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文档简介

2.1.1微生物的实验室培养导学案

K学习要求1认识培养基的成分、类型和应用;认识无菌操作技术的根本要领

【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成以下问题,并初步稳固。

一、根底知识:

【活动1】阅读教材“课题背景”和“培养基”局部,讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕培养基的种类包括固体培养基和液体培养基等。

2.〔记忆〕琼脂是从红藻中提取的曼暨,在配制培养基中用作为凝固剂。

【开拓视野1】培养基的类型〔记忆〕及其应用

分类标配制特点

培养基类型主要应用

参加琼脂较多菌种别离、鉴定、计

固体培养基

物理性数

半固体培养参加琼脂较少

质菌种保存

不参加琼脂工业生产的连续培

液体培养基

化学组合成培养基由化学成分配制而成,培养基成清楚确菌种分类、鉴定

由天然成分配制而成,培养基成分不明用于工业生产降低

成天然培养基

确本钱

目的用鉴别培养基添加某种指示剂或化学药剂菌种的鉴别

途选择培养基添加1或缺少〕某种化学成分菌种的别离

3.〔了解〕阅读教材“附录3",认识各种培养基的用途〔填表〕。

培养基名称应用培养基名称应用

牛肉膏蛋白陈培养基培养细菌查氏培养基培养霉菌

营养琼脂培养基培养细菌MY培养基霉菌和酵母菌传代保藏

麦芽汁琼脂培养基培养酵母菌红美蓝培养基检测水肠杆菌含量

马铃薯琼脂培养基培养真菌MS培养基用于植物组织培养

4.(记忆〕培养基的化学成分包括正、无机盐、碳源、氮源四类营养成分。此外,培养基

还要满足微生物生长的出、特殊营养物质和氧气等要求。

【开拓视野2】〔记忆〕有机营养成分及其作用

碳源:如CO?、糖类、脂肪酸等含碳有机物,构成微生物的构造物质和分泌物,并提供

能量。

氮源:如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白陈等,主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代

物等。

生长因子:某些微生物正常生长代中必须从培养基中吸收的微量有机小分子,如某些氨

基酸、碱基、维生素等。

其中,含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源,又可以作为氮源,如氨基酸等。

【思考1】牛肉膏和蛋白月东主要为微生物提供盘、维生素和有机氮等营养物质。

【思考2】培养乳酸杆菌时需要添加维生素;培养霉菌时需要将培养基pH调节为圆生;

培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。

【活动2】阅读教材“无菌技术”局部,讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕获得纯洁培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。

2.〔记忆〕无菌技术包括:对实验操作空间、操作者的衣着和手进展清洁和消毒;将培养

器皿、接种用具和培养基等器具进展区直;为防止周围微生物污染,实验操作应在酒精

灯火焰附近旁进展;防止已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。

3.〔理解〕比拟消毒和灭菌〔填表〕

比拟项理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽抱和抱子能否被消灭

消毒较.为温和局部生活状态的微生物不能

灭菌强烈全部微生物能

【思考3】无菌技术除了防止培养物被污染外,还具有的目的是防止感染实验操作者。

【活动3】阅读教材“实验室常用的消毒和灭菌方法”,讨论并答复以下问题:

1.〔了解〕消毒方法:生活经常用到的是意造消毒法;对一些不耐高温的液体那么用里氐

消毒法;对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液,然后使用黄

外线进展物理消毒;实验者的双手使用迺箱进展消毒;饮水水源用氯气进展消毒;肌肉

注射时所用的皮肤消毒剂有酒精、碘酒;皮肤擦伤后所用的消毒剂有结晶紫、红汞、H2O2

差。

2.〔记忆〕灭菌方法:接种环、接种针、试管口等用也邕灭菌法;玻璃器皿、金属用具等

用壬热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱;培养基、无菌水等用高压蒸汽灭菌法,所用器

械是高压蒸汽灭菌锅。外表灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯。

3.(记忆〕对接种环灭菌时要是用酒精灯的充分燃烧层火焰灼烧可能深入试管的部位。

4.〔记忆〕利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能太挤,目的是防止阻碍热空气流通。

5.〔掌握〕高压蒸汽灭菌法:物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后,要首先翻开排气阀,煮沸

并排除锅的冷空气,目的是有利于锅温度升高;随后关闭排气阀继续加热,气压升至

lOOkPa,温度为121℃,并维持15〜30min;切断热源使温度自然降温,气压务必降至零

时翻开锅盖,其目的是防止容器中的液体暴沸。

【活动4】观看视频:观看有关灭菌操作的视频,理解并学会相应的技术和方法。

R课后学习】

1.尝试利用高压蒸汽灭菌锅进展灭菌。

2.根底训练册:将根底知识整理到作业本上;完成该节训练题。

2.1.2微生物的实验室培养导学案

R学习要求X学会培养基的配制;进展大肠杆菌的纯化培养。

【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成以下问题,并初步稳固。

二、实验操作:

【开拓视野1】〔记忆〕培养基的配制原那么

①目的要明确:根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培

养基的类型和配制量。

②营养要协调:培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。

例如:碳氮比4:1时,谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸

少;碳氮比为3:1时,菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。

③pH要适宜:细菌培养基pH中性或偏碱性,霉菌培养基呈酸

性。

【活动4】〔记忆〕阅读教材“制备牛肉膏蛋白踪固体培养基"局部,讨论并答复以下问题

1.根据配方比例,计算100mL培养基各成分用量。

2.准确称取各成分。称取牛肉膏和蛋白月东时要迅速,目的是防止吸收空气中水分。

3.溶化:加水加热熔化牛肉膏一参加蛋白月东和氯化钠继续加热一参加琼脂一用蒸锵水定容

到100mL。整个过程不断用玻棒搅拌,目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。

4.调pH:用lmol/L的NaOH溶液调节pH至偏碱性。

5.史董:将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加塞包扎后用高压蒸汽灭菌锅灭菌。所用培

养皿用报纸包扎后用干热灭菌箱灭菌。

6.倒平板:待培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰附近操作进展。其过程是:

在酒精灯火焰旁右手拿锥形瓶,左手拔出棉塞;使锥形瓶的强H迅速通过火焰,目的是

消灭瓶口的杂菌,防止杂菌感染培养基;左手将培养皿翻开一条缝隙,右手将培养基倒入培

养皿后,立刻盖上皿盖。待平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,目的是防止培养基冷却过

程中形成的水滴落到培养基外表。

【思考1】假设在皿盖和皿底之间粘有培养基,那么该平板能否培养微生物?为什么?

不能。空气中的杂菌会在这些粘附的培养基繁殖,并污染培养皿的培养基。

【活动5】阅读教材“纯化大肠杆菌"局部,讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕微生物接种的最常用方法是平板划线法和稀释涂布法,另外还有固体斜面接种

等。

2.〔记忆〕平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基外表连续划线的操作,将聚集的菌

种逐步稀释分散到培养基外表。其操作步骤是:将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红;

在酒精灯火焰旁冷却接种环,并翻开大肠杆菌的菌种试管的加塞;将菌种试管口通过幺

焰到达消灭试管口杂菌的目的;将冷却的接种环伸入到苞逡中取出一环菌种;将菌种试

管口再次通过X楚后塞上棉塞;将皿盖翻开一条缝隙,把接种环伸入平板划3〜5条平行

线,盖上皿盖,不要划破培养基;灼烧接种环,冷却后从第一区划线末端开场向第二区

域划线。重复上述过程,完成三、四、五区域划线。注意不要将第五区的划线与第二区

划线相连;将平板倒建放在培养箱中培养。

【思考2]划线前都要灼烧接种环的目的是消灭接种环上杂菌和残留菌种;

取菌种和划线前都要求接种环冷却后进展,其目的是防止高温杀死菌种;

最后灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。

【思考3】每次划线后都从上次划线末端开场,目的是逐步使细菌分散开来。

【活动6】阅读教材“系列稀释操作"和“涂布平板操作“两局部,讨论并答复以下问题:

1.〔学会〕稀释涂布平板法:将菌液进展一系列梯度稀释,并将不同稀释度菌液分别途比

到琼脂固体培养基上进展培养。当稀释倍数足够高时,即可获得单个细菌形成的标准菌

落。

2.〔学会〕系列稀释操作:取盛有2mL水的无菌试管6支,编号。用灼烧冷却的移液管吸

取工mL菌液注入编号为应试管中,并吹打头次,使之混匀。从型倍液中吸取工mL菌

液注入到编号为坦试管吹打均匀,获得坦倍液。依此类推。

3.〔学会〕涂布平板操作:将接种工具涂布器浸泡在盛有体积分数为70%酒精的烧杯中。

将滴管灼烧冷却后,吸取不超过虫[mL菌液滴加到培养基外表。将粘有少量酒精的涂布

器在火焰上引燃,燃尽后冷却8〜10s。用涂布器将菌液涂布均匀。将接种培养基和一个

未接种培养基放到37'C培养箱中培养工h和24h后观察并记录。

三、结果分析与评价:

【活动7】阅读教材“结果分析与评价”和"课题延伸",讨论并答复以下问题。

1.〔记忆〕培养未接种培养基的作用是因遛,假设有菌落形成,说明培养基灭菌不彻底。

2.〔了解〕在肉汤培养基上,大肠杆菌菌落呈白色色,为画形,光滑有光泽,边缘整齐。

3.〔了解〕培养12h和24h后的菌落大小丕回,菌落分布位置一样〔一样、不同〕。

4.〔记忆〕常用菌种利用临时保藏法保存,用固体斜面培养基培养后保存在4℃冰箱中。

长期保存菌种的方法是甘油管藏法,将菌种与无菌苴池体积等量混合后保存在冷冻箱中。

【活动8】观看视频:观看“倒平板"、"系列稀释操作”和“涂布平板操作”等视频,理

解并学会相应的技术和方法。

R课后学习)]

