脂质体作为药物载体的研究进展

脂质体作为药物载体的研究进展

脂质体是由磷脂和其他亲属性材料分散于水中的一个球形物质，并通过一层或多层亲水脂质膜封闭而成的一个球状体。60年代末Rahman等人首先将脂质体作为药物载体应用。近年来,随着生物技术的不断发展,脂质体制备工艺逐渐完善,作用机制进一步阐明。脂质体可在体内降解,无毒性,无免疫原性。其作为药物载体可以提高药物治疗指数、降低药物毒性、减少药物不良反应、减小药物剂量。近年来,脂质体作为药物载体的研究愈来愈受到重视,进展迅速。1脂质体的作用和特点1.1细胞毒性作用脂质体能选择性地分布于某些组织和器官,增加药物对淋巴系统的定向性,提高药物在靶部位的治疗浓度。尤其对抗癌药物,能使之选择性地杀伤癌细胞或抑制癌细胞,对正常组织、细胞的毒性明显降低或无损害作用。对脂质体表面性质进行改变,如粒径大小、表面电荷、组织特异性抗体等,可提高药物对靶区的选择性,从而也降低了毒性,减少了不良反应。1.2抗抑药性脂质体与细胞膜结构相似,有融合作用,使脂质体与细胞膜有较强的亲和性,可增加被包裹药物透过细胞膜的能力,对抗靶细胞抗药性。1.3长期使用药物包裹于脂质体内,可降低在组织中扩散而缓慢向血液中释放药物,从而延长药物作用。2脂质体制备方法脂质体常用以下几种方法制备。2.1水溶液中本物的制备求取本文图2将磷脂与胆固醇等类脂质及脂溶性药物溶于氯仿(或其他有机溶剂)中,将该氯仿液于玻璃瓶中旋转蒸发,使在玻璃瓶的内壁上形成一薄膜;将水溶性药物溶于磷酸盐缓冲液中,加入玻璃瓶后不断搅拌,即得。如干扰素、紫杉醇、人参皂甙等均用此法制得脂质体。2.2大多孔脂质体的制备将磷脂与胆固醇等类脂质及脂溶性药物溶入有机溶剂中(多用乙醚),该溶液经注射器缓缓注入加热至50℃(并用磁力搅拌)的磷酸盐缓冲溶液(或含水溶性药物)中,不断搅拌至乙醚除尽为止,即得大多孔脂质体。将其混悬液通过高压乳匀机两次,所得成品大多为单室脂质体,少量为多室脂质体,粒径绝大多数在2μm以下。如头孢菌类脂质体可用此法制得。2.3超声波分离脂质体水溶性药物溶于磷酸盐缓冲液,加入磷脂与胆固醇及脂溶性药物成共溶于有机溶剂的溶液,搅拌蒸发除去有机溶剂,残留液经超声波处理,然后分离出脂质体。本法制备的大多为单室脂质体。如维生素E脂质体、5-氟脲嘧啶脂质体等。2.4热稳定性药物提取将类脂高度分散在水溶液中,冷冻干燥,然后再分散到含药的水性介质中,形成脂质体。此法尤适用于过热不稳定的药物。如阿糖胞苷、蓖麻毒素等的脂质体可用此法制得。另外,还可使用重建冻干法制备脂质体,将类脂乙醇液与PBS混合并制成空白脂质体,灭菌、超声波粉碎,加入药物和冻结保护剂,冷冻干燥,即得。2.5冷暴生物冰液的破碎膜的形成机理先制备未包封药物的小单室脂质体,在冻干前将待包封的药物加入,在快速冷冻过程中,由于冰晶的形成,使形成的脂质体膜破裂,形成冰晶的片层与破碎的膜同时存在,此状态不稳定,在缓慢融化过程中,暴露出的脂膜互相融合重新形成脂质体。如骆驼蓬总碱脂质体的制备。2.6水性混悬液的制备将磷脂等膜材溶于有机溶剂如氯仿、乙醚等,加入待包封药物的水溶液进行短时超声,直至形成稳定的W/O型乳剂。然后减压蒸发除去有机溶剂,达到胶态后,滴加缓冲液,旋转帮助器壁上的凝胶脱落,然后在减压下继续蒸发,制得水性混悬液,通过凝胶色谱法或超速离心法,除去未包封的药物,即得到大单层脂质体。此法适合于包裹水溶性药物、大分子生物活性物质如各种抗生素、胰岛素、免疫球蛋白、碱性磷脂酶、核酸等。2.7乳化水相法制备脂质体法将少量水相与较多量的磷脂油相进行乳化(第1次)形成W/O的反相胶团,减压除去部分溶剂,然后加较大量的水相进行乳化(第2次),形成W/O/W型复乳,减压蒸发除去有机溶剂,即得脂质体。2.8固相保温制成法将磷脂,表面活性剂加少量水相溶解,胆固醇熔融后与之混合,然后滴入65℃左右的水相溶液中保温制得。如黄芪多糖脂质体是用本法制备的。2.9凝胶-过滤法脂质薄膜、多层脂质体或单层脂质体与胆酸盐、脱氧胆酸盐等表面活性剂混合,通过离心法或凝胶过滤法或透析法除去表面活性剂,就可获得中等大小的单层脂质体。此法适合于制备脂溶性蛋白类药物的脂质体。另外,本法通过控制除去表面活性剂的操作条件,可以改变粒径,并可获得高度均一粒径的脂质体。2.10双层类脂苯磺酸盐通过反相胶团经高速离心,从有机相、水透过界面而制得小单层脂质体。当反相胶团经过界面时,就披上第二层类脂外衣形成双层膜。