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文档简介
酶促反应的速率可以用酶促反应过程中单位时间内底物的减少量或产物的增加量。一般用单位时间内产物的增加量表示。影响因素包括有:底物浓度、酶浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等。
研究一种因素的影响时,其余各因素均恒定。影响酶促反应速率的因素动物生物化学一、底物浓度对酶促反应速率的影响在酶浓度和其他反应条件不变的情况下,反应速率V对底物浓度[S]作图呈矩形双曲线。
影响酶促反应速率的因素动物生物化学[S]VVmax当底物浓度较低时,反应速率与底物浓度成正比;反应为一级反应。影响酶促反应速率的因素动物生物化学随着底物浓度的增高反应速率不再成正比例加速;反应为混合级反应。[S]VVmax影响酶促反应速率的因素动物生物化学
当底物浓度高达一定程度,酶被底物所饱和,反应速率不再增加,达最大速率;反应为零级反应。[S]VVmax影响酶促反应速率的因素动物生物化学底物浓度与反应速率的关系可用米氏方程式表示1.米氏方程式可以很好地解释底物浓度曲线
中间产物
酶促反应模式——中间产物学说E+S
ESE+P影响酶促反应速率的因素动物生物化学
1913年Michaelis和Menten提出反应速率与底物浓度关系的数学方程式,即米-曼氏方程式,简称米氏方程式(Michaelisequation)。[S]:底物浓度V:不同[S]时的反应速率Vmax:最大反应速率(maximumvelocity)Km:米氏常数(Michaelisconstant)VVmax[S]
Km+[S]=──影响酶促反应速率的因素动物生物化学Km=[S]∴Km值等于酶促反应速率为最大反应速率一半时的底物浓度,单位是mol/L。2=Km+[S]
Vmax
Vmax[S]VmaxV[S]KmVmax/21.Km值相当于V为Vmax一半时的[S]
影响酶促反应速率的因素动物生物化学2.Km是酶的特征性常数
在酶的结构、溶液pH、温度等条件不变的情况下,酶促反应底物的Km不因反应中酶浓度的改变而不同。
同一酶对其所催化的不同底物有不同的Km;不同酶对同一底物也有其各自的Km
。Km的范围多在10-6~10-2mol/L之间。
Km只与酶和底物的种类以及反应环境(pH、温度、离子强度)有关,而与酶浓度无关。影响酶促反应速率的因素动物生物化学3.Km在一定条件下可表示酶对底物的亲和力
Km越大,表示酶对底物的亲和力越小;Km越小,表示酶对底物的亲和力越大。
影响酶促反应速率的因素动物生物化学二、酶的浓度对酶促反应速率的影响当[S]>>[E],反应速率与酶浓度成正比。影响酶促反应速率的因素动物生物化学三、温度对酶促反应速率的影响
一般来说,酶促反应速度随温度的增高而加快。但当温度增加达到某一点后,由于酶蛋白的热变性作用,反应速度迅速下降,直到完全失活。
酶促反应速度随温度升高而达到一最大值时的温度就称为酶的最适温度。影响酶促反应速率的因素动物生物化学每种酶在一定条件下都有其最适温度一般:动物为37~50℃植物为45~60℃
嗜高温细菌可高达60℃以上酶的最适温度与实验条件有关,因而它不是酶的特征性常数。低温时由于活化分子数目减少,反应速度降低,但温度升高后,酶活性又可恢复。低温保存酶和菌种等生物制品
影响酶促反应速率的因素动物生物化学四、pH对酶促反应的影响最适pH:酶催化活性最大时的环境pH。体内酶的最适pH多在6.5~8之间。胃蛋白酶的最适pH为1.8
精氨酸酶的最适pH为9.8
影响酶促反应速率的因素
环境过酸、过碱能使酶变性失活—pH值影响酶的稳定性;
动物生物化学五、激活剂对酶促反应的影响
凡能提高酶的活性,加速酶促反应进行的物质都称为激活剂。1.无机离子许多无机离子都可作为酶的激活剂,如Na+、K+、Mg2+、Cl-、Br-等)、H+等。影响酶促反应速率的因素动物生物化学2.小分子有机化合物某些还原剂如半胱氨酸、巯基乙醇、抗坏血酸。作用机制:使酶中的二硫键还原成巯基,从而提高酶活性。金属螯合剂EDTA(乙二胺四乙酸)解除重金属离子对酶的抑制作用而激活酶的活性。3.具有蛋白质性质的大分子物质这类激活剂主要是激活酶原。如肠激酶是胰蛋白酶原的激活剂。影响酶促反应速率的因素动物生物化学六.抑制剂对反应速率的影响(1)抑制作用的概念酶活力下降或丧失,酶促反应速度减慢,但酶蛋白一般并未变性。抑制剂:能引起酶抑制作用的物质,用I表示;抑制剂对酶有一定的选择性。影响酶促反应速率的因素动物生物化学(2)抑制作用的类型按照抑制剂与酶作用的方式分两类:不可逆抑制作用可逆抑制作用影响酶促反应速率的因素动物生物化学1.可逆抑制作用:抑制剂以非共价键与酶分子可逆性结合造成酶活性的抑制,且可采用透析等简单方法去除抑制剂而使酶活性完全恢复。影响酶促反应速率的因素动物生物化学2.不可逆抑制作用:
抑制剂与酶分子的必需基团
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