2024年大学试题(医学)-分子诊断学笔试历年真题荟萃含答案

2024年大学试题(医学)-分子诊断学笔试历年真题荟萃含答案（图片大小可自由调整）答案解析附后卷I一.参考题库(共25题)1.什么是包涵体？2.如何有效地提高外源基因的表达效率？3.人类基因组研究的主要内容是什么？4.下列哪种方法不是分离纯化高分子量DNA的（）A、酚抽提法B、煮沸裂解法C、甲酰胺解聚法D、玻棒缠绕法E、异丙醇沉淀法5.下列哪项与短串联重复序列（STR）位点的不稳定性相关（）A、脆性X综合症、重症肌无力和Huntington 舞蹈症B、脆性X综合症、重症肌无力和Kearns-sayre综合症C、Kearns-sayre综合症、慢性进行性眼外肌瘫痪和Huntington 舞蹈症D、Kearns-sayre综合症、慢性进行性眼外肌瘫痪和Kearns-sayre综合症6.通过凝胶电泳法可对RNA分子完整性进行鉴定，提示无RNA的降解时应（）A、28S RNA的荧光强度约为18S的2倍B、18S RNA的荧光强度约为28S的2倍C、5S RNA的荧光强度约为18S的2倍D、5S RNA的荧光强度约为28S的2倍E、28S RNA的荧光强度约为5S的2倍7.下列有关重组DNA技术的叙述，正确的是（）A、重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B、所有的限制酶都只能识别一种特定的核苷酸序列C、选细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D、只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达8.目前在蛋白质组学的研究中主要采用了哪些技术？9.T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA片段连接在一起，其底物的关键基团是（）。A、2’-OH和5’-PB、2’-OH和3’-PC、3’-OH和5’-PD、5’-OH和3’-P10.二维凝胶电泳11.反向PCR12.重叠基因13.复性14.简述原位杂交在临床中的应用。15.倒转电场凝胶电泳16.质粒17.功能基因组学的主要特征。（）A、高精度B、高通量C、大规模D、计算机分析E、高分辩率18.FISH19.引物步入法20.国际病毒分类委员会（ICTV）将病毒分成哪几类？21.下列哪一个调控序列在断裂基因侧翼序列上不存在（）A、启动子B、增强子C、终止子D、外显子22.基因敲除23.在核酸的分离和纯化过程中，如何保持核酸的完整性？24.A.基因重叠现象B.类核结构C.断裂基因D.质粒E.可移动基因成分原核生物具有（）25.原位杂交的基本原理。卷II一.参考题库(共25题)1.核酸操作的基本技术有哪些？2.质粒的结构特点有（）A、以环状双链DNA分子存在B、质粒DNA有超螺旋结构C、以环状单链DNA分子存在D、质粒DNA有半开环结构E、以环状双链RNA分子存在F、质粒DNA有线性结构G、以线性双链DNA分子存在3.cDNA文库包括该种生物的（）。A、某些蛋白质的结构基因B、所有蛋白质的结构基因C、所有结构基因D、内含子和调控区4.试述PTT检测基因变异的优缺点。5.在核酸的提取过程中，将整个操作过程的pH尽可能控制在（）A、2～3B、4～10C、10～11D、11～12E、12～146.举例说明基因芯片在临床诊断中的应用。7.基因组研究可以归纳成为构建4张相互关联的基因组图谱：遗传图、物理图、序列图和功能图。8.限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是（）。A、修复自身的遗传缺陷B、促进自身的基因重组C、强化自身的核酸代谢D、提高自身的防御能力9.