任务四 血细胞比容测定课件

血细胞比容(Hct或PCV)，以前称为红细胞压积，是指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。

HCT的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关

任务四血细胞比容测定1任务四血细胞比容测定1.常量法(Wintrobe法)和微量法(microhematocrit)

将抗凝血液标本置于孔径统一的温氏管或毛细玻璃管中，以一定转速离心一定时间后，计算红细胞层占全血的体积比。

5层：血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞层、还原红细胞层和氧合红细胞层。2.血液分析仪法由红细胞平均体积和红细胞计数两项指标后导出，Hct＝红细胞计数×红细胞平均体积。检测原理任务四血细胞比容测定任务四血细胞比容测定方法优点缺点温氏法无需特殊仪器，广泛应用不能完全排除残留血浆，且单独采血，用血量大微量法快速(5min)标本用量小、结果准确、重复性好。WHO推荐的首选参考方法有残留血浆，但较温氏法少电阻抗法简便快速(5-15s)

白细胞、血小板增多可引起血液导电异常，使结果不可靠血细胞分析仪法简便快速、精密度高，无需单独采血准确性稍低，结果仅供参考4任务四血细胞比容测定

1.操作规范化

避免操作误差，如抗凝量不准，混匀不充分，离心速度不均等。

2．注意干扰因素①假性增高：红细胞形态异常和红细胞增多时应注明，

(细胞变形性减低和数量增多血浆残留量增加)；高网织红细胞或高白细胞等②假性降低：体外溶血、自身凝集等。

质量保证任务四血细胞比容测定参考值男性：0.380—0.508；女性：0.335—0.450任务四血细胞比容测定临床意义HCT的临床意义与红细胞计数相似。HCT减低是诊断贫血的指标，HCT的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关主要用于贫血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断、血液稀释和血液浓缩变化的测定、计算红细胞平均体积和红细胞平均血红蛋白浓度等。任务四血细胞比容测定临床意义

1．临床补液量的参考

各种原因导致脱水时，HCT都会增高，补液时可监测HCT，HCT恢复正常表示血容量得到纠正。

2．真性红细胞增多症诊断指标当HCT大于0.7，RBC为(7-10)X1012／L,Hb大于180g／L，即可诊断。任务四血细胞比容测定临床意义

3．红细胞平均指数计算的基础数据

红细胞平均值(MCV、MCHC)可用于贫血的形态学分类。

4．血液流变学指标

HCT增高表明红细胞数量偏高，全血黏度增加，严重者表现为高黏滞综合征，微循环障碍、组织缺氧。

HCT与其他血液流变学指标联合应用，可对一些血栓前状态进行监测。

任务四血细胞比容测定任务五红细胞平均指数计算红细胞平均容积(meancorpuscularvolume，MCV)，指每个红细胞平均体积的大小，以飞升(f1)为单位；红细胞血平均红蛋白含量(meancorpuscularhe-moglobin，MCH)，指每个红细胞内平均所含血红蛋白的量，以皮克(pg)为单位；红细胞平均血红蛋白浓度(meancorpuscularHemoglobinconcentration，MCHC)，指平均每升红细胞中所含血红蛋白浓度(g／L)。

10任务四血细胞比容测定(1)MCV=每升血液中红细胞体积/每升血液中红细胞个数=Hct/RB(f1)

(2)MCH=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞个数=Hb/RBC(pg)

(3)MCHC=每升血液中血红蛋白含量/每升血液中红细胞比容=Hb/Hct

11任务四血细胞比容测定

[检测原理]

1．手工法

同时计数红细胞，测定血红蛋白和血细胞比容，计算出红细胞3个平均指数。例：RBC为3.50X1012／L，Hct为0.36，Hb为120g/L

Hct0.36MCV＝——（fl）＝——————＝103（fl）

RBC3.50X1012／LHbHbMCH＝——（pg），MCHC＝——（g／L）

RBCHct任务四血细胞比容测定[检测原理]2．血液分析仪能直接导出MCV的值，再结合仪器直接测定的RBC和Hb，计算出MCH和MCHCMCH＝Hb／RBC，

MCHC＝Hb／(RBC×MCV)。

任务四血细胞比容测定参考值14任务四血细胞比容测定临床意义贫血分类MCV MCHMCHC贫血正细胞贫血正常正常正常再生障碍性贫血、急性失血性贫血、某些溶血性贫血大细胞贫血增高增高正常各种造血物质缺乏或利用不良的贫血单纯小细胞贫血减低减低正常慢性感染、慢性肝肾疾病性贫血小细胞低色素贫血减低减低减低缺铁性贫血及铁利用不良贫血，慢性失血性贫血作为贫血的红细胞形态学分类任务四血细胞比容测定红细胞体积分布宽度

