医学动物实验和生物安全宣讲专家讲座

萨晓婴浙江省医学科学院浙江省试验动物中心医学动物试验与生物安全

医学动物实验和生物安全宣讲第1页教学目了解

动物试验存在生物安全危险常见人兽共患病、试验动物微生物和寄生虫感染熟悉医学动物试验室生物危害及安全防护掌握

应急预案、试验后无害化处理

医学动物实验和生物安全宣讲第2页医学动物实验与生物安全第一节试验动物主要人畜共患病及传染病第二节常见试验动物微生物和寄生虫感染第三节医学动物试验室生物危害及安全防护第四节感染动物喂养管理第五节动物试验后废弃物无害化处理第六节试验室生物安全相关规范与标准医学动物实验和生物安全宣讲第3页

医学动物试验是生命科学研究基础和主要支撑条件。几乎全部生命科学领域科研、教学、生产、检定、安全评价等都离不开医学动物试验。动物试验存在生物安全危险，人兽共患病、动物性气溶胶和试验室相关疾病感染是形成动物试验生物危害三大主要原因。

医学动物实验和生物安全宣讲第4页第一节试验动物主要人畜共患病及传染病

一、流行性出血热二、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎三、狂犬病四、猴B病毒病五、弓形虫病六、沙门氏菌病七、钩端螺旋体病八、结核分支杆菌病九、志贺菌病十、鼠痘十一、兔出血症

人畜共患病是指脊椎动物与人类之间自然传输和感染疾病，即人类和脊椎动物由共同病原体引发，在流行病学上又相关联疾病。医学动物实验和生物安全宣讲第5页一、流行性出血热

由流行性出血热病毒(EpidemicHemorrhagicFeverVirus)引发主要发生于大鼠烈性传染病，也是一个人畜共患自然疫源性传染病。主要特征：高热、出血性肾脏损伤。1981年WHO统一命名为肾综合征出血热（HFRS）。自然宿主主要是小型啮齿动物，如姬鼠属、家鼠属、仓鼠属和小鼠属动物。黑线姬鼠为姬鼠型HFRS主要传染源；褐家鼠为家鼠型HFRS主要传染源；大鼠为试验动物型HFRS主要传染源。医学动物实验和生物安全宣讲第6页二、淋巴细胞性脉络丛脑膜炎

由淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)引发一个急性传染病，也是人畜共患病。主要侵害中枢神经系统，展现脑脊髓炎症状。LCMV是人和各种动物共患病毒性疾病，小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、犬、猴、鸡、马、兔均易感。医学动物实验和生物安全宣讲第7页三、狂犬病由狂犬病毒(RabiesVirus，RV)引发急性直接接触性为主人畜共患病。主要特征：侵害中枢神经系统，展现狂躁不安，意识紊乱，最终麻痹死亡。几乎全部温血动物都对RV易感。最易感动物包含犬、仓鼠、豚鼠、兔等啮齿类动物；中度易感动物包含牛、绵羊、马、灵长类动物。野生啮齿类动物如野鼠等在一定条件下可成为本病长久存在危险疫源。医学动物实验和生物安全宣讲第8页四、猴B病毒病由猴B病毒(SimianBvirusInfections)又称疱疹病毒引发人和猴共患一个传染病。猴是B病毒自然宿主，感染率可达10％～60％。多数情况下仅在口腔黏膜出现疱疹和溃疡，之后病毒可长久潜伏在呼吸道或泌尿生殖器官附近神经节，也可长久潜伏在组织器官内，产生B病毒抗体。人类感染主要表现脑脊髓炎症状，多数病人发生死亡。医学动物实验和生物安全宣讲第9页五、弓形虫病本病是由属孢子纲弓形虫引发，能够在人与动物之间传染主要人兽共患病。小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠、犬和猴为中间宿主，猫为终末宿主。

