家兔动脉血压的神经体液调节

华南师范大学实验报告学生姓名学号专业生物科学年级、班级11科二课程名称动物生理学实验实验工程家兔动脉血压的神经调节和体液调节实验类型验证设计综合实验时间2023年5月13日实验指导老师胡老师严老师实验评分家兔动脉血压的神经体液调节气温：25℃左右合1实验目的1.1学习直接测定家兔动脉血压的急性实验方法。1.2观察神经、体液因素对心血管活动的影响。2实验原理在正常生理情况下，人和高等动物的动脉血压是相对稳定的。这种相对稳定性是通过神经和体液因素的调节而实现的，其中以颈动脉窦—主动脉弓压力感受性反射尤为重要。此反射既可使升高的血压下降，又可使降低的血压升高，故有血压缓冲反射之称。家兔的主动脉神经在解剖上独成一支，易于别离与观察其作用。本实验是应用液导系统直接测定动脉血压。即由动脉插管与压力传感器连通，其内充满抗凝液体，构成液导系统，将动脉插管插入动脉内，动脉内的压力及其变化，可通过封闭的液导系统传递到压力传感器，并由计算机采集系统记录下来。3动物和器材3.1动物：家兔3.2器材：兔手术台、常用手术器械、止血钳(4～6把)、眼科剪、支架、双凹夹、气管插管、动脉插管、三通管、动脉夹、计算机采集系统、压力传感器、保护电极、照明灯、纱布、棉球、丝线、注射器(1m1、5ml、20m1)、生理盐水、4％柠檬酸钠、20％-25％氨基甲酸乙酯、肝素(200U／m1)、肾上腺素(1：5000)、乙酰胆碱(1：10000)。4方法与步骤4.1动物的制备4.1.1麻醉：2%戊巴比妥钠；2ml/kg体重；耳缘静脉注射。4.1.2固定〔仰式〕、剪毛、剪颈部皮肤约7cm，钝性别离颈部肌肉等组织4.1.3气管插管：暴露气管、穿线、手术刀手术剪T形切口，事先准备好的棉签将气管中的血块弄出，插好气管插管并结扎。4.1.4别离右侧主动脉神经:用食指中指和拇指将右侧颈部肌肉等组织翻起，看到有弹性的颈总动脉，在其旁边可看到白色的粗的迷走神经，然后在旁边用后玻璃分针〔完好无破损〕找出最细的减压神经，穿2条线备用。4.1.5别离迷走神经，穿2条线备用。4.1.6别离同侧的右颈总动脉，穿1条线备用4.1.7别离另一侧左颈总动脉〔3厘米长〕，穿2线备用4.1.8注射肝素〔200U/kg体重〕4.1.9动脉插管法：动脉夹夹住左侧颈总动脉靠心端→结扎左侧颈总动脉靠头端，检查分支→在结扎线下方2mm剪向心1/2切口→用眼科镊插进动脉切口，确定在动脉内，然后挑起动脉上壁，将动脉插管由眼科镊下方开口处插入动脉内，用备用线扎死动脉和套管并挂住套管上，用另一动脉夹固定结扎部位。4.2观察与记录曲线变化4.2.1观察正常血压曲线调节扫描速度与增益，可以明显地观察到心室射血与主动脉回缩形成的压力变化与收缩压、舒张压的读数。有时可以观察到血压曲线随呼吸变化，心搏为一级波，呼吸波为二级波。然后将扫描速度调慢，观察正常血压曲线。4.2.2轻轻提起对侧完好颈总动脉上的备用线，用动脉夹夹闭30s(于夹闭前记录动脉通畅时的血压曲线)，观察并记录血压变化。出现变化后即取下动脉夹，记录血压的恢复过程。4.2.3记录对照血压曲线后，用手指按压颈动脉窦(下颌下方内侧)，观察并记录血压变化。当血压明显下降时，那么停止按压，待血压恢复(如果血压反而升高，说明按压的是血管，需重新寻找按压位置)。4.2.4刺激主动脉神经使刺激输出端连接保护电极，轻轻提起主动脉神经上的备用线，小心地将神经置于保护电极之上。