动物细胞培养和核移植技术专家讲座

知识回顾植物细胞工程植物细胞工程技术植物细胞工程应用植物组织培养植物体细胞杂交植物繁殖新途径作物新品种培育细胞产物工厂化生产动物细胞培养和核移植技术第1页动物细胞工程动物细胞培养和核移植技术第2页动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体技术核移植动物细胞工程惯用技术动物细胞培养和核移植技术第3页动物细胞工程纵览动物细胞培养和核移植技术第4页４月７日下午，

12岁四川简阳少年小林放

学路上捡了些鞭炮，并把里

面火药抖出来，蹲在地上

将其点燃，造成面部、四肢

不幸被严重烧伤并感染，在

当地医院治疗半月后，于4月

22日转入武警四川消防总队

医院烧伤整形科。为了挽救儿子生命，小林父亲、妈妈向医生哀求：“割我们皮给儿子吧！”烧伤整形科主任魏平经不起这份

亲情重托，最终“妥协”了：同意进行这种国内

极其罕见亲体皮肤移植手术。.细胞培养图阅读资料儿子捡鞭炮严重烧伤感染，父割千块皮肤动物细胞培养和核移植技术第5页主刀魏平主任把李小明整个右侧大腿皮全部被剥下并用纱布紧紧包裹。为了完全覆盖孩子身体上被深度烧伤并发生感染创面，医生决定把取自父子俩皮肤全部剪成指甲盖大小小皮块，儿子剪成正方形，父亲剪成三角形，往需要植皮创面上放时，儿子和父亲皮相隔相嵌。盛满亲情和父爱上千块小小三角形、正方形皮肤一点点地铺在了被火烧得惨不忍睹儿子躯干上。12时许，植皮手术成功完成。预计父亲皮肤最少能在其儿子身上存活

六个月甚至更长时间，这就给儿子本身皮肤

生长带来生机，孩子痊愈指日可待。阅读资料儿子捡鞭炮严重烧伤感染，父割千块皮肤动物细胞培养和核移植技术第6页思索一下！1、小林在皮肤烧伤之后，很轻易得病，为何？2、皮肤在我们人体当中是第几道防线，其它几道防线是什么？3、选取植皮时，理论上选择谁皮肤最好？为何？4、本身健康皮肤是有限，能不能经过其它路径取得本身皮肤？动物细胞培养和核移植技术第7页.试说大致过程为什么要把组织剪碎、用酶分解开？用什么酶？为何？用胃蛋白酶行不行？这两种酶会不会

把细胞消化掉？（教材P44问题）为何要再分装？原代培养、传代培养？次数？培养得到细胞，假如暂

时不用时，怎么保留？2动物细胞培养过程阅读P44页回答下列问题动物细胞培养和核移植技术第8页胰蛋白酶胶原蛋白酶.培养条件动物组织分散成

单个细胞细胞悬液培养胰蛋白酶胶原蛋白酶原理：细胞增殖（有丝分裂）结果：细胞群，细胞产物原代培养传代培养动物细胞培养过程胚胎细胞或刚出生很快动物组织动物细胞培养和核移植技术第9页动物细胞培养和核移植技术第10页相互接触接触抑制单层胰蛋白酶衰老或死亡不死性降低降低动物细胞培养和核移植技术第11页活细胞膜含有选择透过性，大分子染料不能进入细胞，故不染色。中低温新陈代谢酶抗原动物细胞培养和核移植技术第12页.动物细胞培养归纳动物细胞培养：从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜培养基中，让这些细胞生长和繁殖。回答以下问题：1、培养基普通采取液体培养基还是固体培养基？2、植物组织培养需不需要把组织分散成单个细胞？3、植物组织培养结果是什么？4、动物细胞培养需不需要把组织分散成单个细胞？5、动物细胞培养结果是什么？动物细胞培养和核移植技术第13页1、无菌、无毒消毒、灭菌抗生素定时更换培养液（去除代谢废物）2、营养合成培养基：糖、氨基酸、生长因子、无机盐、微量元素

（血清、血浆）3、温度和pH36.5±0.5℃，7.2---7.44、气体95%空气，5%CO2.植物组织培养条件；应用培养条件动物细胞培养和核移植技术第14页第二课时世间自有公道付出才有回报动物细胞培养和核移植技术第15页无菌、无毒消毒、灭菌、抗生素、定时更换培养液（去除代谢废物）营养合成培养基（血清、血浆）温度和pH36.5±0.5℃，7.2---7.4气体95%空气，5%CO2知识回顾动物组织分散成

单个细胞细胞悬液培养胰蛋白酶胶原蛋白酶胰蛋白酶胶原蛋白酶原代培养传代培养动物细胞培养结果：细胞群或细胞产物动物细胞培养和核移植技术第16页.动物细胞培养技术实际应用1、大量生产细胞或产物。如：病毒疫苗干扰素

