医院环境等有关的微生物监测

医院环境等有关微生物监测临床检验中心微生物室

11医院环境等有关的微生物监测医院感染管理是医疗质量控制领域内一项全新的质量管理内容，它保护病人的生命、促进疾病的康复，而且还与广大医务人员的健康和社会公共卫生问题息息相关，是当前医学界十分关注的问题。医院感染不仅影响医疗质量，威胁患者安全，增加医疗费用，同时引发医院危机。2005年12月宿州市立医院眼球事件-铜绿假单胞菌2008年9月西安交大附院新生儿严重医院感染事件-金葡/肺克2009年3月蓟县妇幼保健院新生儿院内感染事件-阴沟肠杆菌11医院环境等有关的微生物监测的依据根据卫生部颁布的《医院感染管理办法》的规定和要求，对医院要进行卫生学监测；监测方法执行《医院消毒技术规范（2012年版）》、《医院空气净化管理规范（2012年版）》和相关技术规范；执行标准按《医院消毒卫生标准（2012年版）》和相关技术规范要求执行。

11医院感染微生物学监测内容医院空气微生物学监测物体表面微生物学监测医务人员手微生物学监测使用中消毒剂微生物学监测医疗器械（如消毒内镜）消毒效果监测医院治疗用水（透析用水）的细菌学检测压力蒸汽灭菌效果生物监测环氧乙烷灭菌效果生物监测低温等离子灭菌效果生物监测血液透析液内毒素监测11采样和检查原则采样后应尽快对样品进行检测，送检时间<=4h,保存于0℃～4℃时,送检时间<=24h。不推荐医院常规开展灭菌物品的无菌检查。当流行病学调查怀疑医院感染事件与灭菌物品有关时，进行相应物品的无菌检查。常规监督检查可不进行致病性微生物检测，涉及疑似医院感染暴发、医院感染暴发调查或工作中怀疑微生物污染时应进行目标微生物的检测。----《医院消毒卫生标准》11一、医院空气微生物学监测监测部门：医院应对感染高风险部门如手术部（室）、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴同室、血液透析中心、烧伤病房的空气净化与消毒质量进行监测。

重点科室每季度一次采样监测---《医院空气净化管理规范》Ⅰ类环境：采用空气洁净技术的诊所，分洁净手术部和其他洁净场所Ⅱ类环境：非洁净手术部（室）；产房；导管室；

血液病区、烧伤病区等保护性隔离区；重症监护病房；新生儿室等Ⅲ类环境：消毒供应中心的检查包装灭菌区和无菌物品存放区；母婴同室；

血液透析中心（室）；其他普通住院病区Ⅳ类环境：感染性疾病科门诊和病区；

普通门急诊及其检查、

治疗（注射、换药等）室

------《医院空气净化管理规范》》11空气的净化（消毒）效果监测（一）采用洁净技术净化空气的监测（二）未采用洁净技术净化空气的监测11采用洁净技术净化空气（消毒）效果的监测1.采样时间及采样前的准备

（1）在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；（2）采样平皿量的准备：平皿量根据手术室的面积与级别而定；每区再加一个平皿做对照实验。2.布点高度和暴露时间：采样点可布置在地面上或不高于地面0.8米的任意高度上。采样时间为30分钟。3.采样过程中的控制：

采样应在手术室处于清洁、静止、密闭的状态下进行；平皿放置妥当后人员迅速离开；采样过程中禁止人员进入,手术室门保持关闭状态；11采用洁净技术净化空气（消毒）效果的监测4.采样点的布置和次序：送风口集中布置的手术间，应对手术区和周边区分别检测；当送风口分散布置时(如辅助用房)，全室统一检测，但不应布置在送风口正下方。放置平皿从总平面中最靠里的房间开始布置，依次向外布，最后人员撤出。每间房间从房间最靠里的房间开始布置，最后布置门附近的点，然后人员撤出。收取培养皿时顺序相反，从最外边的房间开始收，每间房间从最靠门的培养皿开始收，最先布置的皿最后收。布点方法见表。11沉降菌采样布点方法(空态或静态)等级空气洁净程度等级布点方法最少点数正常值：个/30min·φ90皿Ⅰ手术区100级双对角线布点50.2周边区1000级每边内两点80.4Ⅱ手术区1000级单对角线30.75周边区10000级长边内2点短边内1点61.5Ⅲ手术区10000级单对角线32周边区100000每边内1点44Ⅳ300000级面积＞30m2避开送风口正下方45面积≤30m22平板暴露法：采样点可布置在不高于地面80cm的任意高度上。

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局部百级周围千级设置13点局部千级周围万级设置9点

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局部万级周围十万级设置7点局部十万级周围三十万级设置5点

