyacceptableproductionenvironment,acomprehensiveenvironmentalcontrolprogramshouldbesupportedby:a.soundfacilitydesignandmaintenanceb.documentationsystemsc.validated/qualifiedsanitization/disinfectionproceduresd.reliableprocesscontrolse.goodhousekeepingpracticesf.effectiveareaaccesscontrolsg.effectivetraining,certification/qualificationandevaluationprogramsh.qualityassuranceofmaterialsandequipmentEnvironmentalsurveillanceisatoolutilizedtoevaluatetheeffectofcontrolsonthemanufacturingenvironment.Aprocesstoassessthecleanroomandothercontrolledenvironmentsofapharmaceuticalfacilitycanserveasanadjuncttothesterilityassuranceprogram.

49无菌产品动态环境监测拜耳制药第49页2.EnvironmentalclassificationTheenvironmentalmonitoringprogramshouldbedesignedandimplementedbasedonsoundscientificprinciplesandinconformancewiththeregulatoryrequirementsofthegovernmentagenciesregulatingthemanufacturingsite.Iftheintentistoserveinternationalmarketsthemoststringentrequirementsshouldbeevaluatedasthebasisofanenvironmentalmonitoringprogram.50无菌产品动态环境监测拜耳制药第50页51无菌产品动态环境监测拜耳制药第51页52无菌产品动态环境监测拜耳制药第52页53无菌产品动态环境监测拜耳制药第53页3.SurveillancesupportThepersonnelsupervisingtheenvironmentalmonitoringprogramshouldbecompetentinthescientificdisciplineandhaveappropriatetrainingandauthority.Equipmentusedshouldbecalibrated,systemsshouldbeappropriatelyvalidated,mediashouldbeproperlyprepared,andalloperationalproceduresshouldbewrittenandfollowed.54无菌产品动态环境监测拜耳制药第54页3.1Cleaning&sanitization/disinfectionImplementationofcleaningandsanitizationproceduresisacriticalcomponentofoverallfacilitycontrol.Environmentalmonitoringdataareusedindeterminingtheeffectivenessoftheseprocedures.Selectionofsanitizersmayinclude:a.evaluationofrequiredcontacttimeb.typeofmicroorganismsthataretobeeliminatedc.confirmationofefficacyd.typeofsurfacetobetreatede.toxicityf.residueg.meansofapplicationValidationofestablishedcleaningandsanitizationproceduresshoulddemonstratemicrobialreduction.Thegoalistodemonstratethatroutinesanitizationprocedures,performedbytrainedcleaningpersonnel,consistentlyresultinalevelomicrobialcontrolsuitablefortheintendeduseofthearea.Itisasoundpracticetoperformchallengetestingoftheselectedsanitizers/disinfectantswithisolatedroutinelyrecoveredbytheenvironmentalmonitoringprogram.55无菌产品动态环境监测拜耳制药第55页3.2

SamplesiteselectionTheprimarypurposeofsamplingshouldbetoprovidemeaningfuldatathatcanhelpidentifyactualorpotentialcontaminationproblemsassociatedwitha)specificprocedures;b)equipment;c)materials;d)processes.Oneshouldbeabletosamplethosesitesmostlikelytoresultinproductcontaminationiftheybecomecontaminated;however,itmaybeprudenttoidentifyindicatorsitesthatarenear,butnotincontactwithproduct.56无菌产品动态环境监测拜耳制药第56页Factorstoconsiderinselectingsitesforroutinesurveillanceare:a.Atwhichsiteswouldmicrobialcontaminationmostlikelyhaveanadverseeffectonproductquality?b.Whatsiteswouldmostlikelydemonstrateheaviestmicrobialproliferationduringactualproduction?c.shouldsomesitesforroutinemonitoringberotated?d.whatsiteswouldrepresentthemostinaccessibleordifficultareastoclean,sanitize,ordisinfect?f.Whatactivitiesintheareacontributetothespreadofcontamination?g.Wouldtheactofsamplingatagivensitedisturbtheenvironmentsufficientlytocauseerroneousdatatobecollectedorcontaminateproduct?Shouldsamplingonlybeperformedattheendoftheshift?57无菌产品动态环境监测拜耳制药第57页58无菌产品动态环境监测拜耳制药第58页3.3