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沙门菌(Salmonellasp)是1880年Eberth首先发觉。是一类主要人兽共患疾病病原体。对试验动物威胁较大是鼠伤寒和肠炎菌。在动物中可交叉感染，或同时感染两种沙门菌。豚鼠对沙门菌高度敏感，感染后可发生严重临床疾病。小鼠和大鼠也很敏感，并常以亚临床感染形式长久带菌。沙门菌主要经过消化道传染，即动物食入污染沙门菌粪便或被粪便污染饲料、饮水、垫料。

六、沙门氏菌病医学动物实验和生物安全宣讲第11页七、钩端螺旋体病钩端螺旋体病(Leptospirosis)是一个主要而复杂人畜共患病和自然疫源性传染病。临床表现形式多样，主要有发烧、黄疸、血红蛋白尿、出血、流产、皮肤和黏膜坏死、水肿等。钩端螺旋体动物宿主非常广泛，几乎全部温血动物都可感染，其中啮齿目标鼠类是最主要贮存宿主。医学动物实验和生物安全宣讲第12页八、结核分支杆菌病

由结核分支杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)引发人和动物共患一个细菌性疾病。人感染后形成结核病，猴、犬、豚鼠、兔和猫等均可感染，以猴发病率最高。医学动物实验和生物安全宣讲第13页九、志贺菌病

由志贺菌(Shigellaspp)或称痢疾杆菌引发人和试验动物肠道感染一个细菌性疾病。人和猴以细菌性痢疾为主要症状。

医学动物实验和生物安全宣讲第14页十、鼠痘小鼠痘(Mousepox，MPV)是小鼠一个毁灭性、高度传染性疾病，其病原为脱脚病病毒(EctromeliaVirus)，小鼠痘特点在于感染后不但引发全身或局部皮肤痘疹，还可发生肢、尾肿胀，发炎和坏疽，肢体脱落呈“缺肢”畸形，故被称为传染性脱脚病(InfectiousEctromelia)。小鼠痘在世界各地广为流行，常造成小鼠大批死亡，有呈隐性感染，但在试验条件下，病毒可转化为显性感染，从而严重影响和干扰试验研究顺利进行。医学动物实验和生物安全宣讲第15页十一、兔出血症

由兔出血症病毒(RabbitHemorrhagicDiseaseVirus)引发兔一个烈性传染病，又称“兔瘟”。主要特征是病兔突然死亡，临死兴奋，挣扎、抽搐、惨叫。本病只发生于兔，不一样品种兔均易感，不一样性别兔易感性无差异。不一样年纪兔易感性差异很大，主要发生于6O日龄以上青年兔和成年兔，发病急，死亡率高，断乳后育成兔死亡率稍低，哺乳期仔兔极少发病死亡。

医学动物实验和生物安全宣讲第16页危害较大人畜共患病1、流行性出血热2、结核杆菌病3、狂犬病4、沙门氏菌病5、志贺菌病6、弓形虫病7、钩端螺旋体病医学动物实验和生物安全宣讲第17页第二节常见试验动物微生物和寄生虫感染一、仙台病毒感染二、小鼠肝炎三、支原体病四、巴氏杆菌病五、呼肠孤病毒Ⅲ型感染六、球虫病七、犬瘟热八、传染性犬肝炎九、犬细小病毒感染

在试验动物喂养环境及动物体中，存在着种类繁多微生物与寄生虫。这些微生物、寄生虫对试验动物能够是致病性、条件致病性和非致病性，有还可能是人兽共患病病原体。

医学动物实验和生物安全宣讲第18页一、仙台病毒感染

小鼠仙台病毒感染是最难控制病毒之一，临床表现两种病型。急性型多见于断乳小鼠，主要表现呼吸道症状，多数情况下呈隐性感染，有时可引发肺炎，对大鼠麻醉试验和吸入毒理学研究等均可产生严重干扰。

医学动物实验和生物安全宣讲第19页二、小鼠肝炎由小鼠肝炎病毒(MouseHepatitisVirus，MHV)引发一个高度传染性疾病。小鼠肝炎病毒被列为影响科学研究试验主要病原体之一。现在认为MHV只感染小鼠。感染通常是隐性或亚临床，但含有高度传染性。MHV呈世界性分布，在中国小鼠群中广泛流行，鼠群中感染率可为20％～100％。

