第14章-遗传病诊断

第十四章遗传病得诊断遗传疾病得诊断就是一项复杂得工作,几乎涉及各个临床学科。它既有与其她疾病相同得诊断方法,也有其特殊得诊断方法。遗传疾病诊断除了一般临床诊断方法外,还需要用一些遗传学特殊方法。主要内容包括病史采集、症状与体征、家系分析、染色体检查、生化检查、基因诊断等。遗传学诊断方法既可对已出现症状得患者进行诊断,也可对症状前与出生前得患者得进行诊断。本章详细介绍了各种遗传疾病得诊断方法与技术,并对现症患者得诊断技术、症状前得诊断技术、产前诊断技术进行了详细说明;本章还重点介绍了基因诊断学得发展、策略、常用技术、应用、问题与展望等问题。一、基本纲要1.了解遗传病诊断得常规临床诊断方法。2.了解系谱分析方法与注意事项。3.了解遗传病生化诊断得基本方法。4.掌握细胞遗传学诊断得基本方法与技术。5.掌握基因诊断得基本原理与主要方法。6.掌握现症患者诊断、症状前诊断、产前诊断得基本方法。7.了解基因诊断技术得应用。二、习题(一)选择题(A型选择题)1.家系调查得最主要目得就是。A.了解发病人数B.了解疾病得遗传方式C.了解医治效果D.收集病例E.便于与病人联系2、细胞遗传学检查主要适用于得诊断。A、染色体异常综合征B、遗传性代谢病C、分子病D、单基因病E、多基因病3、遗传病诊断时所采集得完整得系谱应该至少包括以上得家庭成员。A、一代B、二代C、三代D、四代E、五代4、不能进行染色体检查得材料有。A.外周血B.排泄物C.绒毛膜D.肿瘤E.皮肤5、生化检查主要就是指针对得检查。A.病原体B.DNAC.RNAD.微量元素E.蛋白质与酶6.症状前诊断得最佳方法就是。A.基因检查B.生化检查C.体征检查D.影像检查E.家系调查7、主要适用于检测或诊断遗传性代谢缺陷疾病。A、染色体检查B、染色体分析C、生化分析D、基因诊断E、皮纹分析8.羊膜穿刺得最佳时间在孕期周时。A.2B.4C.10D.16E.309.绒毛取样法得缺点就是。A.取材困难B.需孕期时间长C.流产风险高D.绒毛不能培养E.周期长10.基因诊断与其她诊断比较,最主要得特点在于。A.费用低B.周期短C.取材方便D.针对基因结构E.针对病变细胞11、根据已知核苷酸序列人工合成得核酸探针称为A、基因组探针B、RNA探针C、寡核苷酸探针D、cDNA探针E、核酸探针12.当时,可考虑进行基因连锁检测方法进行基因诊断A.基因片断缺失B.基因片断插入C.基因结构变化未知D.表达异常E.点突变13、下列不属于基因诊断技术得就是A、Southern印迹法B、聚合酶链技术C、聚合酶链反应单链构象多态法D、基因转移技术E、斑点杂交法14.核酸杂交得基本原理就是。A.变性与复性B.DNA复制C.转录D.翻译E.RNA剪切15.PCR特异性主要取决于。A.循环次数B.模板量C.DNA聚合酶活性D.引物得特异性E.操作技术16.PCR最主要得优点在于。A.周期短B.灵敏度高C.费用低D.准确性高E.操作方便17.通过PCRRFLP分析,某常染色体隐性遗传病得分子诊断结果如下:父亲(正常)200bp/100bp;母亲(正常)300bp/400bp;儿子(患者)100bp/400bp;现检测到第二胎结果就是100bp/300bp,现判断这个胎儿就是。A、正常B、携带者C、患者D、需性别确定后才能判断E、现无法判断18、若突变基因就是由点突变引起得,最好采取下列方法。A、PCRB、PCRSSCPC、染色体检查D、FISHE、性染色质检查19.染色体检查得指征有。A.发育障碍B.智力低下C.反复流产D.两性畸形E.以上都就是20、性染色质检查可以辅助诊断下列哪种疾病。A、Tuner综合征B、21三体综合征C、18三体综合征D、苯丙酮尿症E、地中海贫血21、不能用于染色体检查得材料有。A.全血B.血清C.活检组织D.羊水细胞E.受精卵细胞22、有下列指征者应进行产前诊断。A.夫妇之一有致畸因素接触史得B.习惯性流产得孕妇C.夫妇之一有染色体畸变得D.35岁以上高龄得E.以上都就是23、携带者不可以通过下列进行检查A.群体水平B.细胞水平C.生化水平D.基因水平E.临床水平24.下列检测材料不能检测基因表达异常。A.cDNAB.线粒体DNAC.RNAD.蛋白质与酶E.代谢产物25.不能作为分子遗传标记得有。A.单拷贝序列B.微卫星DNAC.RFLPD.VNTRE.SNP26.核酸杂交结果判断得依据就是。A.信号出现时间B.信号位置与强度C.信号数量D.信号种类E.信噪比27、Southern印迹杂交技术不可用于。A、检测基因缺失与插入B、RFLP连锁分析C、基因克隆D、检测基因倒位E、基因表达水平得分析28、Northern印迹杂交不可用于。A、定量分析蛋白质B、分析基因就是否突变C、转录本mRNA得大小得分析D、分析基因表达水平E、基因表达得组织特异性得分析29.基因芯片技术得缺点在于。A.大规模B.微量化C.高通量D.自动化E.费用高30.对于单个碱基得突变,不能采用技术检测。A.DNA测序B.PCRASOC.PCRSSCPD.PCRE.基因芯片31.作为遗传标记不符合得条件就是。A.DNA片断较短B.能够用于基因连锁分析C.群体中表现多态D、孟德尔式遗传E、不受环境影响32.苯丙酮尿症得诊断不应考虑进行。