举例说明FISH技术在分子诊断上的应用。10.分子影像探针11.基因工程操作常用的酶是：I内切酶II连接酶III末端转移酶IV聚合酶（）。A、I + IIB、I + III + IVC、II + III + IVD、I +II + IV + III12.下列有关连接反应的叙述，错误的是（）。A、连接反应的最佳温度为37℃B、连接反应缓冲体系的甘油浓度应低于10%C、连接反应缓冲体系的ATP浓度不能高于1mMD、接酶通常应过量2-5倍13.镰状细胞贫血分子诊断（）A、限制性内切酶MstⅡ切割法B、长距离PCR法（LD-PCR）C、多重PCRD、扩增产物变性聚丙烯酰胺凝胶电泳放射自显影E、Southern印迹杂交法14.质粒提取后，在琼脂糖电泳出现一条带时说明质粒提取纯度高，当为三条带时为纯度不高。15.前病毒DNA16.全染色体涂抹探针17.PCR检测技术有何临床应用。18.链末端终止法测序反应体系的组成中包括有（）A、待测模板链B、引物C、DNA聚合酶D、放射性核素标记的dNTPE、测序产物的凝胶电泳及识读19.叙述原核生物基因组的结构特征。20.Northern印迹21.质粒的不相容22.植入前遗传学诊断（PGD）23.镰状血红蛋白（HbS）24.分子信标25.后基因组计划的主要目标（）A、基因功能比较B、基因功能鉴定C、基因组测序D、基因数据分析E、基因结构卷III一.参考题库(共25题)1.简述长病毒末端重复序列的特点和作用。2.RNA主要存在于（）A、细胞质B、线粒体C、细胞核D、溶酶体E、内质网3.肌营养不良症分子诊断的常用方法（）A、限制性内切酶MstⅡ切割法B、长距离PCR法（LD-PCR）C、多重PCRD、扩增产物变性聚丙烯酰胺凝胶电泳放射自显影E、Southern印迹杂交法4.简述临床诊断常用的FISH探针的类型及用途。5.镰状血红蛋白（HbS）氨基酸的变化为（）A、谷氨酸→精氨酸B、谷氨酸→赖氨酸C、谷氨酸→缬氨酸D、谷氨酸→组氨酸E、谷氨酸→苯丙氨酸6.α地中海贫血在临床上包括以下类型：（）A、Hb Bart’s胎儿水肿综合征B、轻型（标记型）α地中海贫血C、遗传性胎儿Hb持续增多症D、中间型地中海贫血E、HbH病F、静止型地中海贫血7.简述原核生物的类核组成。8.RNA病毒基因组的帽子结构与第二个核苷酸相连的化学键（）A、5＇，5＇-三磷酸二酯键B、3＇，3＇-三磷酸二酯键C、5＇，5＇-磷酸二酯键D、3＇，5＇-磷酸二酯键E、以上都不是9.耐热连接酶的使用，可增加寡核苷酸连接实验的（）A、灵敏度B、重现性C、特异性D、假阳性E、假阴性10.关于逆转录病毒叙述不正确的是（）A、迄今发现的RNA肿瘤病毒均属RNA逆转录病毒B、嗜肝DNA病毒科属DNA逆转录病毒C、逆转录病毒RNA为正链D、病毒颗粒均携带逆转录酶E、前病毒DNA可以整合到宿主细胞染色体DNA中11.温度梯度凝胶电泳能够检测的突变一般位于DNA片段上哪个区域（）A、较低解链温度的“解链区域”B、最低解链温度的“解链区域”C、较高解链温度的“解链区域”D、最高解链温度的“解链区域”E、所有位点12.下列哪些技术属于分子影像技术（）A、UltrasoundB、SPECTC、MRID、CTE、PET13.电泳时EB加在琼脂糖凝胶中一般会降低DNA在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率。14.简述常用的光学成像技术。15.变形聚丙烯酰胺凝胶电泳能分离的单链寡核苷酸片段，一般为（）A、100～200个核苷酸B、200～300个核苷酸C、300～500个核苷酸D、500～700个核苷酸E、任意长度均可16.染色体以外的遗传物质是（）A、基因重叠现象B、类核结构C、断裂基因D、质粒E、可移动基因成分17.二维凝胶电泳是根据蛋白质的（）来进行分离的。