医学动物实验和生物安全宣讲第20页三、支原体病

是介于病毒和细菌之间一群多形性微生物，能引发人、动植物疾病，称支原体病。此病传染性很强，可使疾病快速蔓延，常与其它试验动物疾病合并感染。该病呈世界范围性分布，是啮齿类试验动物慢性呼吸道病主要病原体。它广泛存在于大鼠和小鼠生产群中，感染率甚至超出仙台病毒、小鼠肺炎病毒感染率。

医学动物实验和生物安全宣讲第21页四、巴氏杆菌病

由多杀性巴斯德杆菌(Pasteurellamultocida)和嗜肺巴斯德杆菌(Pasteurellapneumotropica)所引发各种试验动物，尤其是兔和啮齿类动物疾病称巴氏杆菌病(Pasteurellosis)。

医学动物实验和生物安全宣讲第22页五、呼肠孤病毒Ⅲ型感染

由呼肠孤病毒(Reovirus)Ⅲ型引发小鼠、豚鼠、仓鼠感染传染病，主要特征是下痢。六、球虫病

试验动物球虫病主要发生在兔。兔球虫病可分为肠球虫病和肝球虫病，多数情况下为混合感染。精神沉郁，行动迟缓，食欲减退或废绝。腹泻与便秘交替出现。医学动物实验和生物安全宣讲第23页七、犬瘟热犬瘟热是由犬瘟热病毒(CanineDistemperVirus，CDV)引发，感染肉食兽中犬科(尤其是幼犬)、鼬科及一部分浣熊科动物高度接触传染性、致死性传染病。早期表现双相热型、急性鼻卡他，随即以支气管炎、卡他性肺炎、严重胃肠炎和神经症状为特征。少数出现鼻部和脚垫高度角化。

医学动物实验和生物安全宣讲第24页八、传染性犬肝炎

传染性犬肝炎(InfectiousCanineHepatitis，ICH)是由犬腺病毒l型(CAV一1)引发一个急性败血性传染病。主要发生于犬，也可见于其它犬科动物。在犬主要表现肝炎和眼睛疾患。犬不分年纪、性别、品种均可发病，但l岁以内幼犬多发。幼犬死亡率高，可达25％～40％，成年犬极少出现临床症状。

医学动物实验和生物安全宣讲第25页九、犬细小病毒感染犬细小病毒(CanineParvovirusInfections，CPV)感染是犬一个烈性传染病。临床表现以急性出血性肠炎和非化脓性心肌炎为特征。犬是主要自然宿主。犬感染CPV发病急，死亡率高，常呈暴发性流行。不一样年纪、性别、品种犬均可感染，但以刚断乳至9O日龄犬较多发，病情也较严重，尤其是新生幼犬，有时展现非化脓性心肌炎而突然死亡。纯种犬比杂种犬和土种犬易感性高。

医学动物实验和生物安全宣讲第26页第三节医学动物试验室生物危害及安全防护

一、试验室生物安全概念及分级试验室生物安全（laboratorybiosafety）是指从事病原微生物试验室，为防止病原微生物对工作人员、相关人员、公众危害以及对环境污染，确保试验研究科学性或保护被试验因子免受污染，而采取包含建立规范管理体系、配置必要物理、生物防护设施和设备，建立规范微生物操作规程和方法等综合办法。生物安全水平分四个等级。

生物安全试验室（biosafetylaboratory）是指经过防护屏障和管理办法，到达生物安全要求生物试验室。医学动物实验和生物安全宣讲第27页试验动物生物安全试验室试验动物生物安全试验室（AnimalBiosafetyLaboratory,ABSL）是一类特殊动物试验室，试验以试验动物为载体，在特定条件下，经过人工或自然感染进行动物试验，或用于动物传染病临床诊疗、治疗、预防研究等工作。动物试验室生物安全水平标准与普通进行传染性病原体试验研究微生物学试验室基本相同。动物试验生物安全水平一样分四个等级。

