专题14 生物技术实践-备战2022年高考生物三年高考真题及模拟题分类汇编（原卷版）

专题14生物技术实践一、单选题1．（2021·浙江高考真题）用白萝卜制作泡菜的过程中，采用适当方法可缩短腌制时间。下列方法中错误的是（）A．将白萝卜切成小块 B．向容器中通入无菌空气C．添加已经腌制过的泡菜汁 D．用沸水短时处理白萝卜块2．（2020·海南高考真题）下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（）A．羊的成熟红细胞可作为提取DNA的材料B．提取植物细胞的DNA时，需要加入一定量的洗涤剂和食盐C．预冷的酒精溶液能抑制核酸水解酶活性，防止DNA水解D．在沸水浴条件下，DNA与二苯胺反应呈现蓝色3．（2020·北京高考真题）为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因，同时避免内源HMA3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是（）A．①+③ B．①+② C．③+② D．③+④4．（2020·江苏高考真题）为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。下列叙述正确的是（）A．倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整B．图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落C．该实验结果因单菌落太多，不能达到菌种纯化的目的D．菌落周围的纤维素被降解后，可被刚果红染成红色5．（2020·江苏高考真题）甲、乙两个实验小组分别进行了“酵母细胞固定化技术”的实验，结果如下图所示。出现乙组实验结果的原因可能为（）A．CaCl2溶液浓度过高 B．海藻酸钠溶液浓度过高C．注射器滴加速度过慢 D．滴加时注射器出口浸入到CaCl2溶液中6．（2020·江苏高考真题）某同学在线提交了在家用带盖玻璃瓶制作果酒和果醋的实验报告，他的做法错误的是（）A．选择新鲜的葡萄略加冲洗，除去枝梗后榨汁B．将玻璃瓶用酒精消毒后，装满葡萄汁C．酒精发酵期间，根据发酵进程适时拧松瓶盖放气D．酒精发酵后去除瓶盖，盖一层纱布，再进行醋酸发酵7．（2020·浙江高考真题）下列关于微生物培养及利用的叙述，错误的是（）A．利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物，而保留利用尿素的微生物B．配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pHC．酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒D．适宜浓度的酒精可使醋化醋杆菌活化8．（2020·浙江高考真题）下列关于淀粉酶的叙述，错误的是A．植物、动物和微生物能产生淀粉酶B．固相淀粉酶比水溶液中的淀粉酶稳定性更高C．枯草杆菌淀粉酶的最适温度比唾液淀粉酶的高D．淀粉被淀粉酶水解形成的糊精遇碘-碘化钾溶液不显色9．（2019·上海高考真题）下图表示利用β-糖苷酶时使用的一种酶的固定化技术，该技术是（）A．交联 B．包埋 C．沉淀 D．载体结合10．（2019·江苏高考真题）下列关于产纤维素酶菌分离及运用的叙述，不合理的是A．筛选培养基中应含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养B．可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌C．在分离平板上长出的菌落需进一步确定其产纤维素酶的能力D．用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆可提高其饲用价值11．（2019·江苏高考真题）下列关于加酶洗涤剂的叙述，错误的是A．加酶洗衣粉中一般都含有酸性脂肪酶B．用加酶洗涤剂能减少洗涤时间并节约用水C．含纤维素酶洗涤剂可以洗涤印花棉织物D．加酶洗衣粉中的蛋白酶是相对耐高温的12．（2019·江苏高考真题）下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是A．利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵B．家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵C．果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反D．毛霉主要通过产生脂肪酶、蛋白酶和纤维素酶参与腐乳发酵13．（2019·江苏高考真题）下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述，错误的是A．用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近B．DNA析出过程中，搅拌操作要轻柔以防DNA断裂C．预冷的乙醇可用来进一步纯化粗提的DNAD．用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热14．（2019·江苏高考真题）下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是A．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌B．接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧C．接种后的培养皿要倒置，以防培养污染D．菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基15．（2019·北京高考真题）筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），实验结果见下表。菌种菌落直径：C（mm）透明圈直径：H（mm）H/C细菌Ⅰ5.111.22.2细菌Ⅱ8.113.01.6有关本实验的叙述，错误的是A．培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质B．筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布C．以上两种细菌均不能将淀粉酶分泌至细胞外D．H/C值反映了两种细菌分解淀粉能力的差异16．（2021·山东烟台市·高三三模）荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量，其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。下列叙述错误的是（）A．引物与探针均具有特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则B．反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈负相关C．Taq酶催化DNA合成的方向总是从子链的5′端到3′端D．若用cDNA作模板，上述技术也可检测某基因转录水平17．（2021·辽宁抚顺市·高三一模）下列关于“检测土壤中某种微生物总数”实验操作的叙述，错误的是（）A．一般选择距地表约3～8cm的土壤层进行取样B．不同微生物均可取104、105、106倍的土壤稀释液进行接种操作C．将实验组和对照组平板倒置，一般在适宜且恒温条件下培养3～4dD．确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300之间的实验组平板进行计数18．（2021·山东烟台市·高三三模）普洱茶“渥堆”为普洱茶的发酵过程，是云南大叶种晒青毛茶经“潮水”（喷洒适量水分）后“渥堆”，在黑曲霉、青霉、根霉、酵母菌等微生物产生的胞外酶、代谢产生的热量和茶叶水分湿热作用的协同下，使茶叶发生了一系列的物理、化学变化，促成了普洱茶风味及良好品质的形成。下列相关叙述错误的是（）A．“潮水”的目的是增加茶叶含水率，为微生物的繁殖创造条件B．“渥堆”过程容易闻到酒香，主要是酵母菌进行无氧呼吸的结果C．“渥堆”过程中定期翻堆的目的只是为了降低堆子的温度D．普洱回甘味觉，可能是因为微生物产生的纤维素酶能降解茶叶中的纤维，增加了茶叶中单糖、二糖的含量19．