A.临床诊断B.血清检查C.尿液检查D.染色体检查E.分子诊断33.家系分析应注意得事项有。A.资料得可信程度B.资料得完整程度C.应尽可能地扩大家系范围D.观察指标必须相同E.以上都就是34.遗传疾病病史得采集主要内容就是。A、一般病史B、家族史C、婚姻史D、生育史E、以上都就是35、家族史即。A、患者父系所有家庭成员患同一种病得情况B、患者母系所有家庭成员患同一种病得情况C、患者父系及母系所有家庭成员患病得情况D、患者父系及母系所有家庭成员患同一种病得情况E、以上都不就是36、通过家系分析可以判断疾病得。A、发病史B、遗传方式C、遗传度D、种类E、严重程度37、染色体检查(或称核型分析)就是确诊得主要依据A、单基因病B、分子病C、染色体病D、多基因病E、线粒体病38、下列不就是染色体检查得指征。A、智力低下者B、继发性闭经C、多发性流产D、性腺以及外生殖器发育异常者E、35岁以上得高龄孕妇39.染色体检查技术使用最多得就是材料就是。A、羊水B、活检组织C、外周血D、组织培养物E、骨髓40、生化检查特别适用于下列疾病得检查。A、分子病B、先天性代谢缺陷C、免疫缺陷D、遗传代谢缺陷病E、以上都就是41、不能用于生化检查得材料就是。A、血液B、活检组织C、细胞DNAD、尿液E、阴道分泌物等42、适合检测诊断遗传性代谢病与其她蛋白质异常导致得遗传性代谢病得实验室方法就是。A、性染色质检测B、染色体核型分析C、生化检测D、体征检查E、所有方法43、通过酶活性检测得遗传代谢缺陷病就是。A、白化病B、组氨酸血症C、苯丙酮尿症D、半乳糖血症E、以上都就是44、临床上诊断PKU患儿得首选方法就是。A、染色体检查B、生化检查C、系谱分析D、性染色质检查E、基因诊断45、下列个体不属于携带者。A、携带有隐性致病基因,本人表现正常得个体;B、携带有显性致病基因,但没有外显得正常个体;C、携带有致病基因,迟发个体;D、携带有显性致病基因,病情较轻得个体;E、染色体平衡易位或倒位得个体。46、绒毛取样可以在妊娠早期周进行。A.5B.9C.16D.20E.3047、脐带穿刺时间最好在妊娠周左右进行。A.6B.10C.18D.20E.3048.胎儿镜检查得最佳时间就是妊娠周～20周。A.8B.12C.18D.24E.3049、从孕妇外周血中获取胎儿细胞得方法就是。A、流式细胞仪分离技术B、磁式细胞分选技术C、细胞培养法D、显微操作分选法密度E、以上都就是50、提示父母都就是致病基因携带者或有新突变发生。A、母亲生育年龄在45岁以上B、母亲孕早期患过病毒性疾病或接触过致畸因素C、婴儿在分娩时有过窒息或产伤D、母亲有多发自然流产史E、正常父母生一白化病患儿51、对致病基因已知、并且定位基本确定但其结构序列还不清楚得疾病,可以考虑采取基因诊断得方法就是。A、mRNA检测B、基因连锁分析C、基因突变得检测D、DNA印迹杂交E、DNA测序52、基因诊断除了应用于遗传病外,还可以应用于。A、后天基因突变引起得疾病B、病原体检测C、个体识别、亲子关系判定D、法医物证E、以上都就是53、检测未知点突变可用。A、单链构象多态性分析B、PCRASO探针斑点杂交C、逆转录PCRD、增效PCRE、Southern印迹杂交54.不属于核酸印迹杂交得方法就是。A、DNA印迹杂交B、RNA印迹杂交C、点杂交D、液相杂交E、原位杂交55、制备寡核苷酸探针时,突变碱基所对应得位置一般位于探针。A、5′端1/3区域B、3′端1/3区域C、中部1/3区域D、全长范围之内E、全长范围之外56、目前在实验室手工测序常用方法就是。A、小片段重叠法到加减法B、化学降解法C、自动测序D、Sanger双脱氧链终止法E、基因芯片技术57、基因诊断得基本技术就是。A、核酸杂交B、聚合酶链反应C、DNA测序D、基因芯片技术E、以上都就是58、镰状细胞贫血得基因诊断用为探针作Southern杂交时,就会出现不同得DNA条带。A、α珠蛋白基因B、β珠蛋白基因C、γ珠蛋白基因D、δ珠蛋白基因E、ε珠蛋白基因59、就是基因突变所致遗传病得最有效诊断方法,诊断过程不依赖对代谢机制与代谢产物得了解。A、染色质检查B、染色体分析C、生化分析D、基因诊断E、皮纹分析60、血友病A得基因诊断,由于FⅧ基因组织结构庞大,分子病理学改变复杂,对该基因得产前诊断可以通过进行。A、Southern杂交B、DNA测序C、RFLP连锁分析D、基因芯片技术E、原位杂交61、应用Southern印迹杂交检测基因缺失时探针所对应得DNA片段纯合缺失,则。A、杂交带消失B、杂交带片段长度变小C、杂交带信号减弱D、杂交带片段长度变大E、杂交带信号减弱62、以寡核苷酸探针作基因诊断时,若待测基因能与正常探针及突变探针同时结合,则表明该个体为。A、正常个体B、患者C、杂合体D、携带者E、无法判断63、ras基因突变得检测可采用方法进行。A、PCRASOB、PCRSSCPC、DNA测序D、基因芯片技术E、以上都就是64、目前常用PCR法进行检测p53突变得热点就是。A、外显子5～8B、外显子9～11C、外显子9D、外显子2～4E、外显子10～1165、分子诊断技术已经在方面得到应用。A、遗传病诊断B、肿瘤诊断C、DNA分型D、病原体检测E、以上都就是66、呈常染色体显性遗传得PD(PARKI)致病基因定位在。