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休眠期珙桐种子cDNA文库构建及EST第45卷第l01O阳3.绵阳师范学院分子生物学与生物制药重点实验室绵阳的cDNA中在0.5,1.0kb.核心词:珙桐;种子;休眠;cDNA珙桐种子的休眠期较长,普通2,3止,已从果实形态构造(万朝琨,1988;1993;1995),次生代谢物质(李卓杰等,1989;收稿日期:—08—基金项目:国家自然科学基金*1998;1珙桐种子于12月采自四川I使用SMARTTcDNALibraryConstructionKit(—后1次抽提的上清液中加入1/10体积的醋酸铵和2倍体积的冷乙醇(40【=),一2Oo30min.混合物离心30min,250肚L4tool?L醋酸铵沉淀RNA.延伸合成双链cDNA.然后通过蛋白酶KI酶切,再经ChromaSpin.400构建的珙桐种子的cDNA数,计算文库滴度.根据cDNA有限公司测序.借助生物软件DNASTAR和物序列后,分别使用BlastN和BlastX检索2珙桐种子总RNA高质量的RNA是构建cDNA文库的核心,取eDNA将含有黏性末端的cDNA与载体~,TriplEx2EST通过BlastX和BlastN软件120条有效EST19.2%,13条EST序列无匹配,占l8.3%(表3提取高质量的RNA,是构建cDNA标.普通来说,文库的滴度能达成10pfu?mL率为98%,EST(Adamseta1.,1991;G亿钙离子依赖膜联蛋白Ca2?dependentmembrane—Ubiquitin--relatedmodifier-孤胆基因相似蛋白4,NifU-脱水素木薯醵肽聚糖绑定LvsMPeptidoglycan?-bindingLysMdomain-金属抗性蛋白60S酸性核糖体蛋白NNAD-薯.18783i,(,葡萄厶藻要.本研究通过构建珙桐种子的cDNA高琪,逢越,吴毓,等..日本七鳃鳗(Lam

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