粮油检验 储粮真菌标准图谱 第1部分：曲霉属 征求意见稿

1粮油检验储粮真菌标准图谱第1部分：曲霉属本文件适用于稻谷、小麦、玉米及杂粮中的曲霉属检验的辅GB4789.28食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量注2：曲霉属的产毒真菌主要包括黄曲霉、杂色曲霉、构巢曲霉、赭曲霉、黑曲霉等。这些真菌可能产生黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏马菌素、展4检验环境4.1菌落观察室内环境应光线充足、明亮，或在光照亮度为（450±100）lx光源下观察。不应在直射阳光下观物镜的数值孔径一致或稍大，使整个观察视野明亮适宜。具体操作步骤见附25粮食中常见曲霉菌落以及显微形态特征图5.1概述5.2黄曲霉（A.flavus）35.3米曲霉（A.oryzae）45.4杂色曲霉（A.versicolor）55.5构巢曲霉（A.nidulan65.6赭曲霉（A.ochraceus）7895.9蒙地曲霉（A.montevide5.10谢瓦曲霉（A.chevalieri）5.11赤曲霉（A.ruber）5.12拟灰绿曲霉（A.pseudoglaucus）5.13帚状曲霉（A.penicillioides）5.14烟曲霉（A.fumigatus）5.15黑曲霉（A.niger）5.16塔宾曲霉（A.tubingensis）5.17亮白曲霉（A.candidus）5.18焦曲霉（A.ustus）5.19黄柄曲霉（A.flavipes）5.20土曲霉（A.terreus）5.21烟草色曲霉（A.tabacinus）5.22聚多曲霉（A.sydowii）5.23孔曲霉（A.ostianus）5.24多育曲霉（A.proliferans）5.25筛曲霉（A.cibarius）5.26冠突曲霉（A.cristatus）5.27高渗曲霉（A.tonophilus）A.1设备和材料A.1.4生物培养箱。A.1.6生物安全柜。A.1.7放大镜。A.1.8酒精灯。A.1.10解剖针。A.1.12三角瓶。A.1.13载玻片。A.1.14盖玻片。A.1.15培养皿。A.1.17高压蒸汽灭菌器。A.2培养基和试剂A.2.1察氏琼脂培养基（CA成分和A.2.2麦芽汁琼脂培养基（MEAA.2.3高盐察氏琼脂培养基（SCDA.2.4乳酸-苯酚液：成分见附录C.4。A.3操作方法A.3.1菌落形态特征观察A.3.1.1用种植分离法或稀释分离法把粮食籽粒上的真菌分离并纯化，将纯化后的菌株保存于培养皿A.3.1.4将接种针（A.1.9）经火焰灼烧灭丝，点种于培养皿中的培养基上，接种一点或三点。将接完菌种的培养皿放置于霉菌培养箱（A.1.4于28℃±1℃下培养7d。A.3.1.5肉眼或借助放大镜观察菌落的生长或发育速度、菌落颜色、菌落表面质地、菌落边缘、培养A.3.2显微形态特征观察从培养皿（A.3.1.5）的纯化菌落上挑取少许含有培养物结构于70%的酒精滴中，切忌涂抹，以免破坏水取代乳酸苯酚固定液。如盖玻片和载玻片中间有气泡，可在酒精灯（A.1.8）上微微加热排除气泡。制片操作应在生物安全柜（A.1.6）内完成，避免孢子飞扬污A.3.2.3制备好的玻片置于显微镜（A.1.1）下，观察真菌菌丝、产孢结构、分生孢子等特征。A.4观察结果养基上直径5.5cm～6.5cm，质地丝绒状至絮状，较厚，黄绿色，也有椭圆形至洋梨形分生孢子，直径为5µm～10µm×4µm～5µm，壁近于光滑或稍粗糙。梗5µm～10µm×2µm～3.5µm。分生孢子球形，光滑，直径3µm～3.的渗出液，有的菌株能形成菌核，菌落反面无色或呈不同程度的绿褐色至紫褐色；菌落在MEA培养基B.11拟灰绿曲霉（A.pseudoglaucus图31、图32、图33）B.13烟曲霉（A.fumigatus图37、图38、图39）B.18黄炳曲霉（A.flavipes图52、图53、图54）近于粉红肉桂色，反面呈紫红色；菌落在MEA培养部表面可育。产孢结构双层，梗基4µm～1烧瓶形，6µm～11µm×3µm～5µm。分生孢子多为球形或近球形，少数为椭圆形，尺寸为5µm～7.5µm×3.5µm～6µm，壁粗糙，具瘤状或叶状至网格状突起。每个子囊产生8个子囊孢子，子囊孢子球硫酸镁（MgSO4·7H2O）0.5g硫酸亚铁0.01g麦芽汁浸粉30.0大豆蛋白胨C.3高盐察氏琼脂（Saltczapekdoxagar，SCDA）培养基硫酸亚铁