大鼠脑干缺血再灌注模型制备-脑干缺血再灌注损伤病理和脑干血流变化

大鼠脑干缺血再灌注模型制备—脑干缺血再灌注损伤病理和脑干血流变化目的：脑干缺血再灌注模型的建立对于脑干缺血损伤及再灌注损伤的病理，病生理及药理学研究具有重要意义。目前国内外文献对此模型的研究鲜有报道，以往对于脑干缺血的研究只停留在脑干持续缺血后一系列病生理，电生理及生化等方面，并且多集中于犬、猴等大型动物。因此我们尝试应用大鼠制作脑干缺血再灌注模型，对再灌注后早期的病理，病生理进行了观察，并且观察了夹闭前后和再灌注前后脑干血流的变化。方法：雄性wistar大鼠，分为再灌注组，夹闭组和假手术组。于大鼠基底动脉(BA)第一无分支区和第二无分支区分别应用微型动脉夹夹闭若干时间后再行开放来制作缺血再灌注模型；缺血组只夹闭BA不予开放；而假手术组只暴露BA。观察大鼠BA夹闭再通后的神经症状。应用TTC(2，3，5-氯化三苯基四氮唑)染色确定缺血范围及程度。分别在BA夹闭后0.5h，1h，2h，3h，6h及再灌注1h后取脑干组织进行光镜观察。应用激光多普勒技术测量基底动脉夹闭前后以及再通后的血流值。应用统计软件SPSS(10.0版)对相关数据进行统计学处理及分析。结果：两点夹闭基底动脉后大鼠出现不同程度的呼吸不规则、抽搐、呃逆、瞳孔扩大或缩小、对光反应减弱、肢体瘫痪及昏睡等症状，随着血管的再通，这些症状并没有减轻。TTC染色显示于第一、第二无分支区夹闭基底动脉后，缺血范围主要集中在脑桥和延髓上部。基底动脉闭塞后，脑干组织血流量较闭塞前明显减少，再通后血流量与闭塞前基线值并不一致，夹闭时间0.5h、1h和1.5h组的血流量较基线值高，而2h和3h组的再通后血流量较基线值低。光镜结果：夹闭0.5h未见组织缺血，可见组织出血，再灌注后可见明显的血管扩张充血及血管周围出血；夹闭1h未见组织缺血损伤；夹闭2h，可见缺血分界区，缺血区可见组织水肿，染色浅淡，部分神经元胞膜增厚、皱缩、核仁浓染，轻度髓鞘脱失，再灌注后，浅染区较闭塞组减少，髓鞘脱失不明显，但有明显的血管扩张出血和少量组织出血；夹闭3h，可见明显的缺血分界区，缺血中心区组织水肿、浅染、间隙增大，神经元有明显的缺血损伤，胞体出现空泡现象，尼氏体减少或消失，细胞皱缩等，可见轻度髓鞘脱失，再灌注后缺血损伤程度减轻，可见明显的出血现象；夹闭6h，缺血区明显扩大，有时可由腹侧延伸至背侧，缺血中心区出现神经元固缩和变性坏死，边缘区可见神经元胞体皱缩、尼氏体减少，髓鞘脱失严重，再灌注后缺血范围未见明显减小，并可见组织出血，髓鞘脱失严重，部分缺血区内可见白细胞浸润。结论：①夹闭大鼠基底动脉第一，第二无分支区后出现呼吸不规则、抽搐、呃逆、瘫痪、瞳孔变化、眼球震颤、意识障碍等神经功能障碍与临床脑干梗死患者所出现的症状有相似之处。②基底动脉再通后，大鼠所出现的神经症状未见明显改变。③病理学观察发现脑干缺血后所造成的超早期病理变化，随缺血时间的延续病理损伤愈严重。再灌注后，脑干缺血3h内超早期病理表现减轻；脑干缺血6h超早期病理表现没有明显减轻。④脑干局部血流值在基底动脉闭塞后较闭塞前明显降低，说明BA闭塞效果可靠；BA再通后，脑干局部血流值较再通前明显增加，但存在高灌注和低灌注现象，后者提示脑干的血管自动调节