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山东大学实验报告2015年5月10日姓名班级13级生命基地班学号同组者：科目细胞生物学实验实验题目小白鼠肝细胞线粒体的超活染色及观察第III.实验讨论

使用肝细胞的缘由：线粒体含量较多，每个肝细胞有1000-2000个线粒体；

长度适合观察，约5μm；肝脏较软，易于破碎，并且适于快速提取，因而利于保持线粒体活性；

【注意事项】用断头法处死小白鼠后，要将血放干净，可以剪开小鼠两侧颈动脉，使血液尽量流出，防止肝脏中储存过多血液，影响观察。打开腹腔后，可以看到肝脏位于左手边，呈红色，但颜色有一些偏淡，不要与右手边血红色的脾脏混淆，切下小鼠的肝脏，备用，剪的时候要注意避开各种血管，防止出血量过多凝结。在从小鼠体内取肝组织块时要尽快，从而保证它具有更高的活性。剪下来的组织块要立即放到Ringer缓冲液中去洗去其上的血液，因为如果组织块长时间暴露在空气中的话，其上的血液会凝固，使得染色操作变得困难，洗的时候用镊子轻轻的夹住涮洗，这样可使血液快速的被洗脱，但不要太用力，这样会将组织块弄碎。从小鼠肝脏上取组织块的时候，要选取薄边的一端，从此处取2小块，这一部分血少，易取（另一端太厚，不易取也不易染色，而且剪的时候出血量比较多）。在选取肝组织片时要在处于边缘，且为由薄到厚的地方选取。染色时要使组织块上面部分(至少三分之一）露在染液外，不可完全浸没在染液中，以便使线粒体酶系得到氧化。染色结束后，刚开始加入的Ringer液的量不能太多，只需要刚盖过肝组织块即可。如果量太多，则在剪组织块的时候会造成其上浮，从而不易剪碎。观察前要将肝组织充分剪碎，

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