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文档简介

ICS

21

李、杏品种鉴定

分子标记法辽宁省市场监督管理局  发

1.1-2020《标准化工作导则

第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起

repeats,SSR)分子标记法进行李(Plum)、杏(Apricot)品种鉴定的主要仪器设备与试剂耗材、试剂配制、参照种质、操作步骤、基因型对比、

李、杏的不同种质资源,其基因组存在着能够进行稳定遗传的简单重复序列SSR的重复次数差异。

具体见附录A。

试剂配制方法见附录B。

参照品种见附录D。

将液氮冷冻后的叶片样品放入研钵中磨成粉末,然后迅速将0.2g左右粉末转入2mL离心管中,

取出离心管置于冰上10min,然后置于4℃高速离心机中,12000rpm离心15min。使用移液枪取

取出离心管并置于4℃高速离心机中,12000rpm离心30min,弃上清,利用75%乙醇洗涤沉淀两

加入100μL

TE溶液溶解DNA沉淀,待完全溶解后利用核酸测定仪检测DNA浓度和纯度,将DNA

10μL,ddH

置于离心机4500xg,4℃离心30min后,立即将板反扣在厚的吸水纸上,离心至150xg,去除上

75%乙醇,4500g,4℃离心15min,立即将板反扣在厚的吸水纸上,离心至150g,

每份纯化后的PCR产物取1μL于新的96孔PCR板中,每份样品加入0.5μL内标(GS500LIZ)及

11

品SSR用Genemapper4.0

图1

_________________________检测平台,采用_____位点组合进行检测,结果显示:检测位点数为_____,差异位点数为__________

计、、磁烯吡咯烷酮(PVP)、氯化钠、三羟甲

A.1。

称量

置于

烧杯中,加入约

O,充分搅拌溶解,用浓盐酸调节

pH

pH

mL。

正向引物序列(5’-3’)反向引物序列(3’-5’)

P.

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P.

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