（2021·山东淄博市·高三三模）微生物实验需要严格的无菌操作以防止污染，下列说法错误的是（）A．紫外线用于实验室空气及实验台表面的消毒B．无菌技术可效地避免实验操作者自身被微生物感染C．为防止DNA污染，PCR用水应来自加热煮沸的自来水D．使用后的培养基在丢弃前需要灭菌处理20．（2021·山东淄博市·高三三模）硝化细菌是化能自养菌，通过NH4+→NO2-→NO3-的氧化过程获取菌体生长繁殖所需的能量，在水产养殖中具有重要作用。下表是分离硝化细菌的培养基配方，下列说法错误的是（）(NH4)2SO40.5gNaCl0.3gFeSO40.03gMgSO40.03gK2HPO40.75gNaH2PO40.25gNa2CO31g琼脂5%定容1000mlA．(NH4)2SO4可作为硝化细菌的氮源和能源B．培养基中的Na2CO3是硝化细菌的主要碳源C．K2HPO4和NaH2PO4能维持培养基的pHD．硝化细菌能清除水体中的铵态氮及亚硝态氮21．（2021·浙江绍兴市·高三二模）在大肠杆菌的培养与分离实验中，下列相关操作正确的是（）A．实验中所需的棉花应使用脱脂棉，因为脱脂棉不易吸水，可以防止杂菌污染B．在LB固体培养基配制过程中，可以用蒸馏水，不需要无菌水C．灭菌后，通常将实验用具放入40~50℃烘箱中烘干以除去灭菌时的水分D．LB固体培养基要用500g/cm2压力灭菌30分钟22．（2021·山东泰安市·高三三模）餐厨垃圾中具有高效降解能力的微生物，可用于餐厨垃圾高效无害化处理，科研人员取一定量的餐厨样品，制备不同浓度的样品稀释液，并将样品接种于利用蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、琼脂配置培养基表面进行培养并分离。下列分析正确的是（）A．牛肉膏主要为微生物提供氮源B．接种时需用力将菌种接种到培养基内C．稀释样品获得单个菌落以便判断菌种类型D．经过培养可筛选出高效降解能力的微生物23．（2021·山东泰安市·高三三模）韩联社2021年4月3日消息，韩国“世界泡菜研究所”（WiKim）近日表示，制作泡菜（Kimchi）的材料——白菜、辣椒、大蒜含有的营养成分能调节人体抗氧系统，对减轻新冠病毒感染症状发挥积极作用。泡菜中萝卜硫素、蒜辣素、辣椒素、姜辣素等营养成分和发酵过程中产生的乳酸菌与人体的抗氧化系统Nrf2相互作用，消除由新冠病毒在体内产生的有害活性酸素。家庭中制作泡菜的方法：新鲜的蔬菜经过整理、清洁后，放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中，然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”，密封后置于温度适宜的地方。下列与此过程相关的叙述不正确的是（）A．用白酒擦拭泡菜坛的目的是消毒B．加入“陈泡菜水”的作用是提供乳酸菌菌种C．发酵过程中，乳酸菌与其他杂菌的竞争越来越强D．若制作的泡菜咸而不酸，可能的原因是加入食盐过多，抑制了乳酸菌的发酵24．（2021·湖北高三二模）不对称PCR是利用不等量的一对引物来产生大量单链DNA的方法。这两种引物分别为限制性引物与非限制性引物，其最佳比例一般为1:50-1:100，在PCR反应的最初10-15个循环中，其扩增产物最初主要是双链DNA，但当限制性引物消耗完后，非限制性引物引导的PCR就会产生大量的单链DNA。下列相关说法错误的是（）A．可以利用不对称PCR来制备探针B．复性温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物C．用不对称PCR方法扩增目的基因时需知道基因的全部序列D．因为双链DNA和单链DNA的分子量大小不同，可通过电泳方法将其分离25．（2021·湖北高三二模）微生物实践和技术中常常涉及到颜色的变化，下列有关说法错误的是（）A．葡萄酒呈红色是因为酵母菌发酵产物中产生了红色的副产物B．DNA的粗提取实验中，以鸡血为原料，最终析出的白色丝状物即为DNAC．可以用滤膜法来测定饮用水中的大肠杆菌的数目，在伊红美蓝培养基上的大肠杆菌菌落呈现黑色D．在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料26．（2021·湖北高三二模）下列关于微生物培养的说法错误的是（）A．倒平板时，培养基倒入培养皿后要立即倒置放置B．实验中锥形瓶、培养皿常用干热灭菌法灭菌C．用记号笔标记培养皿中菌落时应标记在皿底D．纯化培养时，培养皿应倒置培养在恒温培养箱中27．（2021·天津滨海新区·高三三模）产脂肪酶细菌可用于含油废水处理。科研人员用射线照射从土壤中分离的菌株，反复筛选后获得产酶能力提高的菌株，具体流程如图。相关叙述正确的是（）A．步骤①取土壤样品溶于无菌水中制成菌悬液B．步骤②的固体平板可以是以脂肪为唯一氮源的培养基C．步骤②射线照射可引起细菌基因突变或染色体变异D．步骤③透明圈越大的菌落，其脂肪酶活性一定越高28．（2021·辽宁高三三模）以鲜山楂为主要原料酿制的山楂酒，将山楂的营养成分充分释放，更易被人体吸收，具防止疾病的功效和较高的保健价值，是一种天然健康的饮品。下图是探究果酒发酵的装置示意图，下列叙述错误的是（）A．制作山楂酒时，先用清水冲洗1～2次，再去除霉烂部位和枝梗B．制作果酒时如果适时打开阀a几秒钟，关闭阀b，会导致爆瓶C．果酒发酵中通入氮气，酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸D．d排气管通过一个长而弯曲的胶管，可防止空气中杂菌的污染29．（2021·山东日照市·高三三模）养殖池中存在的有毒物质主要是氨和亚硝酸，这两种物质可由硝化细菌吸收利用。研究人员从养殖池池泥中分离出硝化细菌并进行了计数。有关叙述正确的是（）A．需配制一定浓度含氨盐的牛肉膏蛋白胨培养基以分离硝化细菌B．配制的培养基经高压蒸汽灭菌后通常还需要调节pH才能使用C．涂布时，用涂布器沾取少量菌液并均匀地涂布在培养基的表面D．使用涂布平板法统计得到的菌落数目往往比活菌的实际数目少30．（2021·天津高三二模）在进行微生物数量测定时，下列情况会造成结果偏多的是（）A．经过静置后，取培养液的上层进行直接计数B．进行梯度稀释时，每支试管加入了过多的无菌水C．利用显微镜直接计数时，滴加菌液后再盖盖玻片D．平板上有不少菌落是两个细菌长成的菌落连在一起形成的31．（2020·江苏高三二模）下列关于酵母细胞固定化的叙述，正确的是（）A．酵母细胞一般采用物理吸附法或化学结合法进行固定B．刚溶化好的海藻酸钠溶液要及时与已活化的酵母细胞混匀C．制备海藻酸钠溶液时，开始用大火加热，然后用小火加热D．固定化酵母细胞过程中CaCl2溶液的作用是使胶体聚沉，形成稳定的凝胶珠32．（2020·浙江高三一模）下列关于泡菜的制作和亚硝酸盐含量测定的叙述，正确的是（）A．将蔬菜用开水和白酒浸泡1min以加快发酵速度B．在发酵过程中出现白膜可能是由于乳酸菌大量增殖而引起的C．测定亚硝酸盐含量用波长为550nm的光是因为亚硝酸盐对该波长的光有最大的吸收率D．若制作标准曲线时用的比色杯的光程比待测样品的比色杯光程大，则计算出的待测样品中亚硝酸盐的含量偏低33．（2020·上海高三一模）硝化细菌（能利用化学能将无机物转化为有机物）和大肠杆菌的培养基及培养条件中，主要的差别是（）A．碳源 B．琼脂 C．自来水 D．光照34．（2020·江苏连云港市·高三一模）下列关于生物学中常见的几种酶的叙述，正确的是（）A．DNA连接酶将目的基因的黏性末端与载体的黏性末端之间的碱基黏合B．用限制性核酸内切酶从质粒上切下一个目的基因需消耗4个水分子C．Taq酶是PCR仪扩增DNA分子时常用的一种耐高温的DNA连接酶D．在解离根尖分生区细胞时加入纤维素酶有利于提高解离的效果35．（2020·山东青岛市·高三三模）兴趣小组利用葡萄制作果酒和果醋。在该过程中发酵条件的控制至关重要，下列相关叙述正确的是（）A．葡萄汁要装满发酵瓶，造成无氧环境，有利于发酵B．果酒发酵过程温度控制在30℃，果醋发酵过程温度控制在20℃C．用带盖的瓶子进行发酵，每隔12h左右打开瓶盖一次，放出CO2D．在果醋发酵过程中，要持续通过充气口充气，有利于醋酸菌的代谢二、多选题36．（2021·山东淄博市·高三三模）以苹果汁为原料，经酒精发酵、醋酸发酵可制得果醋。下列说法错误的是（）A．酒精发酵阶段和醋酸发酵阶段的适宜温度相同B．酒精发酵阶段和醋酸发酵阶段均有大量气体产生C．在醋酸发酵阶段醋酸杆菌将酒精转化为醋酸D．在醋酸发酵阶段接种乳酸菌可提高醋酸的酸度37．（2021·山东泰安市·高三三模）发酵工程最重要的工作是选择优良的单一菌种，消灭杂菌。筛选微生物的方法包括（）A．根据微生物对碳源需求的差别，使用含有不同碳源的培养基B．根据微生物需要生长因子的种类，在培养基中增减不同的生长因子C．根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸D．根据微生物对抗生素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗生素38．（2021·江苏盐城市·高三三模）有机磷农药（如对硫磷，俗你1605）一般都具有很强的毒性，且结构稳定难以清除，易在土壤、果蔬中残留，对人体造成潜在的危害。为了获得高效降解有机磷农药的微生物，研究人员设计了下图所示的实验方案。下列有关叙述正确的是（）