A、分子量和分子构像B、分子量和电荷C、电荷和分子构像D、分子量18.非放射性探针检测方法有（）A、直接法B、间接免疫法C、直接亲合法D、间接亲合法等19.限制性内切核酸酶的星活性是指（）。A、在非常规条件下，识别和切割序列也不发生变化的活性B、活性大大提高C、切割速度大大加快D、识别序列与原来的完全不同20.基因家族21.DNaseⅠ足纹分析技术中，DNaseⅠ水解的是DNA分子中的（）。A、氢键B、磷酸二酯键C、疏水键D、肽键22.细菌基因转移的方式有（）A、接合B、转化C、转染D、转导E、转座23.人工染色体载体必须具有的元件是（）。A、染色体端粒B、着丝粒C、自主复制序列D、以上三项全部24.增色效应25.最早推出的荧光定量探针是（）A、TaqMan探针B、相邻探针C、分子信标D、阴阳探针E、端粒探针卷I参考答案一.参考题库1.参考答案:重组蛋白在胞内表达时，常常以不溶性蛋白聚集成的晶状物形式存在，这种晶状体即包涵体。包涵体的形成是外源蛋白的高效表达时的普遍现象，这是由于肽链折叠过程中部分折叠的中间态发生了错误聚合，而不是形成成熟的天然态或完全解链的蛋白。2.参考答案: ⑴提高启动子强度。 ⑵缩短启动子同克隆基因间距离。 ⑶高效的翻译起始序列。 ⑷高效的转录终止区。 ⑸提高质粒拷贝数及稳定性。 ⑹用以下方法提高翻译水平：①调整SD序列与AUG间的距离②用点突变的方法改变某些碱基③增加mRNA的稳定性的。 ⑺减轻细胞的代谢负荷：①诱导表达②表达载体的诱导复制。 ⑻提高表达蛋白的稳定性，防止其降解：①克隆一段原核序列，表达融合蛋白②采用某种突变菌株③表达分泌蛋白质。3.参考答案: 人类基因组研究主要包括两方面的内容：以全基因组测序为目标的结构基因组学和以基因功能鉴定为目标的功能基因组学，又称后基因组研究。结构基因组学代表基因组分析的早期阶段，通过基因作图、核苷酸序列分析确定基因组成、基因定位的科学，包括规模化地测定蛋白质、RNA及其它生物大分子的三维结构等内容，以获得一幅完整的、能够在细胞中定位以及在各种生物学代谢途径、生理途径、信号传导途径中全部蛋白质在原子水平的三维结构全息图。功能基因组学代表基因分析的新阶段，是利用结构基因组学提供的信息研究基因功能，使人们有可能在基因组学、蛋白质组学、分子细胞生物学以致生物体整体水平上理解生命的原理。对疾病的防治和机理的阐明有重要应用意义。4.参考答案:B5.参考答案:A6.参考答案:A7.参考答案:B8.参考答案: ①蛋白质的分离技术：二维凝胶电泳。 ②蛋白质的鉴定技术主要包括：质谱技术、Edman降解分析技术、蛋白质分子结构分析技术 。 ③蛋白质与核酸间相互作用的研究技术：凝胶滞后实验、DNase Ⅰ 足纹分析、核酸一蛋白质杂交实验。 ④蛋白质与蛋白质间相互作用的研究技术：酵母双杂交技术。9.参考答案:C10.参考答案:二维凝胶电泳是目前蛋白质组研究中最有效的分离技术。它由两向电泳组成，第一向以蛋白质电荷差异为基础进行分离的等电聚焦凝胶电泳，第二向是以蛋白质分子量差异为基础的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。11.参考答案:反向PCR：是对已知DNA片断两侧的未知序列进行扩增和研究的一种方法。其原理是：用限制性内切酶消化DNA片断，然后用连接酶将酶切产物连接成环状，再用已知序列上两端相反方向的引物进行PCR。12.参考答案:许多病毒基因组的一段DNA序列有两个或两个以上的开放读码框架，可以编码两种或两种以上的多肽链，称为重叠基因（overlappinggene）。13.参考答案:去除变性因素后，单链DNA可通过碱基互补重新结合成稳定的双链螺旋结构，此过程称为复性（renaturation）。14.