医学微生物学：逆转录病毒-HIV、真菌

Retrovirus逆转录病毒含有逆转录酶的RNA病毒。依赖RNA的DNA多聚酶RNA肿瘤病毒亚科人类嗜T淋巴细胞病毒HTLT-I、II、V型慢病毒亚科HIV人类免疫缺陷病毒1983年发现，1986年正式命名HumanImmunodeficiencyVirusHIV-1分二型HIV-2人类免疫缺陷病毒(HIV)是获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的病原体，俗称艾滋病。主要西非及欧洲三个阶段输入期1985~1988外藉人；浙江血友病人输VIII因子播散期1989~1993云南吸毒；归国人员增长期1993~吸毒；职业卖血；性传播包膜生物学性状形态结构gp120,gp41核酸：

核衣壳核衣壳蛋白逆转录酶包膜病毒两条ssRNA刺突RNAP24衣壳蛋白P17内膜蛋白Gp120Gp41包膜蛋白逆转录酶HIV结构示意图培养特性细胞培养：动物模型：黑猩猩CD4+T单核-巨噬细胞抵抗力对热敏感一般化学消毒剂有效HIV的抵抗力不强：传染源和传播途径传染源

a）HIV无症状携带者

b）艾滋病患者2)血液传播：1)性传播：3)母婴传播:胎盘产道哺乳男同性恋异性恋传播途径医源性吸毒者温家宝来到河南上蔡邵店乡新和家园看望艾滋病致孤儿童

文楼村有3597口人，其中HIV阳性感染者373人，超过人口数的1/10。发病360人，涉及287户，占全村总户数的32%，致病机制：带有CD4的细胞T、巨噬、树突CCR5、CXCR4病毒逃脱免疫系统清除作用基因变异gp120与宿主基因整合储存在单核-巨噬细胞内病毒损伤CD4T细胞机制病毒出芽损伤细胞病毒对细胞的干扰未感染T细胞gp120-细胞融合多核巨细胞形成被感染T细胞gp120NKADCCCytotoxicTcell自身免疫激活凋亡基因致病过程及机制：急性期CD4+细胞明显下降病毒复制潜伏期免疫缺损期AIDS血清可检出HIV发热、咽炎、淋巴结肿大等血清中无HIV较长时间3~5年细胞、体液免疫下降机会感染、肿瘤带有CD4的细胞T、巨噬、树突中和抗体免疫性：抗-gp120的中和抗体细胞免疫CTL病毒逃脱免疫系统清除作用基因变异gp120与宿主基因整合储存在单核-巨噬细胞内微生物学检查检测病毒相应抗体：初筛：ELISA检测病毒及其成分：病毒的分离病毒的抗原成分---P24病毒的核酸确认：westernblot防治原则综合措施宣传教育、普及基本知识：传染源、传播方式、危害建立监测系统：高危人群：性工作者供血者检测加强国境检疫疫苗：亚单位疫苗人工合成寡肽疫苗重组活疫苗抗病毒治疗：叠氮脱氧胸苷（AZT）ddCddI逆转录酶抑制剂整合酶阻止HIV与靶细胞结合/融合何大一鸡尾酒疗法：原指“高效抗逆转录病毒治疗“，由美籍华裔科学家何大一于1996年提出，是通过三种或三种以上的抗病毒药物联合使用来治疗艾滋病。该疗法把蛋白酶抑制剂与多种抗病毒的药物混合使用，从而使艾滋病得到有效的控制。是对付艾滋病的最有效治疗方法，既可以阻止艾滋病病毒繁殖，又可以防止体内产生抗药性的病毒。魔术师约翰逊湖人队通过骨髓移植治愈艾滋病

HIV感染细胞二个靶分子:CD4、CCR5移植CCR5基因缺陷人的骨髓将病毒基因从人DNA上赶出人类嗜T细胞病毒两型

HumanT-cellLymphotropicVirusHTLV-IHTLV-II－－－－人T细胞白血病及淋巴瘤病原体致病性感染CD4+T细胞CD4+T大量增殖但并不破坏染色体突变，白血病

真菌（Fungus）

真核细胞型微生物（有细胞壁和完整的核）多数不致病，仅少数致病—真菌病。

真菌不是植物不含叶绿素，无根、茎、叶的分化。以腐生或寄生的方式摄取养料几种食用或药用真菌的形态

在日常生活中，我们常常看到真菌中的霉菌使食品发霉。其实真菌并不都是有害的，有些霉菌可以用来制作豆酱、腐乳、奶酪等食品；我们平常吃的蘑菇及木耳、银耳等，也是真菌。木耳牛肝菌香菇灵芝