SamplingfrequencyNosinglesamplingschemeisappropriateforallenvironments.Thekeyistoselectmonitoringfrequenciesthatcanidentifypotentialsystemdeficiencies.Thetestfrequencypersitemaybelessfrequentthanthesystemorareafrequency.Inmanycases,monitoringperformedinconjunctionwithbatchproductionmayfulfilltherequirementsforroutineareamonitoring.59无菌产品动态环境监测拜耳制药第59页3.4

AlertandactionlevelsTypically,theactionlevelswillbedrivenbytheregulatoryorindustryguidelineswhilethealertlevelsmaybedrivenbyhistoricalanalysisoftheenvironmentalmonitoringdata.Oncealertand/oractionlevelshavebeenestablished,theyshouldbeperiodicallyreviewedaspartofroutinetrendanalysis.Theyarenotextensionsofproductspecifications,butareintendedtoflagchangessothatcorrectiveactionmaybetakenbeforeproductqualityisadverselyaffected.Notallsituationsrequireuseofbothalertandactionlevels.Typically,contaminationinstrictlycontrolledenvironmentsdoesnotfallwithinanormaldistribution.60无菌产品动态环境监测拜耳制药第60页3.5

DatamanagementDatacollection:routinedatamaybepooledintoadesignateddatabaseinaconsistentrecordformat.Dataanalysis:61无菌产品动态环境监测拜耳制药第61页Datainterpretation:Datageneratedshouldbesummarizedandevaluatedtodeterminewhethertheproductionenvironmentisinastateofcontrol.Statisticalprocesscontrolisonemethodofperformingthisevaluation.Interpretationoftheimpactofasignificantfluctuationincountsorachangeinflorashouldbebasedontheexperiencedjudgementofaqualifiedperson.Considerationsforassessingprocessstateofcontrol:a)Highervaluesthanthosecurrentlyimposedmaybeindicativeofaprocessspecificationthatisnolongerappropriate.Areviewoftheprocessmaybeneeded.b)Severalconsecutivepointsordriftsmaybeconsideredtobeapatternorclusterformationthat,ifabovethealertlevel,signalsatrendthatrequiresaninvestigation.c)Significantfluctuationsorjumpsinthevaluesfortheprocessarealsosignificantwhererecurringcyclesmaypointtoseasonalvariations.d)Oneormorevaluesmarkedlyhigherorlowerthanthemajorityofthedatamayormaynotbeprocessoutliers.62无菌产品动态环境监测拜耳制药第62页3.6

CharacterizationofisolatesCharacterizingmicroorganismsrecoveredfromenvironmentalandpersonnelmonitoringisanimportantpartofsurveillanceprograms.Initially,manyisolatesmaybecharacterizedtoestablishadatabaseofthemicroorganismsfoundintheareaOnceadatabaseisestablished,routinecharacterizationshouldcontinuetodeterminewhetherisolatesarepartofthenormalmicrobialfloraorrepresentsomethingdifferent.Characterizationofisolatesalsomaybeusefulininvestigatingsituationssuchaspositivesterilitytestresults,positivemediafillresults,alertandactionlevelexcursions,orintroductionofacommonorganismthatmaysignaladevelopingresistancetoasanitizingagent.Achangeinthemicrobialfloraortheintroductionofapreviouslyundetectedspeciesmightsignifyachangeinasystemthatshouldbeinvestigated.Characterizationcanbeusefulcluesastothepossiblesourceofisolates.Forexample,StaphylococcusspeciesarecommonlyfoundonskinandtheformerPseudomonasspeciesareusuallyassociatedwithwater.63无菌产品动态环境监测拜耳制药第63页3.7

