药物分析 第二章药物的鉴别试验(二)

第二章

药物的鉴别试验1三、鉴别方法常用方法：化学法、光谱法、色谱法要求：专属、再现、灵敏、操作简便、快速

2（一）化学鉴别法呈色法、沉淀法、呈现荧光法、生成气体法、生成气体法、使试剂褪色法及测定生成物的熔点。

优点：操作简便、快速、实验成本低，应用广3例呈色反应三氯化铁----酚羟基四氮唑---肾上腺皮质激素类茚三酮---类似氨基酸结构重氮化-偶合---芳伯氨基茜素氟蓝---有机氟化物双缩脲---氨基醇结构Vitali反应---托烷生物碱类4沉淀生成反应鉴别法氯化物银盐沉淀反应还原性基团银镜反应（异烟肼）5荧光反应鉴别法

硫酸奎宁的稀盐酸溶液蓝色荧光维生素B1的硫色素反应蓝色荧光6生成气体法胺（铵）类药物、酰脲类及某些酰胺类氨（胺）气含硫药物硫化氢（硫喷妥）含碘药物碘蒸气7使试剂褪色法

司可巴比妥钠使碘试液退色8（二）光谱鉴别法UV法专属性不强ultravioletspectrophotometryλmax,λminλ-Aλ-吸收系数Aλ1/Aλ2化学处理后测定产物的光谱特征200nm400nm9IR法infraered

spectrophotometry

专属性强，用于组分单一、结构明确的原料药的鉴别

Ch.P采用标准图谱对照法

10中国药典收载的红外光谱图，在分辨率为2cm-1的条件下绘制；基线一般控制在90%透光率以上；供试品取样量一般控制在使其最强吸收峰在10%透光率以下。1112(1)试验制备方法

压片法最常用糊法膜法溶液法13(2)注意事项固体样品应按备注的方法进行预处理后再录制光谱盐酸盐一般采用氯化钾基质；如果不与溴化钾发生离子交换，则采用溴化钾作基质。测定时注意二氧化碳及水汽等大气的干扰，可采用干燥氮气吹扫。14(2)注意事项仪器在录制样品的光谱前，应录制聚苯乙烯薄膜的光谱图，与光谱集中聚苯乙烯薄膜的光谱图的比较，以便正确的判断本法对多组分或多晶现象的药物不适用。制剂鉴别制剂提取分离后鉴别※制剂的红外鉴别品种项下应明确规定供试品的前处理方法辅料无干扰，与原料药的标准图谱对照辅料有干扰，在指纹区可规定3~5个待测成分的特征吸收峰，实测谱带与规定的波数的误差应小于0.5%。15第一卷（1995年版）第二卷（2000年版）第三卷（2005年版）同一化合物在不同卷上有收载，则以后卷所收的图谱为准《药品红外光谱集》163.近红外光谱法通过测定被测定物质在近红外谱区750-2500nm(12800-4000cm-1)的特征光谱并利用适宜的化学计量学方法提取相关信息后，对被测物质进行定性、定量分析的一种分析技术。特点：准确、快速、对样品无破坏。17（三）X射线粉末衍射法化合物无论是单晶或多晶，都有其特定的X射线衍射图。衍射极大点间的距离及其相对强度可用以进行结晶物质的定性或定量分析。18（四）色谱鉴别法一般在检查或含量测定项下已采用色谱法的情况下采用此法鉴别。TLC法采用对照品（或标准品）比较法

HPLC法利用比较对照品的保留时间质谱法m/z对照品样品0tRmin19TLC法（thin-layerchromatography）采用与同浓度的对照品溶液，在同一块薄层板上点样、展开与检视，供试品溶液所显主斑点的颜色（或荧光）与位置（Rf）应与对照品溶液的主斑点一致，而且主斑点的大小与颜色的深浅也应大致相同。20（2）采用供试品溶液与对照品溶液等体积混合，应显示单一、紧密的斑点（3）选用与供试品化学结构相似的药物对照品溶液与供试品溶液的主斑点比较，两者值应不同。（4）将（3）项下两种溶液等体积混合，应显示两个清晰分离的斑点。样对样类似类似样21斑点的灵敏度、比移值（Rf）和分离效能比移值（Rf）=从基线至展开斑点中心的距离/从基线至展开剂前沿的距离分离效能：在对照品与化学结构相似药物对照品溶液制成混合溶液的色谱图中，应显示两个清晰分离的斑点。薄层色谱法的系统适应性试验224、生物检定法利用微生物或动物进行鉴别的方法23

被测物浓度溶液的温度

pH

反应时间共存的干扰成分的存在

四、鉴别试验条件24

在与供试品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供试品外，其它试剂均同样加入而进行的试验。目的消除试剂和器皿可能带来的影响空白试验25阳性对照被测成分