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文档简介
1猪瘟病毒竞争磁微粒CLIA抗体检测方法本文件适用于定量检测猪血清中针对猪瘟病毒的特GB/T6682分析实验室用水规格和试GB/T35906猪瘟抗体间接ELISANY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范4符号和缩略语CLIA:化学发光免疫分析法(ChemiluminescenceImmunoassELISA:酶联免疫吸附试验(EnzymeLinkedImCSFV:猪瘟病毒(ClassicalSwineFeverV5.2磁微粒工作液(偶联链霉亲和素的磁性微粒)。5.5抗体工作液(吖啶酯标记的CSFV单克隆抗体)。2于无菌血清管中,按照GB19489样品处理的生物安全措施、实验室生在一周内检测,可置2℃~8℃条件下保存,若超过一周检测,应置于-20℃以下冷冻保存。取8.1中的样品,8000rpm,离心2min,取上清放于1.5mL尖底离心管中,体积应检;若样品中存在沉淀或絮状物等杂质,应离心39操作步骤9.1校准曲线拟合将CSFV抗体工作校准品1~工作校准品6放入样本架,按照99.2校准曲线校准9.4样品检测),整个检测过程在全自动化学发光免疫分析仪上进行,具体检测过9.5结果计算4检测完成后,以工作校准品抗体含量(3.125U、12.5U、50U、200U、800U、3200U)为横坐标、相应检测发光值为纵坐标拟合四参数为标准曲线,四参数公式为Y=(a-d)/[1+(x/c)*b]+d,当R2高抗体含量≥10U时,判为CSFV抗体阳5将表A.1中的试剂依次加入烧杯中,加灭菌蒸馏水至600mL,溶解,定容至1000mL,置于2~8℃按表A.2中的试剂依次加入烧杯中,加灭菌蒸馏水至600mL,溶解,6d后检测抗体水平,如达不到要求,再进行第三、四次免疫。抗体水平达到35906的猪瘟抗体间接ELISA检测方法检测抗体水平,以检测样本为阳性的最大7取B.1所制备的CSFV高免血清,用校准品稀释液稀释至抗体含量为50U和800取B.1所制备的CSFV高免血清,用校准品稀释液稀释至抗体含量为6.25U和20质控品1和质控品2,用CSFV抗体磁微粒化学发光免疫分析检测方法检测5次,计
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