三十万级：面积＞30m2布放4点。面积≤30m2布放2点。（避开送风口正下方）。

11非洁净室的空气净化（消毒）效果的监测1.采样时间：在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；或怀疑医院感染暴发有关时采样。2.布点方法（沉降法）：室内面积≤30m2，设内、中、外对角线上的三点，内、外点应距墙1m处；室内面积＞30m2，设四角及中央五点，四角的布点位置距墙壁1m处113.沉降菌的平板暴露法：暴露前先检查平皿是否污染，是否有气泡及霉点。将普通营养琼脂平皿（直径为9cm）放在室内各采样点处，采样高度为距地面

0.8-1.5m，采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁。

4.暴露时间：Ⅱ类环境15min，Ⅲ类环境5min后盖上平皿盖及时送检。√手臂越过平皿×皿盖朝上×√115.培养和检测:将送检平皿置36±1℃恒温箱培养48h，计数菌落数。若怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。6.结果报告及结果判定：沉降法按平均每皿的菌落数报告：CFU/（暴露时间.直径9cm平皿）7.注意事项⑴采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10min进行采样。⑵平板摆放如取一条对角线，避免离门近的一条对角线。11结果判定：非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数≤４CFU／（15min·直径９cm平皿）。儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数≤4CFU/(5min·直径9cm平皿)。11二、医院物体表面消毒效果的监测监测频率：（1）一般每季度进行一次监测（2）怀疑与医院感染暴发有关时随时进行采样。采样时间:（1）采样时间:在消毒处理后（2）怀疑与医院感染暴发有关时随时进行采样11采样方法用5cmx5cm灭菌规格板/直接涂擦，用浸有无菌生理盐水的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，被采表面＜100cm2，取全部表面；被采面积≥100cm2，取100cm2。

洁净手术部、其他洁净场所，非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌落总数≤5cfu/cm2。儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等；物体表面细菌菌落总数≤10cfu/cm2。11结果计算物体表面菌落总数（cfu/cm2)平皿菌落数×洗脱液稀释倍数采样面积（cm2）=规则物体表面小型物体表面物体表面菌落总数（cfu/件)=平皿菌落数×洗脱液稀释倍数11注意事项⑴门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样，尽量准确估算实际面积。⑵若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应中和剂。⑶检测结果为“0”或细菌菌落总数不足“1”时，应按照要求报告；⑷当怀疑医院感染暴发与物体表面有关时，要进行细菌鉴定。11三、医务人员手和皮肤消毒效果监测1，监测频率：（1）一般每季度进行一次监测（2）当怀疑医院感染暴发与手卫生有关时及时进行监测，并进行相应致病性微生物的检测2.采样方法：（1）采样时间：采取手卫生后包括外科手消毒后，在接触病人或从事医疗活动前采样。（2）被检者5指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指跟到指端往返涂擦2次，1只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子；将棉拭子接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检。11细菌菌落总数计算方法：手卫生合格的判断标准：卫生手消毒：监测的细菌菌落总数应≤10cfu/cm2外科手消毒：监测的细菌菌落总数应≤5cfu/cm2不能检出致病性微生物11注意事项⑴若消毒因子为化学消毒剂，采样液中应加入相应中和剂。⑵采样对象为双手，否者应说明。⑶检测结果为“0”或细菌菌落总数不足“1”时，应按照要求报告。⑷当怀疑医院感染暴发与医务人员手卫生有关时，要进行相应致病性微生物的检测11四、使用中消毒剂染菌量测定用无菌注射器/无菌吸管按无菌操作方法吸取1.0ml被检消毒液，加入9mL中和剂中混匀。醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和，含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒剂用含0.1%硫代硫酸钠中和剂，醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸中和剂……消毒液染菌量计算：消毒液染菌量（CFU/ml）=平均每皿菌落数×10×稀释倍数………（1）使用中灭菌用消毒液：无菌生长；（2）使用中皮肤黏膜消毒液染菌量：≤10CFU/ml，（3）其他使用中消毒液染菌量≤100CFU/ml。监测频率：（1）一般每季度进行一次监测，灭菌剂每月监测一次（如戊二醛）（2）当怀疑医院感染暴发与其有关时及时进行监测，并进行目标微生物的检测。五、内镜消毒灭菌效果监测采样时间：在消毒、灭菌后、使用前进行采样。（一）消毒后内镜:取清洗消毒后内镜，采用无菌注射器抽取50ml含相应中和剂，从活检口注入冲洗内镜管路，并全量收集送检。每季度进行，细菌总数≤20cfu/件，不得检出致病菌。(二）灭菌内镜