参考答案:原位杂交技术可以通过标记的探针与分裂中期染色体DNA杂交来精确定位特定核苷酸序列在染色体上的位置；与细胞RNA杂交可观察组织细胞中特定基因的表达水平；还可用特异性的细菌或病毒的核酸序列作为探针与组织、细胞杂交，以确定有无病原体的感染等。原位杂交能在成分复杂的组织中对单一细胞进行研究，不受同一组织中其它成分的影响，因此对于那些细胞数量少且散在于其它组织中的细胞内DNA或RNA的研究更为方便。此外，原位杂交不需要从组织中提取核酸，有利于检测组织中含量极低的靶序列，并可完整地保持组织和细胞的形态，更能准确地反应出组织细胞的相互关系及功能状态。举例：原位杂交检测上皮细胞中人乳头状瘤病毒（HPV）DNA。15.参考答案:FIGE的两个电场方向为180°反转。电场的方向间隔一定时间交换，驱动DNA分子向前迁移的正向脉冲时间较反向的长一些，这样DNA分子的总迁移为向前。其时间比例为向前：向后＝3：1。在FIGE试验中通过持续改变脉冲时程，利用简单的装置可就可得到分离很好的电泳条带，所需的仅为标准的凝胶电泳槽和一个脉冲电极控制器。目前FIGE已非常流行于较小片段的分离，分离的片段最大为800kb（600－750kb）。16.参考答案:质粒：细菌染色体以外，能独立复制并稳定遗传的共价闭合环状DNA（covalentlyclosedcircularDNA，cccDNA）分子称为质粒（plasmid）。17.参考答案:B,C,D18.参考答案:是一种利用非放射性的荧光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它通过荧光标记的探针与待测标本的核酸进行原位杂交，在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对染色体或基因异常的细胞、组织标本畸形检测和诊断。19.参考答案:是从待测DNA片段的3ˊ端开始，利用载体上的序列设计第一次反应的引物，测定一段DNA序列，然后依次根据前一次测序结果，设计下一次反应引物，循序渐进测序，直至完成，得到靶DNA的全部序列。20.参考答案: 国际病毒分类委员会（ICTV）制定了《国际病毒分类与命名原则》。根据病毒的基因组组成及复制方式，可将病毒分为如下几类：DNA病毒（DNA Viruses） 第一组：双链DNA病毒（Group I：dsDNA Viruses） 第二组：单链DNA病毒（Group II：ssDNA Viruses） RNA病毒（RNA viruses） 第三组：双链RNA病毒（Group III：dsRNA Viruses） 第四组：正链RNA病毒（Group IV：（+）ssRNA Viruses） 第五组：负链RNA病毒（Group V：（-）ssRNA Viruses）DNA与RNA逆转录病毒（DNA and RNA Reverse Transcribing Viruses） 第六组：RNA逆转录病毒（Group VI：RNA Reverse Transcribing Viruses） 第七组：DNA逆转录病毒（Group VII：DNA Reverse Transcribing Viruses）亚病毒因子（Subviral Agents）卫星（Satellites）类病毒（Viroids）朊病毒（Prions）21.参考答案:D22.参考答案:基因敲除是向正常生物个体内引入某个突变的基因位点而选择性地使某特定基因功能失活的技术。23.参考答案:为了保证核酸的完整性，首先在操作过程中，应尽量简化操作步骤，减少各种破坏核酸的有害因素，包括物理、化学与生物学的因素。提取应在0～4℃的条件下进行；另外避免强力的机械剪切力对核酸的破坏。细胞内或外来的核酸酶对核酸的生物降解，而破坏核酸的一级结构，使用EDTA、柠檬酸盐并在低温条件下操作，基本上就可以抑制DNA酶的活性；并尽可能地抑制RNA酶的活性。24.