青霉

曲霉青霉菌落霉菌的分布分布相当广泛，无所不在，而且种类和数量惊人。是各种复杂有机物，尤其是数量最大的纤维素、半纤维素和木质素的主要分解菌。一般情况下，霉菌在潮湿的环境下易于生长，特别是偏酸性的基质当中。霉菌的应用基本理论研究：霉菌在基本理论研究中应用很广，最著名的是利用粗糙脉胞菌进行生化遗传学方面的研究。分布及与人类的关系生产各种传统食品：如酿制酱、酱油、干酪等。工业应用：生产有机酸如柠檬酸、葡萄糖酸等，酶制剂如淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶等，抗生素如青霉素、头孢霉素等，维生素，生物碱，真菌多糖，植物生长刺激素如赤霉素，甾体激素类药物等。另外在生物防治、污水处理和生物测定等方面都有应用。霉菌的危害引起霉变：可造成食品、生活用品以及一些工具、仪器和工业原料等的霉变。引起植物病害：真菌大约可引起3万种植物病害。如水果、蔬菜、粮食等植物的病害。例如马铃薯晚疫病、小麦的麦锈病和水稻的稻瘟病等等。引起动物疾病：不少致病真菌可引起人体和动物病变。浅部病变如皮肤藓菌引起的各种藓症，深部病变如既可侵害皮肤、粘膜，又可侵犯肌肉、骨骼和内脏的各种致病真菌，在当前已知道的约5万种真菌中，被国际确认的人、畜致病菌或条件致病菌已有200余种（包括酵母菌在内）。引起食物中毒：霉菌能产生多种毒素，目前已知有100种以上。例如：黄曲霉毒素，毒性极强，可引起食物中毒及癌症。第一节概述圆形或卵圆形酵母菌(yeast)：白假丝酵母菌、新生隐球菌丝状菌(filamentousfungus)或霉菌(mold)一、形态单细胞真菌多细胞真菌霉菌的细胞结构细胞膜液泡内质网细胞壁线粒体细胞核核糖体由细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核、线粒体、核糖体、内质网及各种内含物（肝糖、脂肪滴、异染粒等）等组成。幼龄菌往往液泡小而少，老龄菌具有较大的液泡。

真菌细菌细胞真核细胞原核细胞细胞核有，还有核仁、核膜拟核，无核仁、核膜细胞器有只有核糖体细胞壁无肽聚糖，由多糖与蛋白质组成有肽聚糖细胞膜含固醇不含固醇基本结构真菌细胞壁结构示意图糖蛋白葡聚糖几丁质单细胞:圆形/卵圆形母细胞出芽并脱离母细胞成为子细胞(新的繁殖体)---

酵母菌(酵母样菌)

多细胞:菌丝与孢子交织成团菌落疏松呈丝状---丝状菌(霉菌)

菌丝

孢子多细胞真菌形态孢子菌丝1、单细胞真菌：

又称酵母菌（yeast），圆形或卵圆形,外形与细菌相似但较大，出芽方式繁殖。单细胞型真菌2、多细胞真菌：

又称丝状菌（filamentousfungus）、霉菌（mold），该菌能长出菌丝，菌丝延长分支，有的菌丝上长出孢子，孢子再出芽形成菌丝…。多细胞型真菌多细胞型真菌1、菌丝(hypha):

环境适合时，真菌的孢子出芽形成芽管，延长成丝状，称菌丝，菌丝长出许多分支交织成团，称菌丝体(mycelium)

菌丝按结构可分为：有隔菌丝与无隔菌丝（1）有隔菌丝：大部分真菌的菌丝在一定间距见有横隔，称隔膜。将菌丝分成一连串的细胞。（2）无隔菌丝：菌丝中无横隔将其分段，整条菌丝就是一个细胞。在一个细胞内含有许多核，是一种多核单细胞。真菌的菌丝

菌丝体按其功能可分三种：（1）营养菌丝：伸入到培养基内部，以吸收养分为主的菌丝。（2）气生菌丝体：向空中生长的菌丝。气生菌丝发育到一定阶段可分化成繁殖菌丝。（3）生殖菌丝：可产生孢子