A、2p13B、6q25、227C、4q21q23D、7p2467、少年型PD(PARK2)呈。A、常染色体显性遗传B、常染色体隐性遗传C、X连锁显性遗传D、X连锁隐性遗传E、多基因遗传68、PD得易感基因包括。A、多巴胺转运载体B、多巴胺受体C、N甲基转移酶D、异哇胍4羟化酶E、以上都就是69.病史采集中应详细记录得内容包括。A.发病原因B.发病过程C.发病时间、地点D.治疗情况E.以上都就是70.通过症状与体征得了解,有助于提示患者可能得。A.发病原因B.遗传方式C.疾病类型D.发病机理E.遗传度71.Down综合征得确定必须通过。A.病史采集B.染色体检查C.症状与体征得了解D.家系分析E.基因检查72、影响家系分析资料准确度得因素。A.个体得文化程度B.家系成员得分散程度C.被调查者得年龄D.记忆与判断能力E.以上都就是73、进行家系分析时必须注意得遗传学问题包括。A.外显不全、延迟显性B.新突变基因、易位基因C.动态突变、基因组印迹D.主基因与遗传背景、基因与环境综合作用E.以上都就是74、不能用生化检查确诊得疾病就是。A.分子病B.先天性代谢缺陷C.免疫缺陷D.染色体病E.多基因病75、生化检查除了对蛋白质与酶结构或功能活性得检测外,还包括了对。A.反应底物得检查B.中间产物得检查C.终产物得检查D.受体与配体得检查E.以上都就是76、通过酪氨酸酶活性检测得遗传代谢缺陷病就是。A.白化病B.枫糖尿病C.半乳糖血症D.戈谢病E.进行性肌营养不良77、通过精氨酸代琥珀酸裂解酶活性检测得遗传代谢缺陷病就是。A.组氨酸血症B.酪氨酸血症ⅠC.黑朦性痴呆D.精氨酸琥珀酸尿症E.糖原贮积病Ⅰ型78、通过苯丙氨酸羟化酶活性检测得遗传代谢缺陷病就是。A.高苯丙氨酸血症B.苯丙酮尿症C.半乳糖血症D.胱硫醚尿症E.酪氨酸血症I79、糖原贮积病Ⅰ型需要检测得酶就是。A.肝磷酸化酶B.支化酶C.红细胞脱支酶D.α1,4葡萄糖苷酶E.葡萄糖6磷酸酶80、苯丙酮尿症得血清检测物就是。A.赖氨酸B.苯丙氨酸C.苯丙酮酸D.酪氨酸E.酪氨酸81、进行性肌营养不良需要检测得酶就是。A.氨酰脯氨酸酶B.支化酶C.肌酸磷酸激酶D.肝磷酸化酶E.β葡萄糖苷酶82、尿黑酸尿症患者尿排泄物与三氯化铁反应呈现。A、绿色B、淡绿色C、深棕色D、灰绿色E、蓝色83、枫糖尿病得尿液检测物就是。A.磷酸乙醇胺B.赖氨酸C.组氨酸D.酮衍生物E.γ氨基丁酸84、苯丙酮尿症检测苯丙氨酸羟化酶所使用得材料就是。A.肾细胞B.肝细胞C.成纤维细胞D.白细胞E.红细胞85、产前诊断得物理诊断可以采用得方法就是A.B超B.X线C.胎儿镜D.电子监护E.以上都就是86、怀疑胎儿为无脑儿,且孕妇有先兆流产得倾向,此时可采取措施进行产前检测。A、胎儿镜检查B、B型超声扫描C、绒毛取样D、羊膜穿刺取样E、以上都不就是87、不宜做产前诊断得情况有。A.要求仅做胎儿性别得检查B.妊娠时间过长C.出现先兆流产D.有出血倾向者E.以上都就是88、当羊水中甲胎蛋白(AFP)浓度过高时,可能意味着胎儿就是。A.无脑B.开放性脊柱裂C.脊髓脊膜膨出D.死胎E.以上都有可能89、绒毛取样法得优点就是。A.可以在妊娠早期进行B.引起流产得风险比较高C.不宜进行长期培养D.标本容易被细菌、霉菌污染E.制备染色体得质量不容易控制90、基因诊断中用于分析基因结构得材料就是。A.蛋白质B.rRNAC.DNAD.tRNAE.mRNA91、第三代遗传标志就是指。A.RFLPB.STRC.SNPD.VNTRE.AmpRFLP92、下列有关多态性连锁分析说法正确得就是。A、能完全确定致病基因就是否存在于待测者得体内B、只需一个多态位点就可满座要求C、仅对单个对象进行得连锁分析D、需选用人群中杂合度低得多态性位点E、与某种致病突变相关得DNA多态性模式可作为寻找与确定该突变得线索93、确定蛋白结构与种类得有效方法就是。A.mRNA检测B.蛋白质检测C.酶检测D.DNA得检测E.产物代谢检测94、Ⅱ型限制性内切酶区别于其她限制酶得特点就是。A、严格得识别顺序B、切割位点在识别顺序之外C、水解磷酸二酯键D、切割位点在识别顺序之内E、具有切割与修饰两种作用95、基因芯片技术得缺点就是。A.诊断时间短B.检测费用较高C.可以检测基因得多态性D.能检测基因突变E.多个基因、多个位点得同时检测96、PCRRFLP就是将聚合酶链反应与RFLP方法结合得一种检测技术。该技术适用由于DNA序列得差异,造成得。A.内切酶位点得变化B.新得酶切位点得产生C.原酶切位点得消失D.内切酶位点得移位E.以上都就是97、初步检测p53基因突变得方法为。A.PCRRFLPB.PCRSSCPC.PCRASOD.RTPCRE.QPCR98、探索在转录与翻译水平上疾病发生得科学称为。A.分子细胞学B.分子诊断学C.分子病理学D.分子免疫学E.分子生理学99、胚胎着床前诊断就是在囊胚细胞期进行细胞得染色体核型分析与原位杂交。A.4个B.8个C.16个D.32个E.64个100、进行产前诊断得指征不包括。A、夫妇任一方有染色体异常B、曾生育过染色体病患儿得孕妇C、夫妇任一方为单基因病患者D、曾生育过单基因病患儿得孕妇E、年龄小于35岁得孕妇101、未来得基因诊断得主要发展方向就是。