Investigations/correctiveactions

Whenexcursionsoccur,theremaybeadriftfromthebaseline.Aninvestigationisneededtodeterminewhathappenedandwhatshouldbedonetopreventarecurrence.Recordsshouldshowthattheexcursionswererecognizedandappropriatefollow-upoccurred.Whenanalert/actionlevelisexceeded,thefollowingactionsmaybeappropriate.a.Notifytheappropriatemanagement.-Initiateaninvestigationtodeterminethecausesandconsequencesoftheexcursionfromthespecifiedoperatingparameters.b.Performcorrectiveactionstoaddresstheproblemasneeded.c.Follow-upreviewtoassesseffectivenessofcorrectiveaction.64无菌产品动态环境监测拜耳制药第64页65无菌产品动态环境监测拜耳制药第65页3.8

DocumentationItemstobeconsideredfordocumentationrecords:a)Dateandtimeoftestb)Testmethod/procedurereferencec)Activitylevelatsiteduringtestd)Equipmentidentificatione)Locationf)Areaclassificationg)Schematicsofareasshowingsamplesitelocationsh)Samplesite(criticalornon-critical)I)Testresultsj)Evaluatorofresultsk)Dateresultsreadl)Alertand/oractionlevelm)Temperatureanddurationofincubationn)Controltestresultso)Certificationdate,validationdate,andexpirationdateofmediausedp)Characterizationofcontaminantsq)Nameofreviewerr)Reportingofdatas)Reviewofhistoricaldatat)Changecontrolsystemu)Calibrationdateoninstrumentationv)Methodology,analysisusedtospecifyaction/alertlevelsw)Systemfordocumentinginvestigative/correctiveaction:1.Descriptionofdeficiency2.Possiblecause(s)ofproblem3.Identificationofpersonsresponsibleforrelevantcorrectiveaction4.Descriptionofactionstepsandtheirscheduleforimplementation5.Evaluationofeffectivenessofactionsteps66无菌产品动态环境监测拜耳制药第66页4.SystemSurveillance4.1.1

TerminalSterilizationTheterminalsterilizationenvironmentalcontrolprogramisconcernedwithmicrobialflorathatcontributestothebioburdenandendotoxincontentoftheproductpriortosterilization.Thisincludesdistilledwater,sterilizercoolingwater,treatedwater,citywater,air,surfaces,microbiallevelsofcontainersandclosures.Themostcriticalaspectoftheprogramisthebioburdenofthefilledproducttobesterilized.Thisaspectensuresthatthespore(heatresistant)bioburdenlevelspresentedtotheproductsterilizationcycledonotexceedthevalidatedcapabilitiesoftheprocessandthatthedesiredsterilityassurancelevelsareachieved.4.1.2

AsepticfillingThenumberofsamplesitesandfrequencyofmonitoringaregenerallygreaterthanthatmonitoredforestablishedterminalsterilizationprocesses.Air,water,personnel,compressedgases,floors,walls,machinery,surfaceswithinthefillingroom.Adequateenvironmentalcontrolisanintegralpartoftheasepticmanufacturingprocessandacriticalfactorincontributingtosterilityassurance.Areviewoftheroutineenvironmentalcontroldatashouldbeincludedinthemanufacturingdocumentationforasepticallyfilledproducts.67无菌产品动态环境监测拜耳制药第67页PureSteamFrequencyoftesting:1xpermonth

Testingpoints LimitsEndotoxins Alertlevel:=>0.12EU/ml;actionlevel:>0.25EU/mlParticles HIAC: =>10micronmax.500particles/100ml =>25micronmax.20particles/100ml MF: =>25micronmax.100particles/100ml =>50micronmax.10particles/100ml Metalparticles=>100micronmax.1/100mlChemicals mustmeetrequirementsofPharmacopoeaforWFI