3、菌丝形态有多种：

螺旋形、球拍形、结节状、鹿角状及梳状等，不同真菌菌丝形态不一--鉴定真菌2、孢子(spore)：孢子是真菌的繁殖器官，一条菌丝上可长出多个孢子。在环境条件适宜时，孢子又可发芽生出芽管，发育成菌丝体。孢子分有性孢子和无性孢子两大类：

有性孢子——由同一菌体或不同菌体上的两个细胞融合而成。

无性孢子——由菌丝上的细胞分化生成，并不发生细胞融合，包括：分生孢子、叶状孢子和孢子囊孢子。

孢子芽胞作用真菌繁殖结构细菌休眠结构，抵御不良环境抵抗力不强，加热60~70℃短时间即可死亡强，有的可耐100℃数小时孢子----是真菌的繁殖器官霉菌的无性繁殖

不经过两个性细胞的结合，只是由营养细胞分裂或分化而形成同种新个体的过程。霉菌的无性繁殖主要通过产生以下四种类型的无性孢子来实现。霉菌的繁殖（1）分生孢子（condium）由生殖菌丝末端细胞分裂或收缩形成，也可在菌丝侧面出芽形成，有两种：大分生孢子（macrocondium）：多细胞组成，梭状、棍棒状；小分生孢子（microcondium）：单细胞组成。（2）叶状孢子（thallospore）：芽生孢子——出芽形成；厚膜孢子——胞浆浓缩，胞壁增厚而成；关节孢子——菌丝胞壁增厚，形成链状排列的长方形节段。芽生孢子关节孢子厚膜孢子

芽生孢子

:(常见于隐球菌念珠菌)

母孢子发芽形成→与母体脱离→新个体＼芽体延长互相连接(不脱离母体)↓

假菌丝

芽生孢子厚壁孢子

:为休眠孢子菌丝内胞浆浓缩胞壁增厚而成(环境不适时形成)真菌种类不同孢子形状大小也不同→鉴别真菌真菌的孢子

（3）孢子囊孢子（sporangiospore）：菌丝末端膨大成囊状，内含许多孢子。(二)霉菌的有性繁殖

大多数霉菌是单倍体，二倍体仅限于接合子。在霉菌中，有性繁殖不如无性繁殖普遍，有性繁殖多发生在特定的条件下，往往在自然条件下较多，在一般培养基上不常出现。不同的霉菌有性繁殖的方式不同。多数霉菌是由菌丝分化形成特殊的性细胞（器官）——配子囊或由配子囊产生的配子（雄器和雌器）相互交配，形成有性孢子。常见的有性孢子有卵孢子、接合孢子、子囊孢子和担孢子。培养繁殖方式：单细胞---出芽多细胞---孢子特点：低营养、低温度（浅部）、低PH(4.0-6.0)、高湿度和氧培养基：沙保(Sabouraud)培养基菌落：单细胞--酵母型菌落、

类酵母型菌落（假菌丝）多细胞--丝状菌落

酵母型菌落C.albicans菌落(类酵母型)曲霉属丝状菌落真菌的菌落有两种：酵母型菌落和丝状菌落酵母型菌落丝状菌落抵抗力对干燥、日光、紫外线及一般消毒剂抵抗力强对热敏感，60℃1小时菌丝、孢子均被杀死对2%石碳酸、0.1%升汞、2.5%碘酊或10%甲醛敏感对细菌抗生素不敏感对二性霉素B、制霉菌素、咪康唑、酮康唑、氟康唑和伊曲康唑敏感

致病性真菌感染:

浅表真菌感染：

如皮肤癣真菌病深部真菌感染：机会致病性真菌感染：

内源性真菌感染,机体免疫力低下如白假丝酵母菌、新生隐球菌、卡氏孢子菌等引起

真菌性感染和抗真菌免疫真菌感染—真菌病毒素性疾病1)真菌中毒：

粮食受潮霉变，摄入真菌或其产生的毒素后可引起急、慢性中毒称为真菌中毒症（mycotoxicosis)。主要有：黄曲霉毒素2)与肿瘤:

黄曲霉毒素，肝癌真菌超敏反应性疾病：

敏感患者吸如孢子或菌丝,引起超敏反应如荨麻疹、哮喘、变应性鼻炎免疫性

1.天然免疫免疫力与机体免疫状态有关皮肤粘膜屏障作用正常菌群的拮抗作用吞噬细胞的作用2.获得性免疫

真菌感染的治愈与细胞免疫有关

真菌的微生物学检查法标本

浅部感染真菌:毛发、皮屑、指甲深部感染真菌:痰、血液、脑脊液等直接镜检：浅部标本---KOH处理后镜检假丝酵母菌---革兰染色（假菌丝、厚膜孢子）隐球菌---墨汁负染（厚荚膜）其他多细胞真菌----特殊染色镜检分离培养