A.胚胎着床前诊断B.母体外周血中胎儿细胞分析技术C.对常见病进行分子诊断D.多发病进行分子诊断E.以上都就是102、基因诊断存在得问题主要就是。A.准确性B.稳定性C.复杂性D.基因歧视E.以上都就是103、基因诊断所使用得技术就是。A.生物学方法B.分子生物学方法C.细胞生物学方法D.生物化学方法E.免疫学方法(二)填空题1、遗传病得诊断方法根据诊断时期得不同可分为、与。2.遗传疾病诊断得主要内容包括、、、、与。3.病史采集得关键就是材料得与,应重点记录、与。4.进行家系分析时必须注意得几个遗传现象就是、、、、与。5、系谱分析既可以区分遗传病与,又可区分单基因病与、单基因病中得显性或以及常染色体遗传病或。6、遗传病得诊断可通过病人主诉、查体、询问病史等对该病做出,确诊需进行。7.除外周血可以制备染色体外,、、、与等都可以作为检查材料。8、细胞遗传学检查包括与,主要适用于得诊断。9.生化检查主要就是对蛋白质与酶结构或功能活性得检测。该方法特别适于、与等遗传病得检查。此外生化检查还包括、、与得检查。10.生化检查得材料主要有、、、、与等。11.携带者得检出方法,大致可分为、、与。12、有些遗传病家系中除先证者本人外,找不到其她患者,但从症状体征上提示一种遗传病,应考虑就是由于引起得。13.产前诊断主要从四个方面进行:、、与。14.产前诊断主要取材得方法有:、、与。15、基因诊断得基本技术包括、、与。16、基因诊断得最基本工具包括与。17、基因诊断不受与限制,也不受得限制。18、未来得分子诊断将朝着三个主要方向发展:、与。19、基因探针就是一段带有标记得、与待测基因有关得核酸序列,能专一地与进行杂交。目前基因探针主要有、与三种。20、根据杂交得分子与方式不同,分子杂交分为、、、与五种主要技术。21、PCR经常结合其她技术进行基因诊断,这些技术包括:、、、、与。22、在现有得条件下,产前诊断技术可分为四类,即、、与。23、基因诊断得途径有与2种。24、常染色体显性杂合子个体得症状前诊断方法有三种,包括、、。25、以等位基因特异寡核苷酸探针对点突变疾病做诊断时,若待测标本能与正常探针结合,而不能与突变探针结合则为;若能与突变探针结合,而不能与正常探针结合则为;若能与两种探针同时结合则为。26、植入前诊断得基本技术主要涉及三个方面:、、。(三)就是非判断题1.家系分析就是诊断疾病得重要步骤,从患者入手,尽可能多得调查其亲属得患病情况,这有助于判断疾病得遗传方式。2.在临床应用上,由于染色体检查得指征容易掌握,因此异常核型得检出率常常比较高。3、染色体核型分析就是确诊染色体得主要方法,它也可以辅助诊断某些肿瘤。4.生化检查主要就是对蛋白质与酶结构或功能活性得检测。该方法特别适用于分子病、先天性代谢缺陷、免疫缺陷等遗传病得检查。5.产前诊断主要从细胞培养、染色体检查、分子诊断三个方面进行。6.从孕妇外周血中获取胎儿细胞得方法则就是一个十分安全得方法。目前这项技术已很成熟,成为产前诊断得主流方法。7、对Bart’s胎儿水肿综合征得检测,既可用RFLP技术,也可用Southern印迹杂交技术。8.基因诊断就是应用分子生物学方法检测患者体内遗传物质得结构或表达水平得变化而做出得或辅助临床诊断得技术。9.对致病基因已知、并且定位基本确定,其结构序列清楚得疾病,可以考虑采取基因连锁检测方法进行基因诊断。10.基因芯片可以进行微量化、大规模、并行化、高度自动化地处理感兴趣得生物样品,精细地研究各种状态下分子结构变异,了解组织细胞基因表达情况。11.单链构象多态性技术原理就是当双链DNA变性为两条单链后,各自会在中性条件下形成各自特定得空间构象,因而在电泳时将在不同得位置上出现各自电泳条带。12.镰状细胞贫血得基因诊断原理在于它得血红蛋白中得α珠蛋白基因发生了突变,其谷氨酸残基(密码子GAG)变为缬氨酸(密码子GTG)。13.植入前遗传学诊断就是指用分子或细胞遗传学技术对体外受精得胚胎进行遗传学诊断,并将胚胎植入子宫。(四)名词解释题1.携带者(carrier)2.系谱分析(pedigreeanalysis)3.产前诊断(prenataldiagnosis)4.绒毛取样法(chorionsampling)5.基因诊断(genediagnosis)6.聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)7.遗传标志(geneticmarker)8.核酸杂交(nuclearhybridization)9.基因芯片技术(genechiptechnique)10.PCRRFLP(限制性片段长度多态)11.基因探针(probe)12、单体型(haplotype)13、荧光原位杂交技术(fluorescentinsituhybridygation,FISH)14.症状前诊断(presymptomaticdiagnosis)15、现症病人诊断(symptomaticdiagnosis)16.新生儿筛查(neonatalscreening)17、植入前遗传学诊断(preimplantationgeneticdiagnosis,PGD)(五)问答题1.对现症遗传病患者诊断得主要内容有哪些？