A．选取的土壤样品不需进行灭菌处理B．该方案中的CNFM是选择培养基C．平板培养的目的是为了加速微生物生长D．根据检测结果，选出对硫磷浓度最低的锥形瓶内的微生物39．（2020·山东淄博市·高三三模）某同学做“微生物的分离与培养”实验，所配制的培养基配方如下表所示，相关叙述错误的是（）葡萄糖尿素KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O琼脂10g10g14g2．1g0．2g15gA．该培养基为选择培养基，可用于分离尿素分解菌B．若要对培养的微生物进行计数，接种时可采用稀释涂布平板法或平板划线法C．对分离出的细菌进行鉴定时，可在培养基中加入刚果红，若pH升高，指示剂变红D．利用该培养基分离得到的细菌能合成葡萄糖苷酶，将葡萄糖分解获取能量40．（2020·山东滨州市·高三三模）下图是某生物兴趣小组用同一种培养基培养的酵母菌卡通形象菌落，有关说法正确的是（）A．培养酵母菌可以采用麦芽汁琼脂培养基B．实现图中卡通形象菌落的接种方法是稀释涂布平板法C．“乔治”和“佩奇”的颜色不同是因为两个平板中的酵母菌不同D．图中卡通形象清晰完整，说明培养过程中无菌操作符合规范三、综合题41．（2021·河北高考真题）葡萄酒生产过程中会产生大量的酿酒残渣（皮渣）。目前这些皮渣主要用作饲料或肥料，同时研究者也采取多种措施拓展其利用价值。回答下列问题：（1）皮渣中含有较多的天然食用色素花色苷，可用萃取法提取。萃取前将原料干燥、粉碎的目的分别是__________，萃取效率主要取决于萃取剂的__________。萃取过程需要在适宜温度下进行，温度过高会导致花色苷__________。研究发现，萃取时辅以纤维素酶、果胶酶处理可提高花色苷的提取率，原因是____________________。（2）为了解皮渣中微生物的数量，取10g皮渣加入90mL无菌水，混匀、静置后取上清液，用稀释涂布平板法将0．1mL稀释液接种于培养基上。104倍稀释对应的三个平板中菌落数量分别为78、91和95，则每克皮渣中微生物数量为__________个。（3）皮渣堆积会积累醋酸菌，可从中筛选优良菌株。制备醋酸菌初筛平板时，需要将培养基的pH调至__________性，灭菌后须在未凝固的培养基中加入无菌碳酸钙粉末、充分混匀后倒平板，加入碳酸钙的目的是______________________________。培养筛选得到的醋酸菌时，在缺少糖源的液体培养基中可加入乙醇作为__________。（4）皮渣堆积过程中也会积累某些兼性厌氧型乳酸菌。初筛醋酸菌时，乳酸菌有可能混入其中，且两者菌落形态相似。请设计一个简单实验，区分筛选平板上的醋酸菌和乳酸菌_________。（简要写出实验步骤和预期结果）42．（2021·全国高考真题）PCR技术可用于临床的病原菌检测。为检测病人是否感染了某种病原菌，医生进行了相关操作：①分析PCR扩增结果；②从病人组织样本中提取DNA；③利用PCR扩增DNA片段；④采集病人组织样本。回答下列问题：（1）若要得到正确的检测结果，正确的操作顺序应该是_________（用数字序号表示）。（2）操作③中使用的酶是_________，PCR反应中的每次循环可分为变性、复性、________三步，其中复性的结果是_______。（3）为了做出正确的诊断，PCR反应所用的引物应该能与_______特异性结合。（4）PCR（多聚酶链式反应）技术是指_______。该技术目前被广泛地应用于疾病诊断等方面。43．（2021·广东高考真题）中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜（甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖）为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值。工艺流程如图。回答下列问题：（1）为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，可在液体培养基中将蔗糖作为___________，并不断提高其浓度，经多次传代培养（指培养一段时间后，将部分培养物转入新配的培养基中继续培养）以获得目标菌株。培养过程中定期取样并用___________的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。此外，选育优良菌株的方法还有___________等。（答出两种方法即可）（2）基于菌株H嗜盐、酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60g/L，pH为10，菌株H可正常持续发酵60d以上。该系统不需要灭菌的原因是___________。（答出两点即可）（3）研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵条件中___________可能是高密度培养的限制因素。（4）菌株H还能通过分解餐厨垃圾（主要含蛋白质、淀粉、油脂等）来生产PHA，说明其能分泌___________。44．（2021·湖南高考真题）大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12~38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问题：（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即_________。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以_________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于_________培养基。（2）配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是_________。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是_________。（3）简要写出测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路_________。（4）为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株_________，理由是_________。菌株秸秆总重(g)秸秆残重(g)秸秆失重（%）纤维素降解率（%）A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.3245．（2021·全国高考真题）加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。某同学通过实验比较了几种洗衣粉的去渍效果（“+”越多表示去渍效果越好），实验结果见下表。加酶洗衣粉A加酶洗衣粉B加酶洗衣粉C无酶洗衣粉(对照)血渍++++++++油渍++++++++根据实验结果回答下列问题：（1）加酶洗衣粉A中添加的酶是__________；加酶洗衣粉B中添加的酶是__________；加酶洗衣粉C中添加的酶是__________。（2）表中不宜用于洗涤蚕丝织物的洗衣粉有__________，原因是___________。（3）相对于无酶洗衣粉，加酶洗衣粉去渍效果好的原因是___________。（4）关于酶的应用，除上面提到的加酶洗衣粉外，固定化酶也在生产实践中得到应用，如固定化葡萄糖异构酶已经用于高果糖浆生产。固定化酶技术是指___________。固定化酶在生产实践中应用的优点是_________（答出1点即可）。46．（2021·全国高考真题）工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程。