1.尝试模拟“系列稀释操作”和“涂布平板操作"技术。

2.根底训练册:将根底知识整理到作业本上;完成该节训练题。

2.2尿素分解菌的别离与计数导学案

R学习要求U研究培养基对微生物的选择作用;测定微生物数量的操作过程。

【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成以下问题,并初步稳固。

一、根底知识

【活动1】阅读教材P21"课题背景"及"筛选菌株"两局部容,讨论并完成以下问题:

1.(记忆〕尿素是一种重要的氮肥,农作物不能〔能,不能〕直接吸收利用,而是首先通

过土壤中的细菌将尿素分解为氨和CO2,这是因为细菌能合成腺酶。

2.〔理解〕科学家能从热泉中筛选出耐热菌的原因是什么?

通过自然选择,热泵的高温条件淘汰了绝大多数微生物而保存了耐热菌。

3.〔理解〕实验室中筛选微生物的原理是什么?

通过人工选择,人为提供有利于目的菌株生长的条件同时抑制或阻止其他微生物生长。

【活动2】阅读P22旁栏左上"培养基"配方小资料,完成以下问题:

1.〔分析〕该培养基中的碳源是葡萄糖,氮源是尿素,琼脂的作用是凝固剂。

2.〔记忆〕该培养基的选择机制是只有以屋盍为氮源的微生物才能在该培养基上生长。

3.〔记忆〕选择培养基是指允许特定微生物生长而同时抑制或阻止其他微生物生长的培养

基。

〔记忆〕选择培养基的选择性条件〔限制性条件〕包括营养、温度、pH等。

【活动3】阅读教材P22"统计菌落数目"局部,讨论并完成以下问题:

1.〔记忆〕在统计菌落数目时常用稀释涂布平板法。除此还有显微镜直接计数法等。

【开拓视野1】显微镜直接计数

将待测样品与等量的红细胞含量的血液混匀后,涂布在载玻片上,经固定染色后,在

显微镜下随机选取假设干个视野进展计数,得出细菌与红细胞的比例,再根据红细胞的

含量计算出单位体积的细菌数目。也可以用血球计数板直接统计细菌含量。

2.(记忆]当稀释度足够高时,培养基上的一个标准菌落来源于样品稀释液中一个活菌。

为了保证结果准确,一般选择菌落数在30〜300的平板进展计数。

3.(理解〕每克样品细菌数=〔平均菌落数一涂布的稀释液体积〕X稀释倍数。

4.〔理解〕教材资料中第三位同学的结果接近真实值。原因是是第一位同学没有设置重复

实验组;第二位同学其中1个平板的计数结果与另2个相差太远,说明操作有误。

5.〔记忆〕菌落数往往比活菌数低,原因是当2个或多个细菌连在一起时只形成j菌落。

【活动4】阅读教材P22"设置对照”与P23右上栏旁资料两局部,讨论并完成以下问题:

1.[记忆]设置对照的目的是排除非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。

2.〔记忆〕对照实验是指除被测试条件外,其他条件都一样的实验。满足该条件的称为过

照组,未满足该条件的称为实验组。

3.〔设计〕请帮助A同学设计对照实验。

其他同学用A同学的土样进展实验或A同学以不接种的培养基作为空白对照。

二、实验设计

【活动5】阅读教材P23"实验设计”和阅读资料1、2、3,讨论并完成以下问题:

1.〔图文转换〕根据图示2—7填写以下实验流程:

土壤取样I配制土壤溶液I梯度稀释H涂布平板与培养T■讦薮

2.〔记忆〕土壤微生物主要分布在距地表3〜在m近中性土壤中,约70%〜80%为细菌。

3.〔记忆〕别离不同的微生物采用不同的稀释倍数,其中细菌为10“、105、的倍,放线菌

为10,、104、105倍,真菌为102、io\io4倍。培养不同微生物需要不同温度,其中细菌

一般在30〜37℃培养,放线菌一般在25〜28℃培养,霉菌一般在25〜28'C培养。

4.〔理解〕在菌落计数时每隔出h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结

果。

5.〔记忆〕在一定条件下同种微生物表现出稳定的菌落特征,包括形状、大小、颜色等。

三、操作提示、结果分析与评价

【活动6】阅读"操作提示",讨论并完成以下问题:

〔记忆〕取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要工通。应在X超旁称取土壤也g。

将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,塞好棉塞。在梯度稀释土壤溶液的过程中,

每一步都要在火焰旁进展。在培养前要对培养皿作好标记。例如注明培养基类型、培养时间、

稀释度、培养物等。为了提高效率,在操作时更加有条不紊,应当事先规划时间。

〔记忆〕在研究未知微生物时务必规操作,以防被致病微生物感染,实验后一定要洗手。

【活动7】阅读“结果分析与评价及课题延伸“,讨论并完成以下问题:

〔记忆〕对别离的菌种作进一步的鉴定,还需要借助生物化学的方法。例如:在尿素培养

基中参加酚红指示剂,假设培养基变丝,说明细菌能分解尿素;大肠杆菌在伊红美蓝培养基

上培养,菌落呈现黑色。

【活动8】观看视频:观看“土壤中分解尿素的细菌的别离与计数”视频。

[课后学习》

1.尝试“统计菌落数目"。

2.根底训练册:将根底知识整理到作业本上;完成该节训练题。

2.3纤维素分解微生物的别离导学案

[学习要求1简述纤维素酶的种类及作用;掌握从土壤中别离出纤维素的微生物的方法。

【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成以下问题,并初步稳固。

一、根底知识

【活动1】阅读教材P27"课题背景"和"纤维素与纤维素酶”,讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕纤维素是一种由葡萄糖相连而成的高分子多糖类化合物。

2.〔记忆〕诞是自然界中纤维素含量最高的天然产物。纤维素在纤维素酶的催化作用分

解。

请完成以下过程:

纤维素卜葡萄谑苴强葡萄糖

3.〔理解〕实验分析:P27的小实验是如何设置对照的?

在一支试管中添加纤维素酶,另一支试管不添加纤维素酶。

4.〔记忆〕1个酶活力单位(1U]是指在温度为在。C,其它反响条件最适宜情况下,在工min

转化Immol的底物所需要的酶量。

【活动2】阅读教材P28"纤维素分解菌的筛选”,讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕筛选纤维素分解菌的方法是刚果红染色法。该方法可以通过题鱼反响直接筛选。

2.〔记忆〕其原理是:刚果红与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素酶分解后,红

色复合物无法形成,出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,我们可以通过是否产生透明

典来筛选纤维素分解菌。

二、实验设计

【活动3】阅读教材P28"实验设计"局部,完成实验方案流程图,讨论并答复以下问题:

1.〔理解〕实验流程中"选择培养”使用的是什么类型的培养基?该培养的目的是什么?

使用的是纤维素分解菌液体选择培养基。其目的是使纤维素分解菌增殖,含量增多。

2.〔比照〕本实验流程与尿素分解菌的别离实验流程有哪些异同?

尿素分解菌的别离实验流程是将土样制成的菌悬液直接涂布在选择培养基上;本课题通

过选择培养使细菌增殖后,再涂布在鉴别培养基上。其它操作根本根本共同。

【活动4】阅读教材P28“资料一土壤取样”,讨论并答复以下问题:

1.〔理解〕纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中。

2.〔理解〕为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌?

生物适应一定环境,环境对生物具有选择作用,只有在纤维素含量丰富的环境中纤维素

分解菌的含量才会高于其它普通环境,从而提高获得目的微生物的几率。

3.〔理解〕将滤纸埋在土壤中有什么作用?人工设置适宜环境,使纤维素分解菌相对聚集。

〔记忆〕滤纸应该埋进土壤多深?一般将纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。

【活动5】阅读教材P29”资料二选择培养基"和栏旁培养基配方,讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕纤维素分解菌选择培养基属于逐生〔液体、固体〕培养基。

〔记忆〕纤维素分解菌鉴别培养基属于里使〔液体、固体〕培养基。

2.〔记忆〕纤维素分解菌选择培养基的选择作用机制是什么?

以纤维素粉为唯一碳源,只有分解纤维素分解菌才能生存。

3.〔理解〕假设设置对照实验说明选择培养的作用,应控制的变量是将纤维素粉改为葡萄

【活动6】阅读教材P29“资料三刚果红染色法”,填表比拟两种染色法的各自的优缺点:

染色法优点缺点

颜色反响根本上是操作繁琐

方法一

纤维素分解菌的作用刚果红会使菌落之间发生混杂

操作简便产生淀粉酶■的微生物也产生模糊透明圈,

方法二

不存在菌落混杂问题有些微生物能降解色素,形成明显的透明圈。

4.〔理解〕为什么选择培养能够"浓缩"所需的微生物?

在选择培养的条件下,可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖,而那

些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到"浓缩”的作用。

三、操作提示、结果分析与评价、课题延伸

【活动7】阅读教材P30"课题延伸",答复:

1.〔记忆〕为了确定别离得到的是纤维素分解菌,还需要进展发酵产纤维素酶实验,纤维

素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。

2.〔记忆〕纤维素酶的测定方法,一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素产生的葡固疆含量

进展定量测定。

【活动8】观看视频:观看“分解纤维素的微生物的别离”视频。

R课后学习)]

1.尝试进展分解纤维素的微生物的别离。

2.根底训练册:将根底知识整理到作业本上;完成该节训练题。

3.1菊花的组织培养导学案

、R学习要求》说明植物组织培养的根本原理;学习植物组织培养的根本技术。

【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成以下问题,并初步稳固。

一、根底知识

【活动1】联系“细胞的分化”,阅读教材P32"课题背景"局部,讨论并答复以下问题:

1.〔温习〕具有某种生物全套遗传信息的活细胞都具有发育成完整个体的能力,即全能性。

但这在生物体并未表现出来,原因是通过基因的选择性表达而使细胞处于分化状态。

2.〔记忆〕当植物细胞脱离原来所处的植物体的器官或组织而处于通於状态时,在一定的

营养物质、激素和其他外界条件的作用下,细胞就可能表现出全能性,发育成完整植株。

【活动2】阅读教材P32”植物组织培养的根本过程”,讨论并完成以下问题:

1.〔温习〕细胞分化是在个体发育中细胞在形态、构造和生理功能上出现稳定性差异过程。

2.〔记忆〕愈伤组织是离体植物组织通过细胞分裂形成的、细胞排列疏松而无规那么的、

高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞。

3.〔记忆〕植物组织包括脱分化和再分化两个根本阶段,该过程可简单表示为:

【活动3】阅读教材P33”影响植物组织培养的因素”,讨论并完成以下问题:

1.〔记忆〕材料:植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果。

菊花组织培养一般选择未开化植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。

2.〔记忆〕营养:组织培养一般常用的培养基是培养基,其中含有甘氨酸、烟酸、肌

醇、维生素、蔗糖等有机物。

3.〔记忆〕激素:在培养基中需要添加植物激素有生长素和细胞分裂素等。

4.〔记忆〕激素使用的先后顺序及其用量比例对细胞分裂和分化的影响。

使用顺序实验结果生长素/细胞分裂素比值与结果

先生长素,后细胞分裂素有利于分裂但不分化比值高时促根分化,抑芽形成

先细胞分裂素,后生长素细胞既分裂也分化比值低时促芽分化,抑根形成

同时使用分化频率提高比值适中促进愈伤组织生长

5.〔记忆〕环境条件:型、温度、光等环境条件。

二、实验操作

【活动4】阅读教材P34”制备MS固体培养基",讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕配制各种母液:大量元素配制成典倍浓缩液,微量元素配制成电2_倍浓缩液,

微量有机物配制成Img/mL的母液。

2.〔记忆〕配制培养基:按配方称取琼脂、感超以及各种母液,配制MS培养基。在菊花

组织培养中,可以不添加植物激素,原因是菊花茎段组织培养比拟容易。

3.〔记忆〕灭菌:采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。

【思考】与肉汤培养基相比,MS培养基有何特点?

肉汤培养基以有机营养为主,MS培养基那么需提供大量无机营养。

【活动5】阅读教材P34“外植体消毒”,讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕填写以下流程图:

(无菌吸水纸)

吸干表面水分

(无菌吸水纸)

吸干表面水分

2.〔记忆〕在此消毒过程中,是不是强度越大越好,为什么?

不是。对外植体进展外表消毒时,既要考虑到消毒效果,又要考虑到植物的耐受能力。

【活动6】阅读教材P34"接种、培养、移栽和栽培",讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕前期准备:用70%的酒精消毒工作台,点燃酒精灯。所有工作都必须在酒精灯

旁进展,器械使用前后都要用火焰灼烧灭菌。

2.〔理解〕接种操作:插入外植体时形态学上端朝上,每个锥形瓶接种7〜8个外植体。

3.〔记忆〕培养过程:应该放在无菌箱中进展,并定期进展消毒,保持适宜的温度和光照。

4.〔记忆〕移栽:打口膜,在培养间生长几日;然后用流水清洗根部培养基,将幼苗移植

到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生活一段时间,进展壮苗。最后进展露天栽培。

三、结果分析与评价

【活动7】阅读教材P35”结果分析与评价"和P34"课题延伸",讨论并答复以下问题:

1.〔理解〕外植体在培养过程中可能会被污染,你认为造成污染的原因有哪些?

培养基灭菌不彻底;外植体消毒不彻底;接种中被杂菌污染;锥形瓶密封性差等。

2.〔记忆〕一般说来,容易进展无性繁殖的植物,也容易进展组织培养。

【活动8】观看视频:观看“菊花的组织培养"视频,体会并学会相关技术和方法。

[课后学习]]

根底训练册:将根底知识整理到作业本上;完成该节训练题。

3.2月季的花药培养导学案

[{学习要求H认识花药发育经历;知道花药培养途径和影响因素;学会材料的选择和消毒。

【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成以下问题,并初步稳固。

一、根底知识

【活动1】阅读教材P37"课题背景",讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕生殖细胞和体细胞一样,在离体条件下,也具有全能性。

2.〔理解〕填写以下月季育种流程图:

(单倍体)育种

【活动2】阅读教材P37“被子植物的花粉发育”,讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕被子植物的花粉是在花药中由花粉母细胞经过减数分裂形成的。

2.〔理解〕结合教材容填以下示意图:

3.〔记忆〕被子植物的花粉的发育要经历四分体时期,单核期和双核期等阶段。在正常情

况下,一个小抱子母细胞可以产生贵个精子;在一枚花药中可以产生至箜个花粉。

【活动3】阅读教材P38"产生花粉植株的两条途径”,讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕产生花粉植株〔单倍体植株〕的途径:花粉通过胚状体阶段发育为植株,二是