记录对照血压曲线后，再用中等强度的连续电脉冲信号，通过保护电极，刺激神经10-20s。血压出现明显下降后即可停止刺激，并待血压恢复。如果血压并不下降，可调整刺激强度或刺激频率再行刺激。任何刺激都无效时，那么表示此神经并非主动脉神经。需要重新识别神经后再行实验。4.2.5分别刺激主动脉神经中枢端和外周端双结扎主动脉神经后(务必扎紧)，从两扎线结之间剪断神经。记录对照血压后，同法分别刺激神经的中枢端和外周端，观察并记录血压变化。4.2.6刺激迷走神经记录对照血压后，用同样的方法刺激迷走神经，观察血压下降曲线与有何不同(如果血压下降很快、很低，应立即停止刺激)。4.2.7结扎并剪断迷走神经同时结扎双侧迷走神经后剪断，观察血压有何变化。4.2.8刺激迷走神经外周端分别刺激两侧迷走神经外周端，观察并记录血压变化有何不同。4.2.9肾上腺素对血压的影响记录对照血压曲线后，用1m1注射器，从耳缘静脉注入0．1～0．3m1肾上腺素溶液，观察并记录血压变化及恢复曲线。5实验结果与分析5.1家兔正常血压曲线SEQFigure\*ARABIC1家兔正常血压曲线图图1所示为家兔正常血压曲线，血压曲线随呼吸变化，图中心搏为一级波，呼吸波为二级波。一级波即心博波是由心室舒缩所引起的血压波动，频率与心率一致。而二级波即呼吸波是由呼吸运动所引起的血压波动。由实验测得的家兔血压变化曲线图1可知，在正常情况下，家兔的血压维持在一个相对稳定的水平，没有太大的起伏。5.2关闭一侧颈总动脉SEQFigure\*ARABIC2关闭一侧颈总动脉血压变化曲线图颈动脉窦压力感受器的传入神经纤维组成颈动脉窦神经。窦神经参加舌咽神经，进入延髓，和孤束核的神经元发生突触联系。夹闭颈动脉后，远心端的颈动脉窦张力感受器感受到血压下降，传出神经冲动的频率减慢。信息沿窦神经上传至延髓孤束核心血管中枢。使心迷走紧张减弱，心交感和心缩血管紧张加强，作用于心脏，使心率加快，心输出量增加，血管收缩，血管外周阻力增加。从而血压恢复性升高。假设血压下降过大，交感缩血管紧张还会扩展到静脉系统，是静脉收缩，促进血液回心，使血液每博输出量增加。5.3按压颈动脉窦SEQFigure\*ARABIC3按压颈动脉窦血压变化曲线图按压颈动脉窦后，血压迅速下降且下降幅度大，但是一段时间后，血压恢复稳定且不再出现降压现象，按压颈动脉窦比夹闭一侧颈动脉更加直接。且管壁机械牵张更加扩张，从而使血管壁外膜上作为压力感受器的感觉神经末梢兴奋，引起降压反射，使一开始血压下降更加明显且持久。5.4刺激主动脉神经SEQFigure\*ARABIC4刺激主动脉神经血压变化曲线图刺激减压神经，家兔血压明显降低，过后又恢复为稳定状态。减压神经具有稳定动脉血压的作用。当动脉血压升高或降低时，压力感受器的传入冲动也随之增多或减少，使减压反射相应地增加或减弱，以保持动脉血压相对稳定。SEQFigure\*ARABIC5刺激主动脉神经中枢段血压变化曲线图SEQFigure\*ARABIC6刺激主动脉神经周端血压变化曲线图如图4、5、6所示，刺激减压神经、减压神经中枢端血压降低，刺激减压神经外周端血压变化不大。兔减压神经是传入神经，其作用是将主动脉弓感受器发出的冲动传入延髓心血管中枢，反射性引起血压降低。因此，刺激完整的减压神经或其中枢端，使传入中枢的冲动增加，致血压明显下降，而刺激其外周端虽又冲动传向外周，但不会引起血压变化。