利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。回答下列问题：（1）米曲霉发酵过程中，加入大豆、小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质，大豆中的___________可为米曲霉的生长提供氮源，小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供___________。（2）米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的_____、______能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分，如将蛋白质分解为小分子的肽和__________。米曲霉发酵过程需要提供营养物质、通入空气并搅拌，由此可以判断米曲霉属于___________（填“自养厌氧”“异养厌氧”或“异养好氧”）微生物。（3）在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌属于___________（填“真核生物”或“原核生物”）；添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是___________。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素，据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是___________（答出1点即可）。47．（2021·浙江高考真题）回答下列（一）、（二）小题：（一）某环保公司从淤泥中分离到一种高效降解富营养化污水污染物的细菌菌株，制备了固定化菌株。（1）从淤泥中分离细菌时常用划线分离法或________法，两种方法均能在固体培养基上形成________。对分离的菌株进行诱变、________和鉴定，从而获得能高效降解富营养化污水污染物的菌株。该菌株只能在添加了特定成分X的培养基上繁殖。（2）固定化菌株的制备流程如下；①将菌株与该公司研制的特定介质结合；②用蒸馏水去除________；③检验固定化菌株的________。菌株与特定介质的结合不宜直接采用交联法和共价偶联法，可以采用的2种方法是________。（3）对外，只提供固定化菌株有利于保护该公司的知识产权，推测其原因是________。（二）三叶青为蔓生的藤本植物，以根入药。由于野生三叶青对生长环境要求非常苛刻，以及生态环境的破坏和过度的采挖，目前我国野生三叶青已十分珍稀。（1）为保护三叶青的________多样性和保证药材的品质，科技工作者依据生态工程原理，利用________技术，实现了三叶青的林下种植。（2）依据基因工程原理，利用发根农杆菌侵染三叶青带伤口的叶片，叶片产生酚类化合物，诱导发根农杆菌质粒上vir系列基因表达形成________和限制性核酸内切酶等，进而从质粒上复制并切割出一段可转移的DNA片段（T-DNA）。T-DNA进入叶片细胞并整合到染色体上，T-DNA上rol系列基因表达，产生相应的植物激素，促使叶片细胞持续不断地分裂形成________，再分化形成毛状根。（3）剪取毛状根，转入含头孢类抗生素的固体培养基上进行多次________培养，培养基中添加抗生素的主要目的是________。最后取毛状根转入液体培养基、置于摇床上进行悬浮培养，通过控制摇床的________和温度，调节培养基成分中的________，获得大量毛状根，用于提取药用成分。48．（2020·江苏高考真题）如果已知一小段DNA的序列，可采用PCR的方法，简捷地分析出已知序列两侧的序列，具体流程如下图（以EcoRI酶切为例）：请据图回答问题：（1）步骤I用的EcoRI是一种__________酶，它通过识别特定的__________切割特定位点。（2）步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3′-羟基与5′-磷酸间形成__________；PCR循环中，升温到95℃是为了获得__________；TaqDNA聚合酶的作用是催化__________。（3）若下表所列为已知的DNA序列和设计的一些PCR引物，步骤Ⅲ选用的PCR引物必须是__________（从引物①②③④中选择，填编号）。DNA序列（虚线处省略了部分核苷酸序列）已知序列PCR引物①5′-AACTATGCGCTCATGA-3′②5′-GCAATGCGTAGCCTCT-3′③5′-AGAGGCTACGCATTGC-3′④5′-TCATGAGCGCATAGTT-3′（4）对PCR产物测序，经分析得到了片段F的完整序列。下列DNA单链序列中（虚线处省略了部分核苷酸序列），结果正确的是_________________。A．5′-AACTATGCG-----------AGCCCTT-3′B．5′-AATTCCATG-----------CTGAATT-3′C．5′-GCAATGCGT----------TCGGGAA-3′D．5′-TTGATACGO----------CGAGTAC-3′49．（2020·江苏高考真题）产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：（1）常规微生物实验中，下列物品及其灭菌方法错误的是__________（填编号）。编号①②③④物品培养基接种环培养皿涂布器灭菌方法高压蒸汽火焰灼烧干热臭氧（2）称取1．0g某土壤样品，转入99mL无菌水中，制备成菌悬液，经__________后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0．1mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了46个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌__________个。（3）为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行__________育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以__________为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径__________的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。（4）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株__________进行后续相关研究，理由是__________。50．（2020·浙江高考真题）回答下列（一）、（二）小题：（一）回答与柑橘加工与再利用有关的问题：（1）柑橘果实经挤压获得果汁后，需用果胶酶处理，主要目的是提高果汁的__________。为确定果胶酶的处理效果，对分别加入不同浓度果胶酶的果汁样品，可采用3种方法进行实验：①取各处理样品，添加相同体积的__________，沉淀生成量较少的处理效果好。②对不同处理进行离心，用比色计对上清液进行测定，OD值__________的处理效果好。③对不同处理进行__________，记录相同体积果汁通过的时间，时间较短的处理效果好。（2）加工后的柑橘残渣含有抑菌作用的香精油及较多的果胶等。为筛选生长不被香精油抑制且能高效利用果胶的细菌，从腐烂残渣中分离得到若干菌株，分别用无菌水配制成__________，再均匀涂布在LB固体培养基上。配制适宜浓度的香精油，浸润大小适宜并已__________的圆形滤纸片若干，再贴在上述培养基上。培养一段时间后，测量滤纸片周围抑制菌体生长形成的透明圈的直径大小。从直径__________的菌株中取菌接种到含有适量果胶的液体培养基试管中培养，若有果胶酶产生，摇晃试管并观察，与接种前相比，液体培养基的__________下降。（二）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：（1）天然农杆菌的Ti质粒上存在着一段DNA片段（T-DNA），该片段可转移并整合到植物细胞染色体上。为便于转基因植物在组织培养阶段的筛选，设计重组Ti质粒时，应考虑T-DNA中要有可表达的目的基因，还需要有可表达的__________。