T-YNFS 006-2023 松毛虫质型多角体病毒生防制剂生产技术规程

ICS65.020.20CCSB66T/YNFSTechnicalTechnicalSpecificationfortheProductionofBiocontrolpreparationsforDendrolimuspunctatusPolyhedrosisVirusIT/YNFS006—2023本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由云南省林业标准化技术委员会（YNTC02）提出并归口。本文件主要起草单位：云南省林业和草原科学院。本文件主要起草人：陈鹏、胡光辉、李浩然、冯丹、冯志伟、李灿雯、冯加德。1T/YNFS006—2023松毛虫质型多角体病毒生防制剂生产技术规程本文件规定了松毛虫质型多角体病毒（DendrolimuspunctatusCytoplasmicPolyhedrosisVirus，DPWCPV）生防制剂的生产、包装、贮藏、运输等技术内容。本文件适用于防治松毛虫的松毛虫质型多角体病毒生物制剂的生产和贮藏运输。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T3796农药包装通则3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1松毛虫质型多角体病毒（DendrolimusCytoplasmicPolyhedrosisVirus，简称DCPV）具有较高宿主特异性的昆虫病毒，松毛虫类害虫的致命性传染性天然病原体。3.2质型多角体病毒包涵体CytoplasmicPolyhedralinclusionbody（CPB）包埋病毒粒子的包涵体，是表示病毒数量的单位。3.3病毒生防制剂Virusbiocontrolpreparations病毒离心沉淀物加入矿物油及保护剂等制成的超低容量喷雾制剂。4松毛虫质型多角体病毒生防制剂生产4.1松毛虫病毒增殖参照云南省林学会团体标准“松毛虫质型多角体病毒林间大围栏增殖技术规程”，获得生防制剂生产虫源。4.1.1预处理往装满50kg罹病虫的容器桶中，每桶加入刚好淹没罹病虫体的清水，在室温下，浸泡14d~16d。4.1.2切碎2T/YNFS006—2023把4.2.1中经浸泡后的罹病虫体，用斩拌机，切成1cm~2cm的组织碎块。洗脱过滤将切至1cm~2cm的罹病虫段，置于搅拌机中，加入清水，淹没虫段，以400r/min~600r/min搅拌7min~10min后，再放入脱水机中，在600r/min转速下脱水5min，在脱水机出液口用20目尼龙纱网过滤后得粗滤液，将大的虫尸组织块去掉。再在脱水机出液口用120目滤网将粗滤液过滤得粗提液。4.1.3离心分离在室温下将粗提液用离心机在6800转/min的转速下离心5min得到松毛虫质型多角体病毒浓缩液Ⅰ,松毛虫质型多角体病毒含量达1×109CPB/ml以上时，即达到合格的浓缩液Ⅰ,未达含量标准，需延长离心时间，再检测。4.1.4真空干燥将病毒浓缩液Ⅰ放入真空干燥机中，调整温度为28℃~35℃、负0.9Pa大气压下，真空干燥10h~15h，获得松毛虫质型多角体病毒浓缩液Ⅱ。4.1.5质检对上述干燥后的病毒浓缩液进行取样，采用血球计数板法测定松毛虫质型多角体病毒含量，松毛虫质型多角体病毒含量达15×109CPB/ml以上时，即达到合格的病毒浓度。若浓度未达到，则再次进行真空干燥。4.1.6制剂制备将病毒浓缩液Ⅱ置于真空干燥机的料罐中，每100kg松毛虫质型多角体病毒浓缩液Ⅱ加入30kg皂化甘油（市售）和500g分析纯活性炭(细度120目以上)，关好料罐，启动运转真空干燥机，运转1h左右，让其充分混和均匀，制成病毒生防制剂。4.1.7包装将上述经检验合格的的松毛虫质型多角体病毒制剂用避光容器密闭包装，并贴上标签。包装、标签应符合GB/T3796的规定。5病毒制