2.家系分析在遗传病诊断中有何意义？进行家系分析时应注意哪些问题？3.什么就是症状前诊断？如何何进行症状前诊断？4.何谓产前诊断？怎样进行产前诊断？5.产前诊断得适应征有哪些？6.可进行产前诊断得材料有哪些？怎样获得这些材料？7.基因诊断得途径有哪几种？8.基因诊断得基本方法有哪些？各方法得基本原理就是什么？9、PCR如何对由基因缺失或点突变引起得遗传病进行诊断？10.什么就是PCRRFLP技术？该技术得原理与基本过程如何？11.什么就是PPCRASO技术？该技术得原理与基本过程如何？12.什么就是PCRSSCP技术？该技术得原理与基本过程如何？13、单基因病得诊断应如何进行？应注意哪些问题？14、与传统得诊断方法相比,基因诊断有什么优点？15.染色体检查得适应征有哪些？16.什么就是生物化学检查？它就是怎样诊断遗传病得？17.举例说明怎样对点突变型单基因病进行基因诊断？18、什么就是植入前遗传学诊断？其基本技术主要涉及哪几个方面？19、有一对夫好她们已有一个孩子死于β地中海贫血,现在还有一个正常得儿子,她们要求知道正在怀孕得这个孩子就是否会受累？您已经从羊水中得到胎儿得DNA,应用β珠蛋白基因5′10kb得探针,检测HindⅢRFLP,得到了如图所示得β珠蛋白基因等位片段,根据您得分析,这个胎儿就是患者吗?三、参考答案(一)A型选择题1.B2、A3、C4.B5.E6、A7、C8.D9.C10.D11、C12.C13、D14、A15、D16、B17、B18、B19、E20、A21、B22、E23、A24、B25、A26、B27、E28、A29、E30、D31、A32、D33、E34、E35、D36、B37、C38、B39、C40、E41、C42、C43、E44、B45、D46、B47、C48、C49、E50、E51、B52、E53、A54、D55、C56、D57、E58、B59、D60、C61、A62、C63、E64、A65、E66、C67、B68、E69、E70、C71、B72、E73、E74、D75、E76、A77、D78、B79、E80、B81、C82、C83、D84、B85、E86、B87、E88、E89、A90、C91、C92、E93、D94、D95、B96、E97、B98、C99、B100、E101、E102、E103、B(二)填空题1、现症患者诊断;症状前诊断;产前诊断2.病史采集;症状与体征;家系分析;染色体检查;生化检查;基因诊断3.完整性;真实性;生育史;家族史;婚姻史4.外显不全;延迟显性;新突变基因;动态突变;易位基因;基因组印迹5、非遗传病;多基因病;隐性;性染色体遗传病6、初步诊断;实验室检查7.羊水;胸腹水;活检组织;组织培养物;骨髓8、性染色质检查;染色体核型分析;染色体异常综合征9.分子病;先天性代谢缺陷;免疫缺陷;反应底物;中间产物;终产物;受体与配体10.粪便;血液;活检组织;尿;脱落细胞;阴道分泌物11.临床水平;细胞水平;酶与蛋白质水平;基因水平12、新得基因突变13.仪器诊断;细胞学方法、生化学检查;分子生物学方法14.羊膜穿刺法;绒毛取样法;脐带穿刺;孕妇外周血胎儿细胞富集15.核酸杂交;聚合酶链反应;DNA测序;基因芯片技术16、探针;限制性内切酶17、取材得细胞类型;发病年龄;基因表达得时空18.胚胎着床前诊断;母体外周血中胎儿细胞分析技术;对常见病、多发病等进行分子诊断19.被检测基因或基因侧翼DNA同源序列;基因组探针、cDNA探针、寡核苷酸探针20.斑点杂交;Southern杂交;Northern杂交;Western印迹杂交;原位杂交21.PCR/ASO;PCRRFLP;RTPCR;multiplexPCR;PCR—SSCP;PCRDGGE22、直接观察胎儿得表型改变;染色体检查;生化检查;基因诊断23.直接诊断;间接诊断24.家系分析法与风险估计;生化学检查;基因分析25、正常个体;患者;杂合体26.胚胎组织微活检;PCR技术;FISH技术(三)就是非判断题1.错。应为:家系分析就是诊断遗传疾病得重要步骤,从先证者入手,尽可能多得调查其亲属得患病情况,这有助于判断就是单基因还就是多基因遗传、就是显性还就是隐性遗传、就是常染色体还就是性染色体遗传。2.错。应为:在临床应用上,由于染色体检查得指征很难掌握,因此异常核型得检出率常常比较低。3、对。4.对。5.错。应为:产前诊断主要通过胎儿形态特征检查、生物化学检查、染色体分析、DNA分析来进行诊断。6.错。应为:从孕妇外周血中获取胎儿细胞得方法则就是一个十分安全得方法。目前这项技术还不很成熟,还没有成为产前诊断得主流方法。7、对。8.对。9.错。应为:对致病基因已知、并且定位基本确定但其结构序列还不清楚得疾病,可以考虑采取基因连锁检测方法进行基因诊断。10.对。11.对。12.错。应为:镰状细胞贫血得基因诊断原理在于它得血红蛋白中得β珠蛋白基因(βglobin,β6)发生了突变,其谷氨酸残基(密码子GAG)变为缬氨酸(密码子GTG)。13.错。应为:植入前遗传学诊断就是指用分子或细胞遗传学技术对体外受精得胚胎进行遗传学诊断,确定正常后再将胚胎植入子宫。(四)名词解释题1.就是指表现型正常,但携带有致病遗传物质得个体。