5.6刺激迷走神经血压变化曲线图SEQFigure\*ARABIC7刺激迷走神经血压变化曲线图SEQFigure\*ARABIC8刺激迷走神经外周端血压变化曲线图SEQFigure\*ARABIC9刺激迷走神经中枢端血压变化曲线图迷走神经为复合神经。如图7、8、9所示，刺激迷走神经、迷走神经外周端，迷走神经中枢端都会引起血压下降。迷走神经是混合神经，有其中内脏运动神经纤维有分支分布于心肌，而内脏感觉神经纤维终止于延髓的孤束核，而后者又有纤维与延髓内腹侧的“减压区〞联系。当迷走神经的内脏运动神经纤维兴奋时，将导致心脏活动的抑制，具体表现为心肌兴奋性降低，心率减慢，心肌收缩力减弱，血压下降。刺激迷走神经外周端时，动脉血压迅速下降，心率明显减慢，而当刺激停止时，上述抑制效应停止，血压也迅速恢复。当迷走神经内脏感觉神经纤维兴奋时，经孤束核使延髓的“减压区〞兴奋，经“交互抑制〞使延髓的“加压区〞活动受到抑制，再由传出途径抑制心脏和外周血管的活动，故血压下降。当刺激迷走神经中枢端时，动脉血压也应下降，但停止刺激后，由于延髓“减压区〞和“加压区〞的“交互抑制〞现象的存在，所以动脉血压的恢复较缓慢。实验中刺激迷走神经后血压的变化正是由于迷走神经内脏运动、感觉神经纤维共同兴奋的结果，即刺激完整神经所得的波形应是剪断神经后刺激中枢端和外周端两波形的总和。5.7肾上腺素对血压的影响SEQFigure\*ARABIC10血压受肾上腺素〔0.2ml〕影响的变化曲线图如下图，经肾上腺素作用后，与正常血压相比，血压会有所增高。肾上腺素可与α和β两类肾上腺素能受体结合。在心脏，肾上腺素与β肾上腺素能受体结合，产生正性变时和变力作用，使心输出量增加。在血管，肾上腺素的作用取决于血管平滑肌上α和β肾上腺素能受体分布的情况。由于静脉注射，以及血管上α受体数量上占优势，注射肾上腺素后可以使全身血管广泛收缩，从而使动脉血压升高。6讨论6.1从以上实验分析中可以发现，无论是血管壁的被动收缩还是刺激不同的神经，其本质都是通过心交感神经与心迷走神经对心血管系统产生影响。即直接支配心血管活动的神经为交感神经和迷走神经。各种心血管神经都会经传入神经，将冲动传至心血管中枢——延髓，通过“接替站〞——孤束核，将冲动转至交感神经或迷走神经，从而到达控制心血管活动的目的。由于这两种神经节后神经末梢分别释放肾上腺素〔去甲肾上腺素〕和乙酰胆碱作为递质，因此肾上腺素〔去甲肾上腺素〕和乙酰胆碱所产生的效应与刺激两种神经是相对应的。6.2刺激神经与注射药物分别涉及了神经调节与体液调节。从二者作用的时长可以看出，刺激神经时，发生反响的速度快，恢复也快，而静脉注射药物那么发生反响和恢复的时间均较长。这表达了神经调节和体液调节的特点。神经调节是快速的暂时性调节，而体液调节那么是较长期的调节。6.3手术质量对本实验成功很重要，实验前应熟悉实验各操作步骤，以免实验时不知所措。6.4动脉血管插管以及实验结束拆下插管都要注意防止操作失误引起动脉血液喷漏。实验过程中不要忘记必要的结扎，不用误用止血钳代替动脉夹，注意防止动脉夹边缘过于锋利而夹破动脉，动脉插管要固定牢固以免脱落。6.5麻醉和注射肝素、其他实验药品都要用到耳缘静脉注射，所以要注意保持兔耳朵的状态，尽量争取入针成功率。麻醉时要注意麻醉剂用量，观察兔子的变化，不要麻醉过渡导致兔子死亡。全身麻醉对家兔的呼吸系统是有抑制作用的，因此为保证实验的进行，采取气管插管进行辅助呼吸。6.6注意保持别离出的神经活性，不要暴露在空气中枯燥太久或浸于血液中；