微生物学检查步骤：

取患部标本（毛发、皮屑等）

→置载玻片→加10%NaOH（或10%KOH）→微加温消化→镜检（观察菌丝和孢子）病发镜检可见发内菌丝

足癣鳞屑镜检可见鳞屑细胞间有菌丝

体癣皮屑可见关节孢子假菌丝厚膜孢子四、真菌感染的防治原则1、对于皮肤癣菌的感染，应注意个人卫生并辅以抗真菌药物治疗；2、对于深部感染真菌，应以提高机体免疫力为主并辅以抗真菌药物治疗；3、抗真菌药物主要有：二性霉素B、制霉菌素、咪康唑、酮康唑、灰黄霉素、克霉唑等。皮肤与皮下组织感染真菌1。皮肤癣真菌（Dermatophytes）

皮肤癣真菌是一类主要引起皮肤浅部感染的真菌，具嗜角质性，只侵犯角化的表皮、毛发和指（趾）甲，由真菌增殖及代谢产物刺激宿主引起一系列病理反应。

癣手足癣体癣股癣甲癣(灰指甲)头癣致病特点:一菌一病一菌多种癣多菌引起同一症状毛癣菌属

小孢子菌属表皮癣菌属三个属

玫瑰色毛癣菌菌落玫瑰色毛癣菌大分生孢子絮状表皮癣菌菌落絮状表皮癣菌厚膜孢子石膏样小孢子菌菌落

石膏样小孢子菌大分生孢子2。角层癣病皮肤角层浅表：角层病变，汗斑毛干表面：

手足癣

体癣

股癣

头癣皮下感染真菌

孢子丝菌、着色真菌深部真菌感染侵袭深部组织和内脏以及全身的真菌。外源性，致病性较强，引起慢性肉芽肿样炎症、溃疡和坏死假丝酵母菌(Candida)主要引起皮肤、粘膜和内脏的急、慢性炎症，常见当正常菌群失调或人体免疫力下降时致病，一般以白假丝酵母菌（C.albicans）多见，但近年来都柏林假丝酵母菌(C.dubliniensis)感染呈上升趋势。

白假丝酵母菌(Candida

albicans)

形态：圆形或卵圆形单细胞真菌，革兰阳性

俗称白色念珠菌Candidaalbicans

Candidaalbicans

培养特性：普通琼脂、血琼脂与沙保培养基,需氧。室温或37℃甚至42℃生长良好在沙保培养基上形成类酵母型菌落;在玉米粉培养基上长出厚膜孢子，假菌丝和厚膜孢子有助于鉴定。沙保培养基上白念

白念的厚膜孢子

条件致病：皮肤粘膜感染鹅口疮，阴道炎内脏感染：肺炎、关节炎、膀胱炎，肾盂肾炎中枢神经感染：脑膜（脑）炎、脑脓肿致病性过敏性疾病1、皮肤粘膜感染

念珠菌性甲沟炎

鹅口疮

婴儿泛发性皮肤念珠菌病

2、内脏感染：肺炎、支气管炎、肠炎、膀胱炎、肾盂肾炎等。

3、中枢神经感染

可有脑膜炎、脑膜脑炎和脑脓肿等微生物学检查

1)取标本镜检：根据不同疾病采取不同标本。

标本（痰、脓、脑脊液等）Gram染色

镜检（芽生孢子、假菌丝）2)分离鉴定:芽管形成试验

新生隐球菌（Cryptococcusneoformans）

新型隐球菌广泛分布于自然界，主要传染源是鸽子，鸽粪中最多。易侵袭肺部和脑部，致急性、亚急性或慢性感染。新生隐球菌生物学特性（一）形态染色：本菌为单细胞，圆形，墨汁负染后可见菌体周围有一圈透明的厚荚膜，比菌体可大1-3倍，由于不易着染而称之隐球菌。常可见芽生孢子。（二）培养特点：本菌在沙保培养基及血平板上于25℃及37℃均可形成酵母型菌落（乳白-橘黄），菌落日久可液化流动。（三）微生物检查1、染色镜检：标本（痰、脑脊液等）→墨汁负染→镜检（观