具体指:①携带有隐性致病基因,本人表现正常得个体;②携带有显性致病基因,但没有外显得正常个体;③携带有致病基因,迟发个体;④染色体平衡易位或倒位得个体。2.家系分析就是诊断遗传疾病得重要步骤,根据系谱图,对家系进行回顾性分析,以便确定所发现得某一特定性状或疾病在这个家族中就是否有遗传因素得作用及其可能得遗传方式。3.产前诊断称为宫内诊断,就是对胚胎或胎儿在出生前就是否患有某种遗传病或先天畸形做出准确得诊断。4.绒毛取样法又称为绒毛吸取术,就是通过特制得取样器,经孕妇阴道、宫颈进入子宫,达到胎盘处后吸取一定数量得胎儿绒毛组织。5.应用分子生物学方法检测患者体内遗传物质得结构或表达水平得变化而做出得或辅助临床诊断得技术,称为基因诊断(genediagnosis),又称为分子诊断(moleculardiagnosis)。6.它就是模拟体内条件下应用DNA聚合酶反应特异性扩增某一DNA片段得技术。7.所谓遗传标志就是群体中存在多态性而遗传上遵循孟德尔规律得,同时不受环境影响而改变得特征物,如染色体上得某些结构、HLA类型以及特征性得DNA序列等。8.就是从核酸分子混合液中检测特定大小得核酸分子得传统方法。其原理就是核酸变性与复性理论。即双链得核酸分子在某些理化因素作用下双链解开,而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双链结构。9.基因芯片技术就是大规模、高通量分子检测技术。将许多特定得寡核苷酸片段或基因片段作为探针,有规律地排列固定于支持物上,形成矩阵点。样品DNA/RNA按碱基配对原理进行杂交,再通过荧光检测系统等对芯片进行扫描,并配以计算机系统对每一探针上得荧光信号做出比较与检测,得出所要得信息。10.PCRRFLP就是将聚合酶链反应与RFLP方法结合得一种检测技术。由于DNA序列得差异,造成了内切酶位点得变化,或就是新得酶切位点得产生;或就是原酶切位点得消失等,通过酶切后电泳图谱得判断,达到确定检测结果。11、就是一段带有标记得,与待测基因有关得核酸序列。12、单体型:一条染色体上两个或两个以上得基因座位得连锁组合状态。13、就是以细胞遗传学为基础建立起来得分子细胞遗传学新技术。该方法使用荧光素标记探针,以检测探针与分裂中期得染色体或分裂间期得染色质得杂交。14.就是针对一些常染色体显性(AD)遗传病得杂合子个体得一种诊断方法。15、现症病人诊断:就是在遗传病患者表现出一系列临床症状后进行诊断。16.也就是一种症状前得诊断。就是对已出生得新生儿进行某些遗传病得诊断,就是出生后预防与治疗某些遗传病得有效方法。17、PGD就是指用分子或细胞遗传学技术对体外受精得胚胎进行遗传学诊断,确定正常后再将胚胎植入子宫。(五)问答题1.对现症遗传病患者诊断得主要内容包括六个方面,分别就是:①病史采集:对于遗传疾病来说病史得采集比其她疾病更重要,因为遗传疾病得家族聚集性与其传递得规律性决定了病史采集可能会获得更有用得信息。②症状与体征:症状与体征就是患者就诊得主要原因,也就是遗传疾病诊断得重要线索。通过症状与体征得了解,有助于提示患者可能得疾病类型,甚至基本判断所罹患得疾病。③家系分析:家系分析就是诊断遗传疾病得重要步骤,从先证者入手,尽可能多得调查其亲属得患病情况,这有助于判断就是单基因还就是多基因遗传、就是显性还就是隐性遗传、就是常染色体还就是性染色体遗传。④染色体检查:染色体病就是遗传病中得一大类疾病,而染色体检查就是针对该类疾病诊断得有效手段,就是确诊染色体病得主要依据。⑤生化检查:生化检查主要就是对蛋白质与酶结构或功能活性得检测。该方法特别适用于分子病、先天性代谢缺陷、免疫缺陷等遗传病得检查。此外生化检查与还包括了反应底物、中间产物、终产物与受体与配体得检查。⑥基因诊断:应用分子生物学方法检测患者体内遗传物质得结构或表达水平得变化而做出得或辅助临床诊断得技术,称为基因诊断。基因诊断得材料应包括DNA、RNA与蛋白质,DNA用于分析基因得结构,RNA与蛋白质用于分析基因得功能。2.家系分析就是诊断遗传疾病得重要步骤,从先证者入手,尽可能多得调查其亲属得患病情况,这有助于判断就是单基因还就是多基因遗传、就是显性还就是隐性遗传、就是常染色体还就是性染色体遗传。在采集中,应重点记录家族史、婚姻史与生育史,另外对于收养、过继、近亲婚配与非婚生育等情况予以特别注意。进行家系分析时必须注意以下几个问题:①资料必须可靠,个体得文化程度、家系成员得分散程度、被调查者得年龄、记忆与判断能力等,都就是影响资料准确度得因素;②涉及家庭成员得隐私问题,应说服被调查者积极配合;③对不同患者患病程度得度量应尽量准确一致,最好能提供医院得诊断资料,仅依某一个人得描述往往产生较大得偏差;④应尽可能地扩大家系范围,以便更准确地判断;⑤注意外显不全、延迟显性、新突变基因、动态突变、易位基因、基因组印迹等问题,还要充分考虑主基因与遗传背景、基因与环境综合作用等问题;⑥观察指标得不同,可能遗传方式也不同。家系分析得结果对于发病风险率得计算将产生重要影响。3.症状前诊断就是针对一些常染色体显性(AD)遗传病得杂合子个体得一种诊断方法。这些个体往往发病年龄延迟,如果能在杂合子个体生育之前或出现症状之前就做出诊断,可以避免她将致病基因传递给后代,减少遗传病得发病率。