（一）检测原理

红细胞体积分布宽度（RDW）反映样本中红细胞体积大小的异质程度，即反映红细胞大小不等客观指标，常用变异系数（CV）表示，由血液分析仪的红细胞体积直方图导出。

（二）方法学评价

RDW是对红细胞体积大小的评价，比血涂片红细胞形态大小的观察更为客观和准确。（三）质量控制

RDW异常受样本中红细胞碎片、红细胞凝集、双相性红细胞的影响。（四）临床意义

1.贫血形态学分类：根据红细胞形态大小不同，将贫血分成6类

任务四血细胞比容测定红细胞体积分布宽度1983年由Bessman提出的新贫血分类法对贫血病因鉴别诊断具有更大意义。MCV和RDW联合检测对贫血形态学鉴别诊断灵敏度为86.7%～100%，特异度为83.4%～100%。2.作为缺铁性贫血（IDA）：筛选诊断和疗效观察的指标：RDW增大对IDA的诊断灵敏度达95%以上，特异性不强，可作为IDA的筛选诊断指标。当铁剂治疗有效时，RDW开始增大，随后逐渐降至正。

3.鉴别缺铁性贫血和β-珠蛋白生成障碍性贫血：RDW增大对IDA的诊断灵敏度达95%以上，特异性不强，可作为IDA的筛选诊断指标。当铁剂治疗有效时，RDW开始增大，随后逐渐降至正常。任务四血细胞比容测定18任务六网织红细胞计数网织红细胞(reticulocyte，Ret)是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸(RNA)，经煌焦油蓝等活体染色后，嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒，连缀成线，线连接成网。属于尚未完全成熟的红细胞(当嗜碱性物质消耗殆尽后才被视为成熟红细胞)，一般为8～9.5μm。任务四血细胞比容测定19任务四血细胞比容测定20任务四血细胞比容测定

[检测原理]

1.普通光学显微镜法

活体染色（新亚甲蓝或煌焦油蓝)的碱性着色基团网织红细胞RNA的磷酸基(带负电荷)RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩，蓝色的点状、线状或网状结构

，显微镜下计数1000个红细胞中所占的网织红细胞数，以百分比或分数数表示。

任务四血细胞比容测定

[检测原理]

流式细胞仪法2．仪器法网织红细胞计数仪血液分析仪法。荧光染料与网织红细胞中RNA结合，发出特定颜色的荧光进行RNA定量精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数(Ret％)。将网织红细胞分成高、中、低荧光强度网织红细胞比率(HFR、MFR、LFR)并计算网织红细胞其他参数。

任务四血细胞比容测定血液分析仪法

提供与网织红细胞相关的多个参数，网织红细胞绝对值、网织红细胞百分比、网织红细胞平均体积、网织红细胞血红蛋白分布宽度、网织红细胞血红蛋白浓度、网织红细胞平均血红蛋白浓度、

LFR、MFR、HFR、网织红细胞成熟指数。任务四血细胞比容测定24任务四血细胞比容测定【质量保证】

以手工计数法为重点。

1．染料选择

任务四血细胞比容测定【质量保证】

2．正确辨认网织红细胞外周血中网织红细胞主要为Ⅳ型，凡含有2个以上网织颗粒的红细胞均应计为网织红细胞。

3．网织红细胞计数方法

(1)Miller窥盘：(2)显微成像系统：计算机和细胞形态分析软件，①HFR：粗颗粒堆积成网状。②MFR：粗颗粒在10个以上，或细小颗粒超过15个。③LFR：细胞内含15个以下细小颗粒

任务四血细胞比容测定①网织红细胞百分数：成人和儿童:0.005～0.025

新生儿:0.02～0.06②网织红细胞绝对数：成人和儿童:(24～84)X109／L参考值任务四血细胞比容测定临床意义1．评价骨髓增生能力，判断贫血类型。

(1)网织红细胞增多：表示骨髓造血功能旺盛，各种增生性贫血

(2)网织红细胞减少：常见于再生障碍性贫血

(3)鉴别贫血：任务四血细胞比容测定任务四血细胞比容测定任务四血细胞比容测定任务四血细胞比容测定临床意义2．评价疗效(1)观察贫血疗效：贫血随访缺铁贫或巨幼贫有效治疗后，2～3d后Ret开始上升，7～10d达到最高峰(约10％)，2周后渐降至正常。

(2)骨髓移植后监测骨髓造血恢复：骨髓移植后第21天，如Ret大于15X109／L，