68无菌产品动态环境监测拜耳制药第68页NitrogenFrequencyoftesting:1xpermonth

Testingpoints Limits

Microbiological Alertlevel:10cfu/m3;actionlevel:100cfu/m3

Compressedair

Frequencyoftesting:1xpermonth

Testingpoints Limits

Microbiological Alertlevel:10cfu/m3;actionlevel:100cfu/m3

69无菌产品动态环境监测拜耳制药第69页WaterinautoclaveFrequencyoftesting:Microbialcount1xperweek;endotoxinsevery2weeks;conductivitycontinuously

Testingpoints Limits

Microbialcount Alertlevel:5cfu/100ml;actionlevel:10cfu/100ml AbsenceofE.coli,coliformsandP.aeruginosa

Endotoxins Alertlevel:0.12EU/ml;actionlevel:0.25EU/ml

Conductivity max.15microS/cm

70无菌产品动态环境监测拜耳制药第70页4.2

WatermonitoringControlofthemicrobialqualityofwaterisofgreatimportanceinthepharmaceuticalmanufacturingfacilitysinceitmaybeusedforformulatingproduct,aswellasforvariouswashingandrinsingprocesses.Thesourceorfeedwatershouldmeettherequirementsofdrinkingwaterstandard.Theserequirementsensuretheabsenceofcoliforms.Ifusepointsareroutinelyflushedpriortouse,itisappropriateforsamplestobecollectedwiththesameflushcycle.Samplethroughhosesandnotdirectlyfromthetapifmanufacturingpracticesrequiretheuseofhoses.Startmicrobiologicalexaminationofwaterpromptlyaftercollection.Ifimmediateprocessingisnotpossible,refrigeratesamplesat2-8°Cuponreceiptinthelaboratory.Timeelapsingbetweencollectionandexaminationgenerallyshouldnotexceed24hours.71无菌产品动态环境监测拜耳制药第71页Purifiedwater

Testingpoints Limits

Microbialcount Alertlevel:50cfu/ml;actionlevel:100cfu/ml AbsenceofE.coli,coliformsandP.aeruginosa

Endotoxins Alertlevel:0.12EU/ml;actionlevel:0.25EU/ml

Conductivity Alertlevel:1.0microS/cm;actionlevel:1.5microS/cm(continuously)TOC Alertlevel:250ppb;actionlevel:500ppb(continuously)

72无菌产品动态环境监测拜耳制药第72页WaterforinjectionsFrequencyoftesting:daily;particlesmonthly

Testingpoints Limits

Microbialcount Alertlevel:5cfu/100ml;actionlevel:10cfu/100ml AbsenceofE.coli,coliformsandP.aeruginosa

Endotoxins Alertlevel:0.12EU/ml;actionlevel:0.25EU/ml

Conductivity Alertlevel:1.0microS/cm;actionlevel:1.5microS/cm(continuously)

TOC Alertlevel:250ppb;actionlevel:500ppb

Particles HIAC: =>10micronmax.500particles/100ml =>25micronmax.20particles/100ml MF: =>25micronmax.100particles/100ml =>50micronmax.10particles/100ml Metalparticles=>100micronmax.1/100ml

73无菌产品动态环境监测拜耳制药第73页4.3

CompressedgasmonitoringThefollowingpointsshouldbeconsidered:a)Compressedgasesusedtopressurizeorblanketproductinsterileholdingtanksshouldbeintroducedviahydrophobicventfiltersandmonitoredatafrequencythatassuresthatthegasdoesnotchallengethebacterialretentionofthefilter.b)Compressedair/gasthatisusedasepticenvironmentsshouldbefilteredthroughsterilizing-gradefiltersandtestedonafrequencythatassuresthattheair/gasdoesnotadverselyeffecttheenvironment.c)Allcompressedairconnectionswhichdonotaffecttheairtotheworkspaceshouldbemonitoredwithlessfrequency.74无菌产品动态环境监测拜耳制药第74页4.4

Airmonitoring

Environmentalmonitoringprogramshouldincl