通过愈伤组织阶段发育为植株。这两条途径取决于培养基中激素的种类及其浓度的配比。

2.〔理解〕填写培育花粉植株的途径图解:

3.〔理解〕胚状体的构造及其发育过程与种子胚相似,所以把胚状体到丛芽的过程称为宏

色,而把从愈伤组织到从芽的过程称为再分化。

【活动4】阅读教材P38”影响花药培养的因素”局部,讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕影响花粉植株的主要因素:材料的选择和培养基的组成等。

2.〔记忆〕材料的选择:从花药来看,应中选择初花期的花药;从花粉来看,应中选择垩

核期的花粉;从花蕾来看,应中选择完全未开放的花蕾。

3.〔了解〕影响花粉诱导成功率的因素还有哪些?

植物种类、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培养基组成、培养条件等。

【思考】花瓣松动会给材料消毒带来困难,原因是外界微生物容易侵入到花药中。

二、实验操作

【活动5】阅读教材P39"材料的选择"和“材料的消毒",讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕选择花药时一般通过建检确定花粉发育时期,对花粉细胞核进展染色最常用的

染色剂有醋酸洋红溶液和焙花青一珞锐溶液,它们分别可以将细胞核染成红色和迄邕色。

2.〔记忆〕在使用焙花青一络锐溶液时,需要首先将花药用卡诺氏固定液处理20mino该

试剂的配制方法是将无水酒精和冰醋酸按体积比为3:1的比例混合均匀。

3.〔记忆〕填写以下流程图:

【活动6】阅读教材P40“接种和培养”,答复以下问题:

1.〔记忆〕剥取花药:要在无菌条件下剥取花药,一注意不要损伤花药,原因是受伤部位

容易产生愈伤组织;二要彻底除去花丝,原因是花丝不利于愈伤组织或胚状体的形成。

2.〔记忆〕接种花药:剥取的花药接种到MS培养基上,每个培养瓶接种7〜10个花药。

3.〔记忆〕培养花药:幼苗形成之前不需要〔需要、不需要〕光照。培养20—30d后,花

药开裂,长出愈伤组织或释放出胚状体。前者还要转移到分化培养基上进展分化培养成

再生植株;后者要尽快红并转移到新的培养基上。

4.〔理解〕通过愈伤组织形成的植株,常常会出现染色体倍性的变化,原因是有些植株是

由花粉细胞发育形成的,有些植株是由花粉壁细胞发育形成的,因而需要鉴定和筛选。

【活动7】观看视频:观看“月季的花药培养”视频,体会并学会相关技术和方法。

R课后学习1

1.上网搜集有关植物组织培养的资料,并进展解读。

2.根底训练册:将根底知识整理到作业本上;完成该节训练题。

4.1果胶酶在果汁生产中的作用导学案

K学习要求7简述果胶酶的作用;检测果胶酶的活性;探究温度和pH对果胶酶活性的影响

以及果胶酶的最适用量。

【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成以下问题,并初步稳固。

一、根底知识

【活动1】阅读教材P42"课题背景"和"果胶酶的作用”,讨论并答复以下问题:

1.〔理解〕制作果汁主要解决的两个问题:一是果肉出汁率低、耗时长;二是果汁混浊黏

度高、易沉淀。原因是果肉中含有果胶成分,它是植物细胞壁和胞间层的主要成分之一。

2.〔理解〕果胶酶的作用是:瓦解植物的细胞壁及胞间层,使榨取果汁更容易;把果胶分

解为可溶性的半乳糖醛酸,使浑浊的果汁变得澄清。

3.〔记忆〕果胶酶是一类酶的总称,包括:多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。

【活动2】阅读教材P42”酶的活性与影响酶活性的因素”,讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕酶的活性是指酶催化一定化学反响的能力。酶的活性上下可用一定条件下的酶

促反响速度〔即单位时间、单位体积反响物消耗量或产物生成量〕来表示。

2.〔理解〕影响酶活性的因素有温度、巳口、激活剂和抑制剂等。

【活动3】阅读教材P43“果胶酶的用量",讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕食品工业生产中最常用的果胶酶是通过霉菌发酵产生。

2.〔理解〕根据影响酶活性的因素,在实际生产中我们如何获得果胶酶的最高活性?

确定果胶酶的最适温度、最适PH等条件。

二、实验设计

【活动4】阅读教材P43“资料一:探究温度和PH对酶的活性的影响",尝试进展实验设

计:

1.〔设计J实验目的:定量测定果胶酶的最适温度或最适pH。

2.〔理解〕实验原理:果胶酶能分解果胶,增大果汁的乃重,提高果汁的澄清度。

3.〔设计〕变量设计与控制:

实验自变量是温度〔或pH〕,控制自变量的方法是利用恒温水浴锅〔或滴加酸碱等〕。

你确定的温度梯度〔或pH梯度〕为10C或5℃〔或0.5、1.0〕。

实验的因变量是酶的活性,检测因变量的方法是测定果汁的产出量或澄清度。

4.〔理解〕果汁与果胶酶在混合之前,分装在不同试管中用同一恒温处理的目的是什么?