医学动物实验和生物安全宣讲第28页试验室生物安全水平分级分级危害程度处理对象一级低个体危害，低群体危害对人体、动植物或环境危害较低，不含有对健康成人、动植物致病致病因子。二级中等个体危害，有限群体危害对人体、动植物或环境含有中等危害或含有潜在危险致病因子，对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害。有有效预防和治疗方法。三级高个体危害，低群体危害对人体、动植物或环境含有高度危险性，主要经过气溶胶使人传染上严重甚至是致命疾病，或对动植物和环境含有高度危害致病因子。通常有预防治疗方法。四级高个体危害，高群体危害对人体、动植物或环境含有高度危险性，经过气溶胶路径传输或传输路径不明，或未知、危险致病因子。没有预防治疗方法。医学动物实验和生物安全宣讲第29页生物安全试验室环境技术指标名称洁净度级别换气次数（次/h）与室外方向上相邻相通房间最小负压差（Pa）温度（℃）相对湿度（％）噪声dB(A)最低照度（lx）一级/可开窗/18~28≤70≤60200二级/可开窗/18~2730~70≤60300三级7~815或12-1018~2530~60≤60350四级7~815或12-1018~2430~60≤603501、BSL-3主试验室相对于大气最小负压不应小于-30Pa，BSL-4主试验室相对于大气最小负压不应小于-40Pa。2、ABSL-3主试验室相对于大气最小负压不应小于-40Pa，其中解剖室不应小于-50Pa；ABSL-4主试验室相对于大气最小负压不应小于-50Pa，其中解剖室不应小于-60Pa。3、本表中噪声不包含生物安全柜、动物隔离器噪声，假如包含上述设备噪声，则最大不应超出68dB（A）。

医学动物实验和生物安全宣讲第30页动物生物安全试验室（ABSL-1、ABSL-2）环境相关技术指标名称洁净度级别最小换气（次/h）与室外方向上相邻相通房间最小负压差（Pa）温度（℃）相对湿度（％）噪声dB(A)最低照度（lx）一级/8/19~2640~70≤60150二级715-1020~2640~70≤601501、动物生物安全试验室内参数应符合GB14925《试验动物环境及设施》相关要求。2、ABSL-2应为负压屏障环境，压力梯度应确保洁净走廊＞动物试验区＞解剖室。

医学动物实验和生物安全宣讲第31页动物生物安全试验室其它要求1、在设计和建造动物生物安全试验室时，还应考虑降低人流和物流交叉污染危险。ABSL-1至ABSL-4除了要满足BSL-1至BSL-4要求外，还应满足以上要求。2、试验室动物尸体及废弃物必须经过高压灭菌消毒后方能运出屏障设施。

危害等级防护水平试验室操作和安全设施ⅠABSL-1限制出入，穿戴防护服和手套ⅡABSL-2在抵达ABSL-1条件基础上，还应具备生物危害警告标志，可产生气溶胶操作应使用BSC（生物安全柜）。废弃物和喂养笼舍在清洗前先去除污染，ⅢABSL-3在抵达ABSL-2条件基础上，还应有准入控制。全部操作应使用BSC，并穿着特殊防护服，离开时淋浴ⅣABSL-4在抵达ABSL-3条件基础上，还应严格控制出入。进入前更衣。配置Ⅲ级BSC或正压防护服。离开时化学淋浴（正压服型）。全部废弃物在去除出设施前，应先去除污染医学动物实验和生物安全宣讲第32页一级试验动物生物安全试验室（ABSL-1）

一级试验动物生物安全试验室适合用于喂养接种了危险度1级微生物动物，试验对试验室工作人员和环境可能有微弱危害。应制订动物操作和进入动物设施规程和方案，要求应用微生物学操作技术规范，工作人员应制订适宜医学监测方案，制订并执行安全操作手册。

医学动物实验和生物安全宣讲第33页医学动物实验和生物安全宣讲第34页二级试验动物生物安全试验室（ABSL-2）

二级试验动物生物安全试验室（ABSL-2）适合用于对人及环境有中度危害微生物试验。ABSL-2是在ABSL-1操作规范、处理方法、安全设备和试验室要求基础上建立起来。试验动物在隔离器、IVC中喂养。产生气溶胶操作要在生物安全柜内进行。门应保持关闭，且悬挂生物危害标志牌，有害污染废弃物要与普通废弃物分开放置。

