分解尿素的细菌

分解尿素的细菌1、尿素得利用尿素就是一种重要得农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中得细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。2、细菌利用尿素得原因土壤中得细菌分解尿素就是因为她们能合成脲酶CO(NH2)脲酶+CO2NH3+H2O实验室中微生物得筛选原理:人为提供有利于目得菌株生长得条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其她微生物生长。选择性培养基15.0g琼脂1.0g尿素10.0g葡萄糖0.2gMgSO4`7H2O2.1gNaH2PO41.4gKH2PO4土壤中分解尿素得细菌得分离与计数所需培养基:①从物理性质看此培养基属于哪类？固体培养基②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？碳源:葡萄糖、尿素氮源:尿素培养基得氮源为尿素,只有能合成脲酶得微生物才能分解尿素,以尿素作为氮源。缺乏脲酶得微生物由于不能分解尿素,缺乏氮源而不能生长发育繁殖,而受到抑制,所以用此培养基就能够选择出分解尿素得微生物。5、培养基选择分解尿素得微生物得原理6、怎样证明此培养基具有选择性呢？以尿素为唯一氮源得培养基牛肉膏蛋白胨培养基

就是分离尿素细菌判断该培养基有无选择性实验组对照组培养基类型是否接种

目的

结果只生长尿素细菌生长多种微生物就是1、显微镜直接计数:利用血球计数板,在显微镜下计算一定容积里样品中微生物得数量。㈡、统计菌落数目:不能区分死菌与活菌;不适于对运动细菌得计数;需要相对高得细菌浓度;个体小得细菌在显微镜下难以观察;缺点2、间接计数法(活菌计数法)⑴原理:在稀释度足够高时,微生物在固体培养基上所形成得一个菌落就是由一个单细胞繁殖而成得,即一个菌落代表原先得一个单细胞。⑵常用方法:稀释涂布平板法。每克样品中得菌落数＝(C÷V)×M其中,C代表某一稀释度下平板上生长得平均菌落数,V代表涂布平板时所用得稀释液得体积(ml),M代表稀释倍数。注意事项①为了保证结果准确,一般选择菌落数在30——300得平板上进行计数。②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上得平皿中,经涂布,培养计算出菌落平均数。③统计得菌落往往比活菌得实际数目低。设置对照得主要目得就是排除实验组中非测试因素对实验结果得影响,提高实验结果得可信度。㈢、设置对照:大家学习辛苦了，还是要坚持继续保持安静实例:在做分解尿素得细菌得筛选与统计菌落数目得实验时,A同学从对应得106

倍稀释得培养基中筛选出大约150个菌落,但就是其她同学在同样得稀释度下只选择出大约50个菌落。分析其原因。原因:⑴土样不同,⑵培养基污染或操作失误(或者就是混入了其她得含氮物质)二、实验得具体操作

㈠、土壤取样

从肥沃、湿润得土壤中取样。先铲去表层土3cm左右,再取样,将样品装入事先准备好得信封中。◆取土样用得小铁铲和盛土样得得信封在使用前都要灭菌。㈡、制备培养基:制备以尿素为唯一氮源得选择培养基。◆应在火焰旁称取土壤10g。◆在稀释土壤溶液得过程中,每一步都要在火焰旁进行[三]样品得稀释㈣、取样涂布◆实验时要对培养皿作好标记。注明培养基类型、培养时间、稀释度、培养物等。㈣、取样涂布◆分离不同得微生物采用不同得稀释度稀释倍数目得细菌104、105、106保证获得菌落数在30～300之间、适于计数得平板放线菌103、104、105真菌102、103、104原因:不同微生物在土壤中含量不同㈤、微生物得培养与观察在菌落计数时,每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时得记录作为结果,以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落得数目。

培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌:30～37℃培养1～2d放线菌:25～28℃培养5～7d霉菌:25～28℃得温度下培养3～4d。微生物得培养与观察课外延伸在以尿素为唯一氮源得培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后,如果PH升高,指示剂将