（2）结合植物克隆技术进行转基因实验，为获得转基因植株，农杆菌侵染的宿主一般要选用具有优良性状、较高的遗传稳定性、__________及易被农杆菌侵染等特点的植物材料。若植物材料对农杆菌不敏感，则可用__________的转基因方法。（3）利用带侧芽的茎段获得丛状苗的过程与利用茎段诱导产生愈伤组织再获得丛状苗的过程相比，前者总培养时间__________，且不经历__________过程，因而其遗传性状稳定，是大多数植物快速繁殖的常用方法。（4）与发芽培养基相比，配制转基因丛状苗生根培养基时，可根据实际情况适当添加__________，促进丛状苗基部细胞分裂形成愈伤组织并进一步分化形成__________，最终形成根。还可通过改变MS培养基促进生根，如_____（A．提高蔗糖浓度B．降低培养基浓度C．提高大量元素浓度D．不添加琼脂）。51．（2020·全国高考真题）水果可以用来加工制作果汁、果酒和果醋等。回答下列问题：（1）制作果汁时，可以使用果胶酶、纤维素酶等提高水果的出汁率和澄清度。果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、________（答出2种即可）。纤维素酶可以分解植物______________（填细胞膜或细胞壁）中的纤维素。（2）用果胶酶处理果泥时，为了提高出汁率，需要控制反应的温度，原因是__________________。（3）现有甲乙丙三种不同来源的果胶酶，某同学拟在果泥用量、温度、pH等所有条件都相同的前提下比较这三种酶的活性。通常，酶活性的高低可用_____________来表示。（4）获得的果汁（如苹果汁）可以用来制作果酒或者果醋，制作果酒需要__________________菌，这一过程中也需要O2，O2的作用是__________________。制作果醋需要醋酸菌，醋酸菌属于_____________（填好氧或厌氧）细菌。52．（2020·全国高考真题）研究人员从海底微生物中分离到一种在低温下有催化活性的α-淀粉酶A3，并对其进行了研究。回答下列问题：（1）在以淀粉为底物测定A3酶活性时，既可检测淀粉的减少，检测应采用的试剂是_________，也可采用斐林试剂检测________的增加。（2）在A3的分离过程中可采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度，通常会在凝胶中添加SDS，SDS的作用是___________________和___________________。（3）本实验中，研究人员在确定A3的最适pH时使用了三种组分不同的缓冲系统，结果如图所示。某同学据图判断，缓冲系统的组分对酶活性有影响，其判断依据是______________。（4）在制备A3的固定化酶时，一般不宜采用包埋法，原因是___________________________（答出1点即可）。53．（2020·全国高考真题）某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。回答下列问题：（1）实验时，盛有水或培养基的摇瓶通常采用_______________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_______________。甲、乙培养基均属于______________培养基。（2）实验中初步估测摇瓶M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布100μL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释________________倍。（3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的S超过某一浓度时，某菌株对S的降解量反而下降，其原因可能是________________（答出1点即可）。（4）若要测定淤泥中能降解S的细菌细胞数，请写出主要实验步骤________________。（5）上述实验中，甲、乙两种培养基所含有的组分虽然不同，但都能为细菌的生长提供4类营养物质，即________________。54．（2020·浙江高考真题）回答下列（一）、（二）小题：（一）回答与泡菜制作有关的问题：（1）用萝卜等根菜类蔬菜制作泡菜，用热水短时处理，可抑制某些微生物产生_____，从而使成品泡菜口感较脆。同时，该处理也会使泡菜发酵时间缩短，其原因是_______。（2）泡菜发酵初期，由于泡菜罐加盖并水封，会使______菌被逐渐抑制。发酵中期，乳酸菌大量繁殖，会使______菌受到抑制。发酵后期，乳酸生产过多，会使乳酸菌受到抑制。（3）从泡菜汁中可分离制作酸奶的乳酸菌，首先对经多次发酵的泡菜汁进行过滤，然后取滤液进行______，再用______的方法在某种含牛乳的专用的培养基中进行初步筛选。该培养基必须含有______，以便于观察是否产酸。（4）自然界中醋杆菌常与乳酸菌共同生长。若要筛选出醋杆菌，则其专用的培养基中应添加______。（二）回答与基因工程和植物克隆有关的问题：（1）为了获取某植物叶片无菌的原生质体，先将叶片经表面消毒并去除下表皮，再将其置于经______处理的较高渗透压的混合酶液中。酶解后，经多次离心获得原生质体。然后测定该原生质体的活性，可采用的方法有______（答出2点即可）。（2）若要获得已知序列的抗病基因，可采用______或PCR的方法。为了提高目的基因和质粒重组的成功率，选择使用______，对含目的基因的DNA片段进行处理，使其两端形成不同的粘性末端，对质粒也进行相同的处理，然后用DNA连接酶连接形成重组质粒。通过在大肠杆菌中______，以获得大量的重组质粒，最终将其导入原生质体中。（3）原生质体在培养过程中，只有重新形成______后，才可进行有丝分裂。多次分裂形成的小细胞团可通过______或器官发生的途径再生植株。（2019·上海高考真题）2019年7月，《上海市生活垃圾分类管理条例》施行，生活垃圾分类成为市民的日常生活方式，生活垃圾分类中的湿垃圾是指可被微生物降解的有机物。55．下列属于湿垃圾的是______。①剩余饭菜②玻璃碎片③植物落叶④过期面包⑤果皮果壳56．湿垃圾降解后才能被植物利用，是因为根毛细胞难吸收。A．尿素 B．矿物质 C．H2O D．大分子有机物处理是垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解。下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。57．培养基中加入碳源是____。根据上图，将菌液接种到培养基的方法是___。58．据图，菌落①与菌落②周围透明圈的大小不同，原因可能是两个菌群。A．对碘液分解能力不同 B．分泌的淀粉酶活性不同C．合成淀粉量不同 D．受淀粉抑制程度不同59．对筛选到的菌落①与菌落②进行鉴定，发现①属于真菌，②属于细菌，两者的本质区别是。A．细胞膜的成分 B．有无细胞结构 C．核糖体的有无 D．有无完整核膜60．若垃圾分类不当，在湿垃圾中混入了过期的抗生素或电池等，将不利于微生物分解，原因是。A．会抑制微生物生长 B．是微生物的生长因子C．促进有机物的合成 D．为微生物提供碳源和氮源61．（2019·海南高考真题）回答下列问题。（1）玫瑰精油可用玫瑰花瓣为原料，采用水蒸气蒸馏法提取。水蒸气蒸馏法的原理是________________________。在进行蒸馏时，冷凝管的进水口比出水口___________（填“高”或“低”）。蒸馏收集到的乳浊液是玫瑰精油和水的混合物，要得到玫瑰精油，需要向乳浊液中加入NaCl，其目的是________________；得到的油层还需要加入无水Na2SO4，其目的是_______________。（2）某同学在通过发酵制作果酒时，发现在制作原料中添加一定量的糖，可以提高酒精度，原因是________________________。在家庭以葡萄为原料制作葡萄酒时，可以不添加酵母菌，原因是________________________；在制作葡萄酒的过程中，如果密封不严混入空气，发酵液会变酸，可能的原因是__________________。62．（2019·全国高考真题）回答下列与细菌培养相关的问题。（1）在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是_____________（填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”）。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是________。