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第第页土壤纤维素酶（Solid—cellulase，S—CL）活性测定试剂盒说明书土壤纤维素酶（Solidcellulase，SCL）活性测定试剂盒说明书微量法100管/48样注意：正式测定前务必取23个预期差别较大的样本做猜测定测定意义：SCL重要来源于土壤微生物，SCL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是重要的碳源营养物质。测定原理：采用蒽酮比色法测定SCL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。需自备的仪器和用品：酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、甲苯、硫酸（不允许快递）和蒸馏水。试剂的构成和配制：试剂一：甲苯10mL×1瓶，4℃保管；（自备）试剂二：液体6mL×1瓶，4℃保管；试剂三：液体40mL×1瓶，4℃保管；试剂四：粉剂×1瓶，4℃保管；临用前加入5mL蒸馏水和45mL浓硫酸充分溶解待用。样品处理：新鲜土样自然风干或37度烘箱风干，过30～50目筛。加样表和测定步骤：对照管测定管风干土样（g）0.050.05试剂一（μL）5050振荡混匀15min试剂二（μL）90试剂三（μL）370370蒸馏水（μL）1809037℃振荡反应3h后，90℃水浴15min（盖紧，防止水分散失），冷却后8000g25℃离心10min，取上清，得糖化液糖化液（μL）140140试剂四（μL）260260混匀，90℃水浴10min（盖紧，防止水分散失），冷却，取200μL至微量石英比色皿或96孔板中，测620nm下吸光值A，计算ΔA=A测定管A对照管。每个测定管设一个对照管。SCL活力计算：a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准条件下测定的回归方程为y=5.018x0.0462；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。单位的定义：每天每g土样中产生1mg葡萄糖定义为一个酶活力单位。SCL活力（mg/d/g）＝（ΔA+0.0462）÷5.018×V反总÷W÷T=19.1×（ΔA+0.0462）T：反应时间，3h=1/8d；V反总：反应体系总体积：0.6mL；W：样本质量，0.05g。b.用96孔板测定的计算公式如下标准条件下测定的回归方程为y=2.5090x0.0462；x为标准品浓度（mg/mL），y为吸光值。单位的定义：每天每g土样中产生1mg葡萄糖定义为一个酶活力单位。SCL活力（mg/d/g）＝（ΔA+0.0462）÷2.5090×V反总÷W÷T=38.3×（ΔA+

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