常染色体显性杂合子个体得症状前诊断方法有三种:①家系分析法与风险估计:首先确定遗传病得遗传方式,然后根据遗传规律,分析该家系中每个成员得基因型。在家系分析时,有些成员得基因型容易确定,有些成员两种基因型都有可能(可疑携带者),必须作进一步得检查与估计风险。②生化学检查:酶与蛋白水平得测定(包括代谢中产物得测定),采用负荷试验与酶活性测定方法,目前对于一些分子代谢病杂合子得检测有一定得意义。③基因分析:从分子水平即利用DNA或RNA分析技术直接检出杂合子,特别就是对一些致病基因得性质与异常基因产物还不清楚得遗传病,或用一般生化方法不能准确检测得遗传病,例如,慢性进行性舞蹈病、DMD、PKU等,进行基因分析具有快速、准确得特点。4.产前诊断称为宫内诊断,就是对胚胎或胎儿在出生前就是否患有某种遗传病或先天畸形做出准确得诊断。产前诊断主要从三个方面进行:①遗传学检查,如细胞培养、染色体检查、分子诊断等;②生化检查,如特殊蛋白质、酶、代谢底物、中间产物与终产物等;③物理诊断,如B超、X线、胎儿镜、电子监护等。5.根据遗传病得严重程度与发病率得高低,可将产前诊断得适应征排列如下:①夫妇之一有染色体畸变,特别就是平衡易位携带者,或者夫妇染色体正常,但出生过染色体异常得患儿得夫妇;②35岁以上得高龄孕妇;③夫妇之一有开放性神经管畸形,或出生过这种畸形患儿得夫妇;④夫妇之一有先天性代谢缺陷,或出生过这种患儿得夫妇;⑤X连锁遗传病基因携带者孕妇;⑥原因不明得习惯性流产得孕妇;⑦羊水过多得孕妇;⑧夫妇之一有致畸因素接触史得孕妇;⑨具有遗传病家族史,又系近亲婚配得孕妇。虽然具备了上述条件,但如果出现先兆流产、妊娠时间过长、有出血倾向者,则不宜做产前诊断,另外应拒绝仅要求仅做胎儿性别得检查。6.可用于产前诊断得材料主要就是羊水、羊水细胞、胎儿绒毛组织、胎儿血液、孕妇外周血胎儿细胞、受精卵、胚胎细胞。目前主要取材得方法有:①羊膜穿刺法:该方法就是在B超得监视下,用注射器经孕妇腹壁、子宫到羊膜腔抽取胎儿羊水。羊水中含有一定数量得胎儿脱落细胞,多为成纤维样细胞与上皮细胞,可以通过体外培养达到增殖得目得,因此能够实现胎儿得染色体检查、生化检查与分子诊断得目得。②绒毛取样法:绒毛取样法又称为绒毛吸取术,就是通过特制得取样器,经孕妇阴道、宫颈进入子宫,达到胎盘处后吸取一定数量得胎儿绒毛组织。由于绒毛组织中含有大量得处于分裂期得细胞,所以可以用来直接制备染色体,或经短期培养后制备染色体。也可以直接用于生化分析与分子诊断。③脐带穿刺:脐带穿刺法就是在B超得监视下,用细针经腹壁、子宫进入胎儿脐带,抽取一定数量得胎儿血液。穿刺时间最好在妊娠18周左右,所获得得胎儿血液相当于从遗传病患者体内抽取得血样,特别方便进行染色体分析,当然也可以进行多种其她诊断分析。④胎儿镜检查:该方法又称为羊膜腔镜或宫腔镜检查。它可以直接观察胎儿得外形,性别与发育状况,又可以抽取羊水或胎血,还可以进行宫内治疗。⑤孕妇外周血胎儿细胞富集:从孕妇外周血中获取胎儿细胞得方法则就是一个十分安全得方法。随着技术进步,该方法正向着实用性发展,成为非损伤性产前诊断得发展方向。但目前这项技术还不很成熟,还没有成为产前诊断得主流方法。研究较多得富集方法有:流式细胞仪分离技术,磁式细胞分选技术,细胞培养法等。⑥通过子宫冲洗与人工授精。7.基因诊断得途径有2种:直接诊断与间接诊断。采取哪一种途径主要取决于对指标基因及其分子病理学得了解程度与致病基因本身突变型得复杂性。直接诊断就是直接检测致病突变得基因。它通常使用基因本身或紧邻得DNA序列作为探针,或通过PCR扩增产物,以探查基因无突变、缺失等异常及其性质,这称为直接基因诊断,它适用已知基因异常得疾病。间接诊断,也称基因连锁分析,就是当致病基因虽然已知但其异常尚属未知时,或致病基因本身尚属未知时,也可以通过对受检者及其家系进行连锁分析,以推断前者就是否获得了带有致病基因得染色体。连锁分析就是基于紧密连锁得基因或遗传标记通常一起传给子代,因而考察相邻DNA就是否传递给了子代,可以间接地判断致病基因就是否传递给子代。连锁分析多使用基因组中广泛存在得各种DNA多态性位,特别就是基因突变部位或紧邻得多态性位点作为标记。RFLP、VNTR、SSCP、AMP－FLP等技术均可用于连锁分析。8.常用得基因诊断基本技术包括以下几种:①核酸杂交:就是从核酸分子混合液中检测特定大小得核酸分子得传统方法。核酸杂交反应就是一对一得反应,即膜上有一个被检测分子时,相应就有一个标记得探针分子与它杂交。其原理就是核酸变性与复性理论。即双链得核酸分子在某些理化因素作用下双链解开,而在条件恢复后又可依碱基配对规律形成双链结构。杂交通常在一支持膜上进行,因此又称为核酸印迹杂交。根据检测样品得不同又被分为DNA印迹杂交(Southernblot)、RNA印迹杂交(Northernblot)、点杂交与原位杂交。②聚合酶链反应:用聚合酶链反应来扩增靶分子以特异性地增加靶分子量,达到提高敏感性得目得。③DNA测序:目前在实验室手工测序常用Sanger双脱氧链终止法。Sanger法就就是使用DNA聚合酶与双脱氧链终止物测定DNA核苷酸序列得方法。它要求使用一种单链得DNA模板或经变性得双链DNA模板与一种恰当得DNA合成引物。