进出口粮谷中T-2毒素的测定 免疫亲合柱-液相色谱法_第1页
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进出口粮谷中T-2毒素的测定免疫亲和柱-液相色谱法本标准规定了进出口粮谷中T-2毒素检验的制样和免疫亲和柱-液相色谱测定方法。本标准适用于进出口玉米、小麦中T-2毒素的检验。2.1试样制备将样品按四分法缩分至1kg.全部磨碎并通过20目筛，混匀，均分成两份作为试样，分别装入洁净的容器内，密封，标明标记。在抽样和制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。2.2试样保存将试样于一5℃以下避光保存。3测定方法3.1方法提要试样中的T2毒素用甲醇-水提取后，提取液经免疫亲和柱净化，浓缩、桁生、定容后，用配有荧光检测器的液相色谱仪进行测定，外标法定量。3.2试剂与材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为重蒸馏水，3.2.4甲醇+水(8+2);取80mL甲醇加20mL水。3.2.50.325mg/mL4二甲基氨基吡啶(DMAP)溶液；准确称取0.0325g于100mL容量瓶，甲苯稀释至刻度。3.2.60.3mg/mL1-氰酸意(1-Anthroylnitile,1-AN)溶液：准确称取0.0300g于100mL容量瓶，甲苯稀释至刻度。3.2.7T-2毒素标准品：纯度≥98%,3.2.8T-2毒素标准溶液；准确称取适量的T-2毒素标准品，用乙腈配成浓度为0.5mg/ml,的标准储备液。按所需要的浓度进行稀释，作为标准工作溶液使用。3.3仪器与设备3.3.1液相色谐仪配有荧光检测器。3.3.2粉碎机。3.3.3高速均质器。3.3.4氮吹仪。3.3.5空气压力泵。3.3.6玻璃纤维滤纸。 4.2.1小麦中T-2毒素添加水平及回收率的试验数据：—在0.01mg/kg添加水平时，回收率为82,6%～92.5%;—在0.10mg/kg添加水平时，回收率为84,4%～96.6%;—在1.50mg/kg添加水平时，回收率为91.9%～97.5%。—在0.01mg/kg添加水平时，回收率为79.6%～87.3%;—在0.10mg/kg添加水平时，回收率为84.4%~94.3%;—在1.50mg/kg添加水平时，回收率为94.6%～98.0%。(资料性附录)Immunoaffinitycolumnand73.2.54-dimethylaminopyridine(DMAP):0.325mg/mLin3.2.61-anthroylnitrile(1-AN)3.2.8T-2toxinstandar3.3.1Luiquidchromatographyaquippedwi3.3.7T-2toxinimmunMethanlo-water(80+20,V/V)byblendingathighspeedfor2min.Trefugodfor5minat3000rpmandthesupematantwasfiltratewerecallectandmixedwith40.0mLdistilledwateaglassmicrofibrefiltera X—contentofT-2toxininthetestsample,mg

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