高中生物2.2.2动物细胞融合技术与单克鹿体知识梳理新人教版选择性必修3

2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体知识梳理（一）动物细胞融合技术1.概念：使_______两个_______或_______多个_______动物细胞结合形成_______一个_______细胞的技术。2.结果：形成的_______杂交细胞______________具有______________原来两个或多个细胞的遗传信息_______。3.原理：_______细胞膜具有一定的流动性______________。4.意义：______________突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能______________。5.诱导融合的常用方法：______________电融合法______________、_______聚乙二醇PEG融合法______________和______________灭活病毒诱导法______________。6.融合实质及完成的标志：_______细胞核的融合_____________________。7.过程：动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。其中细胞膜融合是细胞融合的先导，在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的流动性，细胞融合的实质是核融合。动物细胞融合完成的标志是两个或多个细胞核融合为一个细胞核。如下图（以灭活的病毒诱导为例）：8.应用：①细胞融合技术已经成为研究______________培育生物新品种_______、_______细胞遗传______________、_______细胞免疫_______和______________肿瘤_______等的重要手段。②利用动物细胞融合技术发展起来的______________杂交瘤技术______________，为______________制造单克隆抗体_______开辟了新途径。9.动物细胞融合和植物体细胞杂交比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜具有____一定的流动性__植物细胞的____全能性___细胞膜具有一定的流动性细胞融合前的处理方法用果胶酶和纤维素酶去除细胞壁用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞诱导细胞融合的方法____________电融合法、离心法、聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法__________________PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法______细胞融合成功的标志再生出细胞壁____细胞核__的融合主要用途获得完整的杂种植株主要用于制造___单克隆抗体_________意义打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育______植物新品种______突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能（二）单克隆抗体的制备1.制备过程2.突出优点：______特异性强、灵敏度高______，可大量制备。3.制备单克隆抗体过程中的两次筛选项目第一次筛选第二次筛选筛选原因诱导融合后得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞从小鼠体内提取的B淋巴细胞有很多种，形成的杂交瘤细胞也有很多种筛选方法用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群筛选目的得到杂交瘤细胞得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞4.单克隆抗体制备过程的关键分析（1）对动物免疫的原因：B淋巴细胞要经过免疫过程，即接触抗原，增殖分化为有特异性免疫功能的B淋巴细胞，才能产生相应的抗体，所以，与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实际上是浆细胞。（2）杂交瘤细胞具备双亲的遗传物质，不仅具有浆细胞产生特异性抗体的能力，还具有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的能力，从而可以克服单纯B淋巴细胞不能无限增殖的缺点，而大量生产单克隆抗体。5.实际应用：（1）作为______诊断试剂______；①多种疾病的诊断；②病原体的鉴定；③其他类型诊断。（2）用于治疗疾病和______运载药物______：与药物结合，制成______________抗体-药物偶联物（ADC）______________，杀伤癌细胞；ADC通常由__