参考答案:B真核生物基因是（）参考答案:C病毒基因组存在（）参考答案:A转座因子是（）参考答案:E染色体以外的遗传物质是（）参考答案:D25.参考答案:样本经适当处理后，使细胞通透性增加，让探针进入细胞内与组织、细胞中待检测的核酸进行特异性结合形成杂交体，然后通过组织化学或免疫组织化学方法在被检测的核酸原位形成的杂交信号，在显微镜或电子显微镜下对待测核酸进行细胞内定位的方法。卷II参考答案一.参考题库1.参考答案:①核酸提取与纯化②核酸的检测与保存③核酸的凝胶电泳④核酸分子杂交。2.参考答案:C,D,E,F3.参考答案:A4.参考答案: PTT检测突变的优点： ①能检测出只与疾病相关的蛋白截短突变； ②可检测出在RNA形成过程中发生的突变（如剪接突变）； ③通过只鉴定引起疾病截短突变，PTT分析不会受到基因沉默变异如多态性的妨碍； ④截短蛋白分子的长度指明了突变的位置，因此更方便进行测序分析以确定突变。 PPT检测突变的缺点： ①由于PCR扩增效率的影响，对于包含几千个核苷酸序列多个外显子的疾病基因，就需要分成几个1－2kb的片段分别扩增，分别进行PTT检测； ②由于微小缺失/插入突变对蛋白产物分子大小影响太小，凝胶不能分辩，因而检测不出编码序列中小的插入或缺失或是错义突变； ③引起RNA产量改变或使mRNA不稳定的突变可能被漏检。5.参考答案:B6.参考答案: 基因芯片作为一项现代化的诊断新技术在感染性疾病、遗传性疾病的诊断和耐药性检测等方面已显示出良好的应用前景。下面举例说明基因芯片在疾病诊断的应用。 （1）感染性疾病的诊断：性传播疾病、肝炎等。 （2）遗传性疾病的诊断：地中海贫血、血友病、婚前检查等。 （3）耐药性检测：结核分支杆菌耐药性检测芯片等。7.参考答案:正确8.参考答案:D9.参考答案:21三体，微缺失，肿瘤，病原微生物等的检测与诊断。10.参考答案: 分子探针是分子影像中的关键组成部分，高度特异性的分子探针是进行分子影像学研究的先决条件，常用的示踪剂为有核素、顺磁性物质或荧光素等，应具备下列特点： （1）分子量小、纯度高、安全，不影响所研究的疾病过程。 （2）具有良好的生物学功能，能参与人体正常的生理生化活动。 （3）能够克服人体内部的“生理屏障” （如脑屏障、血管壁、细胞膜等），顺利到达靶分子所在的器官，同时不会积聚于其他组织。 （4）示踪剂、分子探针和靶分子应该紧密结合，不能脱落，且有足够长的半衰期以便于检测。11.参考答案:A12.参考答案:A13.参考答案:A14.参考答案:错误15.参考答案:当逆转录病毒感染敏感细胞后，首先以其自身的RNA为模板，在逆转录酶的催化下合成DNA中间体，这种DNA分子称原病毒或前病毒DNA（provirusDNA）。16.参考答案:来源于一条染色体的DNA文库，这种探针可以识别一条特定染色体全长上的单一序列，从而将一条完整的染色体染色而得以显示（painting）。17.参考答案:（1）PCR在病原微生物的检测中的应用；（2）PCR在遗传病中的应用；（3）PCR在肿瘤中的应用；（4）其它方面的应用：PCR技术除用于临床诊断和治疗外，还可用于DNA指纹、个体识别、亲子关系识别、法医物证等。18.参考答案:A,B,C,D,E19.参考答案:在原核生物基因组中只有一个DNA复制起点。基因组DNA通常是由一条环状双链DNA（doublestrandedDNA，dsDNA）分子组成。基因组DNA与支架蛋白和RNA结合在一起，以复合体的形式存在。广泛存在操纵子结构。操纵子结构是原核生物基因组的功能单位，在原核基因调控中具有普遍的意义。原核生物的结构基因多数是单拷贝的并且结构基因中没有内含子成分。编码顺序一般不重叠。具有编码同工酶的不同基因。基因组中编码区所占比例为50﹪，不编码区中常常含有基因表达调控的序列。基因组DNA分子中存在多种功能的识别区域，这些区域经常有反向重复序列存在，并能形成特殊的结构。