硝化细菌在没有碳源的培养基上______（填“能够”或“不能”）生长，原因是____________。（2）用平板培养细菌时一般需要将平板____________（填“倒置”或“正置”）。（3）单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是____________。（4）有些使用后的培养基在丢弃前需要经过____________处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。63．（2019·全国高考真题）已知一种有机物X（仅含有C、H两种元素）不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌（目标菌）。Ⅰ号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X（5g/L）。Ⅱ号培养基：氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量），X（15g/L）。Ⅲ号培养基：氯化钠（5g/L），硝酸铵（3g/L），其他无机盐（适量）。X（45g/L）。回答下列问题。（1）在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是___________。Ⅱ、Ⅲ号培养基为微生物提供碳源的有机物是_________。（2）若将土壤悬浮液种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会_________，其原因是_________。（3）Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是______________。（4）假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供_________和_________。64．（2019·浙江高考真题）回答下列（一）、（二）小题：（一）回答与果胶和果胶酶有关的问题：（1）通常从腐烂的水果上分离产果胶酶的微生物，其原因除水果中果胶含量较高外，还因为______。（2）为了获得高产果胶酶微生物的单菌落，通常对分离或诱变后的微生物悬液进行______。（3）在某种果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使______。果汁生产中的残渣果皮等用于果胶生产，通常将其提取液浓缩后再加入______。使之形成絮状物，然后通过离心、真空干燥等步骤获得果胶制品。（4）常用固定化果胶酶处理含果胶的污水，其主要优点有______和可连续处理等。在建立和优化固定化果胶酶处理工艺时，除考虑果胶酶的活性和用量、酶反应的温度、pH、作用时间等环境因素外，还需考虑的主要有______和______。（二）回答与利用生物技术培育抗病品种有关的问题：（1）通过抗病性强的植株获取抗病目的基因有多种方法。现已获得纯度高的抗病蛋白（可作为抗原），可通过______技术获得特异性探针，并将______中所有基因进行表达，然后利用该探针，找出能与探针特异性结合的表达产物，进而获得与之对应的目的基因。（2）将上述抗病基因通过转基因的方法导入植物的分生组织可获得抗病性强的植株。若在试管苗期间用分子水平方法判断抗病基因是否表达，应检测______（A．质粒载体B．转录产物C．抗性基因D．病原微生物）。（3）植物细胞在培养过程中往往会发生______，可利用这一特性筛选抗致病真菌能力强的细胞。筛选时在培养基中加入______，并将存活的细胞进一步培养至再生植株。若利用______培养建立的细胞系用于筛选，则可快速获得稳定遗传的抗病植株。（4）用抗病品种与高产品种进行杂交育种过程中，有时会遇到因胚发育中止而得不到可育种子的情况。若要使该胚继续发育获得植株，可采用的方法是______。65．（2019·浙江高考真题）回答下列（一）、（二）小题：（一）回答与微生物培养及应用有关的问题：（1）对培养基进行高压蒸汽灭菌时，灭菌时间应从__________时开始计时。对于不耐热的液体培养基，一般可将其转人G6玻璃砂漏斗中，采用__________方式可较快地进行过滤灭菌。（2）酿造果醋相比，利用大米、高粱等富含淀粉的原料制醋，需增加__________的过程。某醋化醋杆菌培养基由蛋白胨、酵母提取物和甘露醇组成，其中甘露醇的主要作用是__________。（3）为筛选胞外A–淀粉酶分泌型菌种，一般从__________（A果园树下B肉类加工厂周围C米酒厂周围D枯树周围）获得土样，用无菌水稀释，涂布到含有淀粉的选择培养基上培养，一段时间后在培养基表面滴加碘液，可在菌落周围观察到透明的水解圈。若要筛选酶活性较高的菌种，需挑选若干个__________比值大的菌落，分别利用液体培养基振荡培养进行扩增。然后将培养液离心，取__________用于检测酶活性。（二）某农业生态工程示意图如下，回答下列问题；（1）该农业生态工程体现的生态工程原理主要是__________。对该工程的经济效益分析，可从系统内部的投入和产出、__________、系统的有效贡献等三方面进行核算。（2）若要提高该工程的经济效益，可采用农业生产的__________技术在桑基上再种植大豆，也可采用农业生态工程的__________技术放养适量的鸡鸭等动物以调整该工程的产业结构。（3）某小组应用基因工程方法开展适用于该生态工程的抗虫植物改良研究。为提高将重组DNA分子导入受体细胞的效率，除考虑导入方法、筛选条件、防止污染外，还需考虑的主要因素有____________________（答出2点即可）。农杆菌介导法是目前植物转基因的常用方法，该方法的基本过程是农杆菌感染植物时，__________，并将其插入到受体细胞的基因组中。欲获得稳定遗传的抗虫性强的转基因植物品种，则转入的抗虫基因必须能在受体细胞中__________。66．（2021·浙江高三三模）回答下列（一）、（二）小题：（一）请回答与农作物秸秆利用有关的问题：（1）欲从土壤中分离高产秸秆纤维素酶的微生物，可将土壤溶液适度_________后接种于以_________为唯一碳源的培养基上，同时还应在培养基中添加适量的秸秆纤维素显色剂，目的是_________，选择有透明圈且_________的菌落进行保存并扩大培养。（2）研究人员利用上述方法分离获得了甲、乙、丙三种微生物，为比较三种微生物产生的纤维素酶的活性大小，可将等量的三种酶与等量且足量的秸秆纤维素悬液混合，反应相同时间后，经_________获取其上清液，加入显色剂后测定其_________，比较测定的结果即可推断三种纤维素酶的活性大小。（3）生产上常用农作物秸秆酸解产生的葡萄糖发酵生产燃料乙醇，生产过程一般无需严格灭菌，这是因为在厌氧、_________环境中，绝大多数微生物生长受到抑制。为使生产连续进行且获得相对纯净的燃料，可采用酵母细胞的_________技术。（二）马铃薯易被致病疫霉感染而患晩疫病，非洲甜菊中的TLP基因可使其具有抗晩疫病能力，现利用基因工程和植物克隆技术培育抗病马铃薯新品种。请回答：（1）为获得TLP基因，可从包含TLP基因的基因文库中通过核酸分子杂交或_________技术直接对基因文库中的DNA序列进行筛选，也可通过_________技术利用基因文库的表达产物进行筛选（2）利用农杆菌将TLP基因导入受体细胞的一般方法是将消毒后的马铃薯叶片剪成小片，在_________溶液中浸泡后，取出、消毒并转移至添加_________的包含适当营养物质和植物生长调节剂配比的MS培养基上进行培养。把叶片剪成小片的主要目的有二，一是使叶片受伤，引起其释放酚类物质以利于_________进入受体细胞；二是剪成小片增大_________了，有利于提高转化效率。（3）在实验室经多次筛选后获得的抗真菌组培苗需进一步锻炼后才能用于野外种植，炼苗过程中，需逐步降低环境_________并增加_________。67．（2021·天津北辰区·高三一模）生活饮用水已经过沉淀、过滤、加氯消毒等处理，含微生物很少。我国生活饮用水水质标准（GB5749—85）中规定生活饮用水中细菌总数不得大于100个/mL，总大肠杆菌群不得大于3个/L。某同学欲检测家中自来水中大肠杆菌含量，对自来水中大肠杆菌进行了培养、计数和鉴定。回答下列问题：（1）该同学用涂布平板法检测大肠杆菌数：配制的培养基中含有蛋白膏、酵母膏、NaCl、H2O和X，其中蛋白胨可为大肠杆菌提供_______________________________和维生素，X是_________________。