保证果汁与果胶酶混合前后的温度一样,防止因混合导致温度变化而影响果胶酶活性。

5.〔理解〕该实验中是否设置了对照?为什么?

已经设置了对照。不同的温度设置之间可以相互对照。

6.〔简述〕根据以上分析,设计出你的实验步骤。

7.〔设计〕设计实验结果记录表

温度"C〔或pH〕

果汁量/ml

【活动5】阅读教材P44“资料二:探究果胶酶的用量",讨论并答复以下问题:

1.〔理解〕探究果胶酶的最适用量实验中应该控制怎样的温度和pH条件?

根据“探究温度和pH对酶活性的影响”实验结果确定该实跄的最适温度和最适pH。

2.〔设计〕你认为此实验的自变量应当是果胶酶的用量一那么怎样控制该自变量?

配制不同浓度的果胶酶〔或添加不同体积的一种浓度的果胶酶溶液〕。

3.〔设计〕实验因变量是果汁体积或澄清度。其他所有条件控制一样〔一样,不同〕。

4.〔简述〕根据以上分析,设计出你的实验步骤。

5.〔设计〕设计实验结果记录表:

果胶酶用量[U/mlJ

果汁量/ml

三、操作提示、结果分析与评价

【活动6】阅读教材P44"操作提示"和"结果分析与评价”,讨论并答复以下问题:

1.(知道〕制备果泥:用榨汁机榨制果泥。在榨制橙子汁时应怎样处理橙皮?不必去橙皮

2.〔记忆〕在探究不同pH对果胶酶活性的影响时,可用0.1%的NaOH溶液和盐酸调节。

3.〔记忆〕为了是果胶酶能充分地催化反响,如何操作?用玻璃棒不时搅拌。

【活动7】观看视频:观看“果胶酶在果汁生产中的应用“视频,体会并学会相关技术方法。

[课后学习X

1.尝试利用果胶酶制作果汁。

2.根底训练册:将根底知识整理到作业本上;完成该节训练题。

4.2探究加酶洗衣粉的洗涤效果导学案

[学习要求]说出加酶洗衣粉的洗涤原理;探讨温度对加酶洗衣粉的洗涤的影响;探讨不同

种类的加酶洗衣粉对同一污物和不同污物洗涤效果的区别

【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成以下问题,并初步稳固。

一、根底知识

【活动1】阅读教材P46"课题背景"及"根底知识",讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕加酶洗衣粉是指含有酶■制剂的洗衣粉,常用的酶■制剂有四类:蛋白酶、脂肪酶、

淀粉酶、纤维素酶。其中应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

2.〔理解〕碱性蛋白酶为什么具有很强的去污能力?

酶具有高效性,能迅速将血渍、奶渍分子蛋白质分解成可溶性小分子肽和氨基酸。

3.(记忆〕影响酶活性的因素有温度、酸碱度和外表活性剂。

【开拓视野1】外表活性剂

外表活性剂是指具有固定的亲水亲油基团,在溶液的外表能定向排列,并能使外表

力显著下降的物质。无论何种外表活性剂,其分子构造均由疏水基〔亲油基〕和亲水基

〔疏油基〕两局部构成。形成了既亲水、又亲油,便又不是整体亲水或亲油的特性。

外表活性剂包括阴离子外表活性剂〔硬脂酸、十二烷基苯磺酸钠〕、阳离子外表活

性剂〔季铁化物〕、两性离子外表活性剂〔卵磷脂、氨基酸型、甜菜碱型〕、非离子外

表活性剂〔脂肪酸甘油酯、脂肪酸山梨坦、聚山梨酯〕。

4.〔记忆〕酶能直接添加到洗衣粉中吗?为什么?科学家是如何解决这一难题的?

不能,因为洗衣粉中的外表活性物质会降低酶的活性。将基因工程生产出的酶用特殊水溶

性物质包裹起来,与洗衣粉的其它成分隔离开来。

【思考】〔记忆〕为什么说加酶洗衣粉能减少对环境的污染?

加酶洗衣粉可以降低外表活性剂和三聚磷酸钠的用量,使洗涤剂朝低磷、无磷的方向开展。

【开拓视野2】普通洗衣粉

普通洗衣粉的化学成分有外表活性剂、水软化剂、碱剂、漂白粉等成分,有的洗衣

粉中还含有增白剂、香精和色素,以及填充剂等。

二、实验设计

【活动2】阅读教材P47"如何有效地控制变量",探究加酶洗衣粉的洗涤效果:

1.〔分析〕A同学的实验方案是否存在问题吗?请说明理由。

有问题。未说明控制一样的适宜温度;玻棒搅拌强度难于控制一样;未确定布料颜色等。

2.〔分析〕你是否同意B同学观点?请说明理由。

不同意。B同学忽略了实验中变量的控制问题。

3.〔创新〕实验应控制的单一变量是普通洗衣粉和加酶洗衣粉的区别,其他条件如洗衣粉

用量、水温、水质、水量、布料的大小和颜色、洗涤方式、洗涤时间等应一样且适宜。

【活动3】阅读教材P47”考虑实际生活中的具体情况",探究温度对加酶洗衣粉效果的影

响:

1.[设计]自变量的设置与控制:10℃、20℃、30℃、40°C、50℃、60℃。

2.〔设计〕无关变量设置与控制:洗涤方式采用全自动〔半自动、全自动〕比拟好,并且

使用的洗衣机和洗涤模式应一样;实验材料以布料〔衣物、布料〕比拟可行,做对照实

验时可以控制布料的大小、颜色以及污物量〔可用滴管控制〕等使其一样,以便于比对。

3.〔记忆〕你认为一个完整的实验方案应包括哪些根本容?

课题名称、实验目的、实验原理、实验材料、实验步骤、实验结果、实验结论等。

【活动41探究不同种类的加酶洗衣粉对同一污物和不同污物洗涤效果的比拟

1.〔记忆〕在活动2中,酶的有无是自变量,而其他因素在实验中应保持不变;

〔记忆〕在活动3中,退度是自变量,而其他因素在实验中应保持不变。

〔分析〕在该实验中,酶的种类和污渍种类是自变量,而其他因素在实验中应保持不变。

2.〔分析〕有位同学打算用丝绸做实验材料,探讨加酶洗衣粉的洗涤效果,你认为他这样

做适宜吗?为什么?

不适合。因为丝绸面料属于蛋白质成分,加酶洗衣粉会分解破坏丝绸。

【开阔视野3】使用洗衣粉的考前须知

已溶解在水里的洗衣粉,可通过皮肤吸收进入人体,长期积累易损害肝脏功能,甚

至致癌。

洗衣粉是烷基苯磺酸钠、硫酸钠、甲苯碘酸钠、三聚磷酸钠以及疑甲基纤维合成的

碱性化学洗涤剂。常接触洗衣粉(水),易使皮肤角化、皴裂;用洗衣粉洗头会使头发变黄、

发脆;进入人体造血系统后会影响肝脏功能。

加酶洗衣粉参加了碱性蛋白酶,以水解衣物上的蛋白质,起到去污除垢的作用。这

种碱性蛋白酶同样可分解皮肤外表蛋白质,而使人患过敏性皮炎、湿疹等。

用洗衣粉洗过的衣被,需经清水彻底漂洗干净;婴儿尿布、衣、裤、以及成人衣不

要用洗衣粉洗〔但是可使用肥皂、或天然皂粉〕;洗涤炊具、碗筷也不宜使用洗衣粉。

长期接触洗衣粉的人员应有必要的防护,尽量不要直接接触洗衣粉。

【活动5]观看视频:观看“探究加酶洗衣粉的洗涤效果”视频,体会并学会相关技术方法。

R课后学习)]

1.每个学习小组设计并撰写一个完整的探究温度对加酶洗衣粉洗涤效果影响的实验方案。

2.根底训练册:将根底知识整理到作业本上;完成该节训练题。

4.3酵母细胞的固定化导学案

K学习要求]说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理;

尝试制备固定化酵母细胞,并利用固定化酵母细胞进展酒精发酵

【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学交流和讨论,完成以下问题,并初步稳固。

一、课题背景

【活动1】阅读教材P49"课题背景",讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕在应用酶的生产中,人们遇到的实际问题有:酶■受环境条件影响而容易失活;

酶分子很难回收利用而提高生产本钱;酶分子混合在产物中而影响产品质量。

2.〔记忆〕固定化酶〔细胞〕的原理:将酶〔细胞〕固定在不溶于水的载体上。使酶〔细

胞]既能与反响物接触,又能与产物别离,还可以被反复利用。

【开拓视野】固定化酶■和固定化细胞的技术开展

开展阶段优点问题

催化效率高,低能耗低污染,应用对环境敏感易失活,很难回收,影响

广泛质量。

既能与底物反响,又能别离回收利很多产物是由多种酶催化形成的,应

固定化酶

用用受限

固定化细

本钱低,操作更容易细胞具有一定寿命,形成其他产物

月包

二、根底知识

【活动2】阅读教材P49“固定化酶的应用实例",讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕高果糖浆的生产原理是:

(葡萄糖异构)酶

葡萄糖*果糖

2.〔理解〕在生产高果糖浆过程中,将葡萄糖异构酶固定在颗粒状载体上,并装入到反响

柱中。从反响柱上端注入葡萄糖溶液,从下端流出果糖溶液。

【活动3】阅读教材P50"固定化技术的方法”,讨论并答复以下问题:

1.〔记忆〕将酶和细胞固定化方法有包埋法、化学结合法和物理吸附法。

2.〔理解〕酶和细胞的固定方法和特点比拟

固定对象酶

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