原核生物基因组存在着可移动的DNA序列，这些可移动的DNA序列，通过不同的转移方式发生基因重组，使生物体更适应环境的变化。20.参考答案:指RNA经电泳分离后转移至膜性支持物上进行杂交反应的技术，目前主要用于检测某一组织或细胞中已知的特异mRNA的表达水平以及比较不同组织和细胞的同一基因的表达情况。21.参考答案:性质粒的不相容性：同一类群的不同质粒通常不能在同一菌株内稳定共存，当细胞分裂时就会分别进入不同的子代细胞，这种现象叫做质粒的不相容性（incompatibility）。22.参考答案:植入前遗传学诊断主要是指在显微操作下从体外受精发育至6～8个细胞期的胚胎中，活检1～2个卵裂球细胞或直接获取受精前后的极体，通过聚合酶链式反应或荧光原位杂交，进行快速遗传学诊断，选择正常胚胎植入宫内，从而获得健康胎儿。23.参考答案:β珠蛋白基因中第6位密码子的序列由原来的GAG改变成GTG，结果β珠蛋白肽链的第6位氨基酸残基由原来的谷氨酸改变成缬氨酸，改变后的血红蛋白称为镰状血红蛋白（HbS）。24.参考答案:分子信标：分子信标探针是TaqMan探针的一种衍生方法。探针设计与TaqMan探针相似，只不过是探针5′和3′端的一小段核苷酸序列被设计成互补的，没有与靶序列杂交时会形成发夹状态，此时荧光基团和淬灭基团极端靠近，荧光几乎完全淬灭。探针与靶序列杂交后，发夹展开，荧光基团与淬灭基团分开，荧光得以恢复，荧光检测系统即可接收到荧光基团的荧光信号。25.参考答案:B卷III参考答案一.参考题库1.参考答案:逆转录病毒基因组RNA在逆转录后生成的双链DNA中，两端有长末端重复序列（longterminalrepeat，LTR）结构。LTR在结构与功能上与上述重复序列不同。LTR中的重复序列只占一部分，另外还包括单一序列。5＇端的LTR包含许多特定的基因表达调控区域，是一组真核生物增强子和启动子单位，而3＇端的LTR具有转录终止的作用。另外，逆转录病毒基因组利用LTR中的重复序列形成环状结构，在整合酶作用下整合入宿主细胞基因组内。2.参考答案:A3.参考答案:C4.参考答案: 根据核酸探针的序列特点，可将FISH探针分为三大类：重复序列探针、单一序列探针和全染色体涂抹探针。重复序列探针（repetitive sequences probes）是指与某条特定的染色体结构结合、特异识别重复DNA序列的探针如着丝粒探针、端粒探针等。一般来说，不同的染色体，着丝粒重复序列中的核苷酸序列也不同，但端粒重复序列不具有染色体特异性。单一序列探针（Unique sequence probes）与某条染色体上特定的区域或基因的单拷贝DNA序列杂交。包括带特异性探针（band special probes）和基因座特异性探针（Locus Specific probes）等。全染色体涂抹探针（whole chromosome painting probes， WCP）是识别一条特定染色体全长上的单一序列探针的混合物。 着丝粒探针：可用于中期及间期细胞，检测染色体的非整倍性； 染色体涂抹探针：只能用于中期细胞，确定小标识染色体或畸变； 基因座特异探针：可用于中期及间期细胞，检测微缺失和微重复； 端粒重复序列探针：可用于中期及间期细胞，检测染色体的非整倍性和端粒微小末端重排。5.参考答案:B6.参考答案:A,B,D,F7.参考答案:原核生物与真核生物的主要区别在细胞核上。原核生物没有典型的细胞核结构，基因组DNA位于细胞中央的核区，没有核膜将其与细胞质隔开，但能在蛋白质的协助下，以一定的组织形式盘曲、折叠包装起来，形成类核（nucleoid）也称拟核。类核的中央部分由RNA和支架蛋白（scaffoldingprotein）组成，外围是双链闭环的超螺旋DNA。在超螺旋结构的基础上，DNA分子再扭结成许多活结样或花瓣样