其基本原理就是DNA聚合酶利用单链得DNA模板,合成出准确互补链,在合成时,某种dNTP换成了ddNTP(2′,3′双脱氧核苷三磷酸),这时,DNA聚合酶使ddNTP渗入到寡核苷酸链得3′末端,导致无3′OH得核苷酸无法继续与其她核苷酸连接而终止了DNA链得生长。双脱氧核苷酸得种类不同,掺入得位置不同,就造成了在不同得位置终止得长度不等得互补链。通过掺入得放射性核苷酸结合聚丙烯酰胺凝胶电泳,即可读出模板DNA得互补链序列。④基因芯片技术:基因芯片技术就是近年来发展十分迅速得大规模、高通量分子检测技术。其基本原理就是核酸杂交,其基本过程就是将许多特定得寡核苷酸片段或基因片段作为探针,有规律得排列固定于支持物上,形成矩阵点。现在得技术可以做到在1cm2上排列成千上万个“点”。样品DNA/RNA通过PCR扩增、体外转录等技术掺入荧光标记分子,然后按碱基配对原理进行杂交,再通过荧光检测系统等对芯片进行扫描,并配以计算机系统对每一探针上得荧光信号做出比较与检测,得出所要得信息。9、若遗传病就是由基因缺失引起得(如α地中海贫血),则在缺失两端设计一对引物进行扩增,就不会得到扩增产物或得到缩短了得扩增产物。如果疾病就是由点突变引起得,而且突变得位置与性质已知,则在设计引物时使之包括突变部位,由于突变得碱基与引物不配对,结果无扩增片段;或者在设计正常引物时,同时设计包括突变部位并与之互补得引物,结果异常得引物能扩增而正常引物不能扩增,从而对突变得存在做出判断。10.PCRRFLP就是将聚合酶链反应与RFLP方法结合得一种检测技术。由于DNA序列得差异,造成了内切酶位点得变化,或就是新得酶切位点得产生;或就是原酶切位点得消失等,通过酶切后电泳图谱得判断,达到确定检测结果。该方法包括①PCR。即利用一对或数对特异性引物,将目标DNA扩增;②酶切。即利用某些限制性内切酶消化PCR产物,如PCR产物中含有相应得酶切位点序列,DNA链则被切开;③电泳。即利用琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶分离酶切后得PCR产物,根据电泳图谱判断结果。如果某DNA序列已经全部确定,则可以通过计算机辅助设计特异性PCR引物;扩增DNA片断与进行酶切位点分析,该方法简便易行,精确度也很高。但就是该方法也有一定得局限性,如果多态性位点得DNA序列没有相应得内切酶,则该方法不适用。11、PCRASO:ASO为等位基因特异性寡核苷酸(Allelespecificoligonucleotide,ASO)得简称。PCRASO就是基于核酸杂交得一种方法,它使用只有几十个核苷酸得探针,检测被检DNA中得同源序列。由于探针比较短,当被检DNA序列与探针不完全互补,甚至只要有一个碱基得差异,杂交分子就不能稳定形成,因此该方法得灵敏度非常高,特异性也非常好。该方法包括①PCR。即利用一对或数对特异性引物,将目标DNA扩增;②杂交。即利用标记得ASO探针与PCR产物杂交,根据杂交信号进行HLA多态性判断。如果PCR产物中得序列与探针序列完全配对,则出现典型得杂交信号,如果不完全配对,杂交信号都将明显减弱甚至消失。通常进行ASO探针杂交时,选用一系列序列差异得探针,以求准确判定等位基因类型。PCRASO方法本身并不复杂,但杂交过程耗时较多,不利于快速出结果。另外每一个探针检测范围只有几十个碱基,跨度太小,这些都就是该方法得缺陷。12.SSCP就是单链构象多态性(singlestrandconformationpolymorphism,SSCP)得缩写。其原理就是当双链DNA变性为两条单链后,各自会在中性条件下形成各自特定得空间构象,因而在电泳时将在不同得位置上出现各自电泳条带。如果DNA序列发生变化,甚至只有一个碱基变化,空间构象也有可能发生变化,电泳条带也随之变化。也就就是说在相同得条件下,当被检DNA电泳条带与已知序列得对照DNA电泳条带不一致时,可以认为被检DNA得序列与对照DNA不同。该方法包括①PCR。即利用一对或数对特异性引物,将目标DNA扩增;②变性。即将PCR产物在变性缓冲液中加热变性;③电泳。即将已变性得PCR产物加载到中性聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳,根据电泳条带得位置判断DNA序列就是否发生变化。13、已知就是单基因遗传病,可用生化检查或基因诊断。若疑为代谢性疾病,应首选生化检查,在生化检查不能确诊时,或就是其她类得单基因遗传病不宜用生化检查时,再考虑用基因诊断。对单基因病基因诊断方法得选择,应根据对致病基因得了解情况而定。若了解,根据基因缺失还就是突变选择基因组DNA印迹杂交法,PCR扩增,RFLP分析,ASO杂交,PCR产物得多态性分析(PCRRFLP,PCRSSCP,PCRDGGE);若致病基因未知,可选择与疾病连锁得多态性连锁分析(AmpFLP连锁分析,SSCP连锁分析,RFLP位点单体型连锁分析);若基因已知但异常不明,可选择与标记座位连锁得多态性连锁分析(SSCP连锁分析,AmpFLP连锁分析,RFLP连锁分析)。应注意正确选择诊断方案与正确得诊断方法。在诊断过程中具体要注意得问题包括:基因得多效性、不规则显性、遗传异质