（2）该同学用滤膜法检测大肠杆菌数，其大致流程为：先用滤膜过滤已知体积的待测水样，水样中的大肠杆菌留在滤膜上，其他杂质则被滤出，再将滤膜转移到培养基上培养并统计菌落数量。该方法所统计样品中含菌数往往偏低的原因是________________________________________。（3）为了检测培养基灭菌是否彻底，需要设置对照，其做法是将灭菌的________（填“接种”或“未接种"）培养基放在恒温无菌箱中进行培养。取10mL自来水，稀释10倍后，取10ml稀释液进行过滤，将滤膜置于培养基上进行培养，获得了30个目的菌落，则每毫升自来水中含有目的菌__________个。（4）下图表示培养和纯化大肠杆菌的部分操作步骤，下列叙述错误的是（多选）__________。A．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置B．步骤②接种环在火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线C．步骤③多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落D．步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数68．（2021·广东茂名市·高三三模）桉叶油富含黄酮类、三萜类等具有清热解毒，消炎杀菌，祛风除湿等功效，其化学性质与玫瑰精油相似。研究小组想尝试用微生物（霉菌）发酵的方法提取桉叶油。请回答下列问题。（1）桉叶油具有挥发性强，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏等特点，故提取的方法可以用______。提取时应该选择______（填“新鲜”或“干燥”）的叶片，原因____________。（2）用微生物发酵提取桉叶油的方法为：在粉碎的桉叶中，接种霉菌，于28-30℃培养3-4d，获得桉叶发酵物。其中，用平板划线法纯化霉菌，通常划线的工具是____________，其灭菌的方法是____________。某个平板共划线6个区域，则该过程中需要从试管中蘸取______次菌液。（3）桉叶油具有消炎杀菌作用，在使用抗生素过程中，抗生素对细菌起到了定向选择的作用，使细菌的抗药性基因频率升高。桉叶油代替抗生素的优越性在于____________。69．（2021·浙江绍兴市·高三二模）回答下列（一）、（二）小题：（一）回答果酒与果醋制作有关的问题：（1）用干酵母作为发酵菌酿制果酒时，需先将适量干酵母放在小烧杯中，加入少量温水（<40℃）和一小撮蔗糖制成________，待其出现________，表明干酵母已活化。（2）酵母菌在生长繁殖和进行发酵时，会产生少量尿素，尿素会与酒精反应生成有害物质，可用脲酶处理予以分解，但在实际生产过程中不宜直接将脲酶加入酒体中，原因有________（答出1点），可将脲酶和海藻酸钠混合，用注射器滴入凝结液中形成珠粒，这种固定化酶的方法称为________。（3）用果酒酿制果醋时，发酵瓶中先装八分满的经________处理的锯末，然后加入含有醋杆菌的________使醋杆菌附着在锯末上，成为固定化醋杆菌。采用固定化醋杆菌而不是固定化酶进行醋酸发酵的主要原因是________。（4）为进一步测定果醋中还原糖的含量，可以在发酵产物中加入还原糖显色剂，用光电比色法测定显色产物的光密度值，并将测定值与________比对，计算其含量。（二）回答与转基因植物的培育和植物克隆有关的问题：木瓜环斑病毒（PRV）是一种对木瓜危害极大的病毒，科学家通过基因工程技术将抗环斑病毒基因（PRSV）导入木瓜中表达出抗环斑病蛋白，从而获得抗环斑病的木瓜。（1）构建重组DNA分子时，使用两种限制性核酸内切酶处理，优点是可防止目的基因和切割后的载体DNA自身环化及________。为使PRSV高效表达，需要对重组载体上目的基因相关的________序列进行修饰。（2）获取活性强的农杆菌菌液，通过冰浴、离心、去上清液等相应处理，加入适量预冷的含15%甘油的________溶液，制成感受态农杆菌细胞。转化后的农杆菌要正常培养一段时间，才能置于含特定抗生素的培养基上筛选，正常培养一段时间的目的是________。优先选用木瓜________（受伤的/完好的）叶片与含重组质粒的农杆菌共培养完成转化，促使其不断分裂形成愈伤组织。（3）试管苗需锻炼后才可移栽至大田，移栽时需先洗去________以免栽后发霉。（4）为了快速获得稳定遗传的抗环斑病木瓜，可选择________培养获得的细胞系作为受体细胞。70．（2021·河北沧州市·高三三模）土壤中的难溶性磷酸盐积累会造成土壤板结，溶磷微生物能将难溶性磷酸盐转变成植物可吸收利用的磷酸盐。研究人员将采集到的土壤接种到含有难溶性磷酸盐及必需营养物质的培养基中，经过如图所示的系列分离纯化过程，最终筛选出了溶磷能力强的拜莱青霉菌。回答下列问题：（1）培养基含有的营养物质有无机盐、____________。为筛选到溶磷能力强的拜莱青霉菌，培养基中还应加入链霉素（抗生素）以避免____________生长而带来的污染。（2）实验过程中，振荡培养有利于物质充分利用，也能为目的菌的生长繁殖提供充足的_____________。培养若干天后，应选择培养瓶中难溶性磷酸盐含量______________的培养液，接入新的培养液中连续培养，该操作的目的是____________。（3）将菌液接种到固体培养基上继续培养，以便于_____________。获得的菌种可采用____________的方法进行长期保存。71．（2021·云南曲靖市·高三二模）餐饮行业会产生大量的废弃油脂，去除废弃油脂能有效的降低环境污染。为了获得高效分解脂肪的微生物，某生物兴趣小组从富含油脂的水体中分离获得了3种脂肪分解菌甲、乙、丙。回答下列问题：（1）选取饭店附近排污渠的含油脂废水作为样本，采样约10g，立即装于试管内，此试管使用前需要经过__________处理。（2）样品分离培养前，一般需要将菌液进行__________处理，然后吸取0．2ml菌液涂布到营养琼脂培养基平板上，置于37℃恒温培养箱内培养24h，记录菌落总数。将分离出的菌株按照菌落__________等表观特征初步分类。（3）上述步骤筛选出的菌株分别接种到含“花生油”的琼脂培养基平板上，37℃恒温培养箱中培养24h，筛选出油脂降解菌，培养基中“花生油”为菌种繁殖提供__________。在该培养基还需要加入中性红染料（中性红为脂溶性染料，遇酸为红色，遇碱为黄色），挑选菌株要挑选显__________降解圈的菌株，并且选颜色较_________（填“深”或“浅”）的为宜。（4）对选出的分解脂肪能力强的脂肪分解菌进行纯化培养，若用稀释涂布平板法接种，涂布到培养基表面的菌液量不宜过多，否则会导致培养基表面菌体堆积而不能获得______；若要对该脂肪分解菌进行计数，不能用平板划线法接种，其原因是_____________________。72．（2021·广东梅州市·高三一模）随着生物科学的发展，微生物的应用范围在生活中越来越广泛。例如∶微生物在酒类酿造、食品发酵、药物研发和污水处理等方面都扮演重要角色。请回答下列关于微生物的问题∶（1）培养微生物的培养基的营养成分一般都有水、无机盐、____等。此外，还要满足微生物生长对pH、温度、湿度、氧气及特殊营养物质的需求。灭菌后的培养基在平板倒好后，需要随机选取若干个平板先行培养一段时间，这样做的目的是__________。（2）滤膜法常用来检测饮用水中的大肠杆菌是否超标，这种测定方法的主要原理是大肠杆菌的代谢产物能与培养基中添加的伊红-美蓝反应，使菌落颜色呈___________。若要长时间保藏大肠杆菌，可采用的方法是___________。（3）果醋已经成为我们日常生活中饭桌上的常用饮料，具有一定的保健功能。果醋在发酵过程中利用的菌种主要是_____，其能产生多种酶，通过_________技术将其制作成商品重复使用。73．（2021·江苏南通市·高三三模）某同学为了探究新鲜的花园土中是否存在微生物，进行了如下实验：取灭菌后的锥形瓶，加入新鲜花园土。将50mL牛奶煮沸，倒入锥形瓶中，锥形瓶口用棉花团堵住，装置如图所示。每日观察牛奶的情况，共观察4天。请回答下列问题：（1）该实验设计中还缺少对照实验，对照实验的设计应该是____________。牛奶在该实验中的作用是____________。（2）用棉花团堵住锥形瓶的目的是____________；将牛奶进行煮沸的目的是____________，加入锥形瓶时要注意____________；实验中的操作都需要____________旁进行。