此外,还有前体脂质体法、钙融合法、加压挤出法、pH梯度法、喷雾干燥法等。在实际应用中,常以几种方法合用,效果更好。3脂质体用作药物载体3.1减少药物的用量,减轻推动细胞、免疫反应由于脂质体对淋巴系统定向性和对癌细胞的亲和性,改变了药物在组织中的分布,使药物选择性地杀伤癌细胞或抑制癌细胞的繁殖,从而提高疗效,减少剂量,降低毒性,减轻变态和免疫反应。研究表明,脂质体猪苓多糖能显著减少黑色素瘤肝转移癌生长作用,而空白脂质体和游离猪苓多糖则无明显作用。3.2混悬水剂联合药剂利用脂质体与生物细胞膜亲和力强的特点,将抗生素包裹在脂质体内可提高抗菌效果。如消炎痛制成脂质体后,其抑制角膜穿孔伤炎性反应的作用较混悬水剂明显增强。同时由于脂质体和脂复合物或脂分散体的粒子相对与游离的药物来说,主要聚集于网状内皮系统,因此可用于治疗利什曼病等网状内皮系统疾病。同时由于脂质体可以很大程度的降低肾脏的摄取,当二性酶素B制成脂质体后,能显著降低在治疗过程对真菌感染患者引起的急性肾毒性。3.3脂质体激活剂活化的巨噬细胞对肿瘤细胞的转移有细胞毒作用,使用游离的巨噬细胞活化因子或合成的胞壁酰二肽直接注射入肌体,巨噬细胞很少被活化。然而将这些药物包封成脂质体后注入肌体,即可使巨噬细胞的摄取量明显增加,并能有效的活化巨噬细胞,抑制肿瘤的生长和转移。如人参多糖多相脂质体可激活正常或荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞FC受体,有助于改善机体的免疫功能,增强巨噬细胞对肿瘤的攻击能力。淫羊藿复合脂质体可显著对抗“阳虚”模型小鼠体重、脾重的降低,提高动物RBC-C3b受体花环率和RBC-IC花环率及改善其调节因子的活性,增强T淋巴细胞的免疫活性。3.4无环鸟苷病毒剂抗病毒药物制成脂质体,可显著提高抗病毒疗效,降低用量和毒副反应。无环鸟苷是一种核苷类的抗病毒剂,有较好的生物利用度。但本品水溶性差,将其制成多相脂质体混悬液后,大大提高了其水溶度,降低了用量。3.5部分酶治剂稳定性差利用脂质体作为酶的载体,可将外源性酶导向人体的特定部位,且有保护酶,防治酶失活的作用,解决了部分酶疗法中酶制剂稳定性差的问题。此外,脂质体能延长激素的作用时间,降低毒副作用。3.6治疗老年斑、型前胶原基因表达的效果小檗碱制成脂质体可增强降血糖的作用。维生素E脂质体治疗老年斑的效果优于维生素E乳剂。冬虫夏草脂质体能明显减少肝脏的胶原沉积,并能抑制Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因的表达。磷脂脂质体对银杏叶乙醇提取物有明显增效作用。4一些新的脂质体4.1相变温度的测定脂质膜在由“凝胶态”转到液晶结构时,其磷脂的脂酰链紊乱度及活动度增加,膜的流动性也增大,此时包封的药物释放速率亦增大,此温度称为脂质体的相变温度。根据这一原理制备的脂质体,称为温度敏感脂质体。4.2方晶相法根据肿瘤附近的pH值比周围正常组织低的事实,设计了pH敏感脂质体。其原理是pH值低时可导致脂肪酸羧基的质子化而引起六方晶相(非相层结构)的形成,而它的形成则是膜融合的主要机制。如白喉霉素ApH敏感脂质体,DNApH敏感脂质体等等。4.3细胞产物的制备免疫脂质体是机体修饰的脂质体的简称。近年来,有将癌细胞当作抗原细胞,使产生对抗这种癌细胞的单体,然后将这种抗体结合到脂质体上,从而使这种脂质体能够将药物定向输送到癌细胞,起到良好的疗效。4.4糖脂质体的分离培养将糖脂链的一部分用棕榈酰或具有适当间隔基的胆甾醇基取代得到糖类衍生物,再与含药脂质体混合,在适当的条件下孵育,即得到掺入糖脂的脂质体。这种脂质体可改变其在组织内的分布,且稳定性好。4.5分散剂和水溶液液质体前体脂质体通常为干燥,具有良好流动性能的颗粒或粉末,贮存稳定,应用前与水水合即可分散或溶解成等张的脂质体,这种脂质体解决了稳定性和高温灭菌等问题,为工业生产奠定了基础。4.6新型脂质体的表征聚合脂质体是构成脂质体的每个类脂分子通过共价键的形式连接起来的一种新型脂质体,通过共价键把脂质体双分子膜与表面活性剂分子连接起来。可显著提高其稳定性,降低粒子的融合与聚集,使脂质体中药物渗漏显著降低,延长了有效期。4.7脂质纳米磁性脂质体是在脂质体中掺入铁磁性物质制成。4.8降低人体毒性将含有声振波敏感分子的脂质体药物给予患者,在其体外施声振波于所选择的靶位区域,使药物在脂质体内释放出,以增加组织细胞对药物的摄取,使靶位的药物浓度升高,从而降低全身毒性。