单克隆抗体胰岛素2、给基因工程提供受体细胞。3、检测有毒物质及毒性。4、用于生理、病理、药理等方面研究，为治疗和预防疾病提供理论依据。动物细胞培养和核移植技术第17页众所周知，治疗烧伤需要做皮肤移植手术，这对烧伤病人来说可谓雪上加霜。他们本身已经够痛苦了，还要进行皮肤移植，这意味着将从他们所剩无多好皮肤上再移走一块。也就是说，这些已经受伤患者，身上还要平添一处新伤痕。

如今，英国一家企业在试验室中培育出人造皮肤，有望结束烧伤患者皮肤移植之痛。

据英国《每日邮报》报道，小块皮肤移植已经进入临床试验阶段。医生在6名志愿者手臂上分别取下不足7平方厘米皮肤，然后种上人造皮肤，用无菌绷带包扎好。28天后，志愿者们皮肤伤口全部愈合，几乎没留下什么疤痕，而且这些志愿者也没有任何排异反应，预后比较理想。

人造皮肤厚度与真正皮肤也是一致，皮肤由纤维蛋白原、血凝酶和纤维原细胞等所合成基质组成。在显微镜下，它们几乎无异于自然生长皮肤，甚至能够清楚地看到纵横密布血管。英国计划生产人造皮肤动物细胞培养和核移植技术第18页对比：动物细胞培养、植物组织培养..植物组织培养技术动物细胞培养技术原理培养基结果分散处理脱分化细胞全能性细胞有丝分裂固体,营养物质,激素液体,营养物质,血清等完整植株细胞群或细胞产物无有有无植物组织培养技术是植物细胞工程技术基础。动物细胞培养技术是动物细胞工程技术基础。复习植物细胞工程和动物细胞工程部分内容。动物细胞培养和核移植技术第19页动物细胞培养核移植技术动物细胞培养和核移植技术第20页将动物一个细胞＿＿＿，移入一个已经去掉＿＿＿＿＿细胞中，使其＿＿并发育成一个新＿＿，这个新胚胎最终发育为动物个体。分类

胚胎细胞核移植、体细胞核移植细胞核细胞核卵母重组胚胎核移植技术动物细胞培养和核移植技术第21页母绵羊A乳腺细胞

（体细胞）

母绵羊B未受精卵细胞

母绵羊C“多莉”新卵细胞发育成早期胚胎去核卵细胞提取细胞核核移植胚胎移植体细胞核移植技术克隆羊动物细胞培养和核移植技术第22页说出与克隆“多莉”不一样之处。为何要进行动物细胞培养？为何没有取出细胞核？为何要去掉卵母细胞核？体细胞核移植技术克隆牛阅读教材P48页克隆牛生产过程，回答问题。动物细胞培养和核移植技术第23页体细胞核移植技术动物细胞培养和核移植技术第24页整个过程用了哪些技术？细胞培养、核移植、胚胎移植新生牛性别、基因？与供体相同繁殖方式？无性繁殖原理？动物细胞核全能性体细胞核移植技术动物细胞培养和核移植技术第25页胚胎移植胚胎发育供体体细胞细胞培养体细胞群细胞融合细胞胚胎代孕母体生出克隆个体卵巢卵母细胞(减Ⅱ)去核无核卵母细胞体细胞核移植技术过程动物细胞培养和核移植技术第26页.体细胞核移植技术应用阅读教材P49页关于体细胞核移植技术应用，归纳其应用领域。1、畜牧业。2、保护濒危物种。3、医药卫生。动物细胞培养和核移植技术第27页.体细胞核移植技术存在问题动物细胞培养和核移植技术第28页.动物细胞培养和核移植技术第29页动物细胞培养与植物组织培养主要区分在于[]A、培养基不一样B、动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C、动物细胞能够传代培养，而植物细胞不能D、动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株巩固练习A动物细胞培养和核移植技术第30页动物细胞工程技术基础是[]A、动物细胞融合B、胚胎移植C、动物细胞培养D、核移植巩固练习？在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变细胞是[]A、细胞系B、细胞株C、原代细胞D、传代细胞CA动物细胞培养和核移植技术第31页以下不属于克隆是[]A、生物体经过体细胞进行无性繁殖B、将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系C、扦插和嫁接D、将鸡某个DNA片段整合到小鼠DNA中巩固练习D动物细胞培养和核移植技术第32页植物体细胞杂交结果是[]A、产生杂种植株B、产生杂交细胞C、原生质体融合D、形成愈伤组织巩固练习A植物体细胞杂交目标是[]A、产生杂种植株B、产生杂交细胞C、原生质体融合D、形成愈伤组织A动物细胞培养