（3）实验结束后，测定对照组和实验组的牛奶的pH，最可能得到的结果是____________，原因是____________。74．（2021·浙江绍兴市·高三二模）回答下列（一）、（二）小题：（一）苹果酒和苹果醋制作的实验流程如下图，回答下列相关问题：（1）放置一段时间的水果比新鲜水果要软，可能的原因是水果中__________酶能分解细胞壁，使水果细胞相互分离，导致水果变软。在工业化生产中，可采用__________技术，有利于该酶从果汁分离并实现反复利用。（2）对野生酵母菌进行诱变后利用____________________的培养基，筛选得到具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌，可提高酒精发酵的效率。（3）可通过测定酵母菌数量、发酵液密度和_______________等措施监控酒精发酵情况。发酵初期，可采用__________培养法测定酵母菌的活菌数量；发酵中期，发酵液密度降低的原因是___________________________。（4）发酵过程中常通过_____________________________来监控醋酸发酵情况。（二）侏儒症是由于生长发育时期体内生长激素分泌过少导致的生长缓慢。为帮助特定人群实现个体增高，研究人员利用转基因山羊乳腺生物反应器生产生长激素，已经取得一定进展。请回答下列相关问题：（1）通过分析生长激素的氨基酸序列，可人工合成编码生长激素的脱氧核苷酸序列，该序列_______（填“是”或“不是”）唯一的，利用PCR的方法对该序列进行扩增时使用Taq酶而不使用哺乳动物体内的DNA聚合酶，原因是Taq酶___________________。（2）构建重组DNA分子时，要将改造后的生长激素基因与山羊乳腺蛋白基因的启动子等重组在一起，目的是____________________________。然后将重组DNA分子导入山羊的__________________（填“受精卵”或“乳腺细胞”）中。相比细菌基因工程，以转胰岛素原基因动物的乳腺作为反应器来生产人胰岛素的优点有：乳腺细胞含有_____________________，可以将无活性的胰岛素原加工成有生物活性的胰岛素，表达的胰岛素随乳汁及时排出体外，便于提取纯化等。（3）若选用早期囊胚做雌雄鉴别，则一般应选早期囊胚的_______________________进行性别鉴定，鉴别后的胚胎可做胚胎移植。（4）如要在分子水平判断目的基因在受体细胞中是否表达，可检测细胞内是否含相应的__________或蛋白质分子，若检测后者可用_________________________技术获得特异性探针，与提取的蛋白质杂交。75．（2021·重庆高三三模）随着人们生活质量的提高，餐饮含油脂废水的排放量大量增加，合理处置油脂废水也成为新的课题。已知芽孢杆菌中有多种分解油脂并产酸的菌种，科研人员欲采用下列流程筛选出能高效分解油脂的微生物。菌种取样→分离培养→菌株的筛选→形态特征观察和生理生化反应鉴定，请回答下列问题：（1）选取饭店附近排污渠的含油脂废水为样本，采样约0.2ml，立即装于试管内，此试管使用前需要经过________处理。（2）样品分离培养前，一般需要将菌液进行________处理，然后吸取0.2ml菌液涂布到营养琼脂培养基平板上，置于37℃恒温培养箱内培养24h，记录菌落总数。将分离出的菌株按照菌落___________________（至少答3点）等表观特征初步分类。（3）上述步骤筛选的菌株分别接种到含“花生油”的琼脂培养基中，37℃恒温培养箱中培养24h，筛选出油脂降解菌，培养基中“花生油”主要为菌种繁殖提供___________。在该培养基还需加入中性红染料（中性红为脂溶性染料，遇酸为红色，遇碱为黄色），挑选菌株要挑选显_____________降解圈的菌株，并且选颜色较___________（填“深”或“浅”）的为宜。（4）实际操作中，由于油脂易聚集成液滴，常在培养基中加入2-3滴乳化剂使油脂分散均匀，鉴定效果更好，试分析原因_______________________。76．（2021·广东珠海市·高三二模）一定浓度的抗生素会杀死细菌，但变异的细菌可能产生耐药性。某学校生物兴趣小组为探究抗生素对细菌的选择作用，做了以下实验。（1）为获取大肠杆菌，将一定体积的土壤浸出液过滤后，将滤液均匀涂布在含有______________培养基上培养，挑选出呈______________色菌落即为大肠杆菌。（2）获得大肠杆菌菌落后，需进行扩大培养，此时应选用______________培养基。（3）将大肠杆菌菌液均匀涂布在固体培养基上，并将平板划分为三个大小一致的区域，各放入一个经抗生素处理的相同圆纸片，在适宜条件下培养2天，观察结果（如图），统计透明圈的直径。①为使实验更具有说服力，平板需增加一个区域，在该区域应放入一个______________。②请说明圆纸片周围透明圈的大小与抗生素抑菌效果的关系：______________。③挑取该平板上__________________（填“靠近透明圈”、“远离透明圈”或“任意位置”）的菌落，制成菌液重复上述实验，培养多代。结果与结论：随着培养代数的增加______________，说明抗生素能定向选择耐药菌。（4）使用后的培养基、圆纸片丢弃前需做_______________________________处理。77．（2021·天津和平区·高三三模）水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA．PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑。（1）要从土壤中筛选出能高效分解PVA的细菌，应采用以_______________作为唯一碳源的选择培养基，实验中还应设置对照组。将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。（2）要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用_________直接计数。若将100mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0．1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落。则100mL原菌液中有PVA分解菌_________个，该方法的测量值与实际值相比一般会_________________（填“偏大”“偏小”或“相等”）。（3）要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入____________用于鉴别PVA分解菌。要比较不同菌株降解PVA能力的大小，用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株，一定时间后，通过测定_____________来确定不同菌株降解PVA能力的大小。78．（2021·江西高三二模）“分离”作为一种传统生物技术，在生产实践中具有广泛的运用，回答下列有关的问题：（1）分离纯化微生物的方法很多，最常用的是__________法和稀释涂布法，后者还可以用来统计样品中活菌的数目，原理是_____________________，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。（2）筛选、鉴定纤维素分解菌一般用_____________法，该方法中我们可以根据培养基中是否产生__________筛选纤维素分解菌。（3）分离不同种类的蛋白质常用凝胶色谱法，该方法是根据________________对蛋白质进行分离，利用血红蛋白作为分离样品的优点有____________________。（4）从玫瑰花中提取玫瑰精油常用方法是水蒸气蒸馏法，原理是_________________，形成油水混合物，冷却后又重新分出油层和水层。79．（2021·山东济宁市·高三二模）安莎霉素是一类主要由来源于海洋的稀有放线菌产生的次级代谢产物，具有较高的抗菌活性和药用价值。科研人员通常从深海采集淤泥样本，再分离、纯化并筛选出产安莎霉素的放线菌，其分离培养流程如下图。请分析回答下列问题：（1）过程①的接种方法为______。（2）统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致______。（3）研究人员发现产安莎霉素的放线菌具有一个普遍的共性——氨基酸缺陷型。从筛选目的分析，