医学动物实验和生物安全宣讲第35页医学动物实验和生物安全宣讲第36页试验动物生物安全试验室安全设备

（一）生物安全柜（Biologicalsafetycabinets，BSCs）（二）隔离器(Isolator)（三）独立通风笼具系统（IndividualVentilatedcages，IVC）医学动物实验和生物安全宣讲第37页A2型生物安全柜环境空气污染空气HEPA过滤空气含压污染空气

70%气体循环.30%气体排出既能够接管道外排，也能够不接管道直接排放在试验室

医学动物实验和生物安全宣讲第38页隔离器医学动物实验和生物安全宣讲第39页医学动物实验和生物安全宣讲第40页独立通风笼具系统（IVC）

医学动物实验和生物安全宣讲第41页试验室生物安全管理体系1、生物安全管理组织体系

我国试验室生物安全管理组织体系由国家、地域、单位上级主管部门、试验室所在单位和试验室五个层面组成。

（1）国家级（2）地域级（3）试验室所在单位上级主管部门（4）试验室所在单位（5）试验室医学动物实验和生物安全宣讲第42页2、人员安全管理培训、健康检验、免疫接种或血清学检验、严格个人防护3、试验动物安全管理

选取合格试验动物预防人畜共患病动物健康管理医学动物实验和生物安全宣讲第43页4、生物安全管理体系建立

上层次文件应有下层次文件支持，下层次文件比上层次文件更详细、更有可操作性，上下层次之间要相互衔接，内容要协调一致。

医学动物实验和生物安全宣讲第44页5、动物试验室生物安全应急预案（1）信息汇报制度（2）应急处置程序

1）重大病原微生物试验室生物安全事件应急处置程序2）普通病原微生物试验室生物安全事件3）生物恐怖事件医学动物实验和生物安全宣讲第45页五、试验动物生物安全试验室安全防护

动物试验中安全防护：预防动物咬伤、动物间传染、尤其要预防来自动物气溶胶吸入感染。

办法：组织、制度及教育安全操作、防护设备、有效消毒医学监测医学动物实验和生物安全宣讲第46页第四节感染动物喂养管理

感染动物健康管理感染动物喂养管理兽医管理人畜共患病防护感染动物在喂养及试验中气溶胶防护医学动物实验和生物安全宣讲第47页一、感染动物健康管理

动物健康情况监护隔离检疫安全管理

◆新购入动物隔离观察◆患病动物隔离◆可疑感染动物隔离医学动物实验和生物安全宣讲第48页喂养、搬运感染试验动物时应戴手套更换垫料时降低笼盒中尘埃飞散及时检验发觉尸体应马上运走，动物尸体应放置于指定容器储备。给动物注射生物危害性物质时，应佩戴含有保护性作用手套预防动物出现应激反应，防止生物危害物质扩散。含有生物危害性气溶胶试验动物应喂养于密闭通风笼具中或使用独立通风笼具。试验动物转运时应放置于密闭笼具或其它可预防气溶胶扩散笼具中进行。二、感染动物喂养管理医学动物实验和生物安全宣讲第49页三、兽医管理兽医管理-主要步骤兽医师（注册认证）监督诊疗处理控制医学动物实验和生物安全宣讲第50页四、人畜共患病防护严格个人防护

隔离服、口罩、帽子、防护手套试验结束时彻底洗手、清洁。必要时免疫接种或血清学检验试验物品清洗前必须先高压灭菌消毒医学动物实验和生物安全宣讲第51页第五节动物试验后废弃物无害化处理

感染动物在喂养及使用过程中，所产生废气（气溶胶、臭气）、废水（洗刷用水、手术用水、其它用水）、废物（垫料、动物尸体或组织、一次性物品等），假如操作或处理不妥，可造成病原体逸出、病原散播，对环境造成污染，甚至暴发疫病。医学动物实验和生物安全宣讲第52页第五节动物试验后废弃物无害化处理一、组织管理：领导负