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文档简介
第第页液相色谱仪常见故障断定及解决方法液相色谱解决方案
液相色谱仪一直以来就备受广阔试验室喜好者的宠爱,操作简单、结果。今日我们就来实在介绍一下液相色谱仪常见的故障的解决方法,希望可以帮忙用户更好的应用产品,希望可以帮忙用户更好的应用产品。
(一)液相色谱仪保留时间变化
1.柱温变化柱恒温,必要时需配置恒温箱
2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱
3.缓冲液容量不够用〉25mmol/l的缓冲液
4.柱污染每天冲洗柱
5.柱内条件变化稳定进样条件,调整流动相
6.柱快达到寿命接受保护柱
(二)液相色谱仪保留时间缩短
1.流速加添检查泵,重新设定流速
2.样品超载降低样品量
3.键合相流失流动相ph值保持在3~7.5检查柱的方向
4.流动相构成变化防止流动相蒸发或沉淀
5.温度加添柱恒温
(三)液相色谱仪保留时间延长
1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排出泵内气泡
2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或接受碱至钝化柱
3.键合相流失同前(二)3
4.流动相构成变化同前(二)4
5.温度降低同前(二)5
(四)液相色谱仪显现肩峰或分叉
1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于*峰的15%
2.样品溶剂过强接受较弱的样品溶剂
3.柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱,接受较弱腐蚀性条件
4.柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品
5.进样器损坏更换进样器转子
(五)液相色谱仪鬼峰
1.进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗
2.样品中未知物处理样品
3.柱未平衡重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)
4.三氟乙酸(tfa)氧化(肽谱)每天新配,用抗氧化剂
5.水污染(反相)通过变化平衡时间检查水质量,用hplc级的水
(六)液相色谱仪基线噪声
1.气泡(尖锐峰)流动相脱气,加柱后背压
2.污染(随机噪声)清洗柱,净化样品,用hplc级试剂
3.检测器灯连续噪声更换氘灯
4.电干扰(偶然噪声)接受稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)
5.检测器中有气泡流动相脱气,加柱后背压
(七)液相色谱仪峰拖尾
1.柱超载降低样品量,加添柱直径接受较高容量的固定相
2.峰干扰清洁样品,调整流动相
3.硅羟基作用加三乙胺,用碱致钝化柱加添缓冲液或盐的浓度降低流动相ph值,钝化样品
4.同前(四)4
5.同前(四)3
6.死体积或柱外体积过大连接点降至zui低,对全部连接点作合适调整,尽可能接受细内径的连接管
7.柱效下降用较低腐蚀条件,更换柱,接受保护柱
(八)液相色谱仪峰展宽
1.进样体积过大同
2.在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散
3.数据系统采样速率太慢设定速率应是每峰大于10点
4.检测器时间常数过大设定时间常数为感喜好*峰半宽的10%
5.流动相粘度过高加添柱温,接受低粘度流动相
6.检测池体积过大用小体积池,卸下热交换器
7.保留时间过长等度洗脱时加添溶剂含量也可用梯度洗脱
8.柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至zui小
9.样品过载进小浓度小体积样品
高效液相色谱仪的原理特点高效液相色谱仪可以完成二元高压梯度洗脱,也可以拓展为制备系统,接受高压混合器连接两个高压恒流泵,利用RS232通讯,即可实现梯度分析;
便于用户自由选择与搭配,混合器材紧要由不锈钢、生物惰性PEEK等构成,用途广泛;
可广泛应用于讨论开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等浩繁分析领域。
高效液相色谱仪分别原理:液—液调配(Liquid—liquidPartitionChromatography)及化学键合相色谱(ChemicallyBondedPhaseChromatography)流动相和固定相都是液体。
流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避开固定液流失),有一个明显的分界面。
当试样进入色谱柱,溶质在两相间进行调配。达到平衡时,高效液相色谱仪报价,服从于高效液相色谱计算公式;
6种定量计算方法:归一法、修正归一法、带比例因子的修正归一法、内标法、外标法,高效液相色谱仪适用范围,以及指数计算法。
高效液相色谱仪特点:
1、梯度洗脱内部软件可自掌控,编辑、存贮60个梯度方法,运行多而杂的梯度程序;
2、泵形式:串联双柱塞浮动式密封圈;泵头自冲洗功能,泵无须手动排空即可输液“自吸式单向阀”技术,可延长密封圈使用寿命;
3、光路系统接受精密定位结构和独特的散热技术,高效的光学系统和数字过滤;
4、程序化的溶剂类和压缩因子,可自动补偿;完整的预清洗功能,更于快速溶剂更换;
5、波长调整功能:既可由键盘面板掌控也可由程序软件设定,全封闭集成型光电检测元件,无需任何机械部分调整即可选择或更改波长;
6、光源运行时间在线监测并显示,便利用户确定光源寿命;
7、三条流量校正曲线以及特有的多点参数校正,保障了极高的流量精准性;
8、梯度:高压2—3元;梯度方式:高压,梯度洗脱内部软件可自掌控,可通过PC机及泵掌控;
9、实时显示样品池和
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