动物微生物课件

细菌的营养代谢

一细菌的营养物质及其作用1、细菌的营养物质作用：

(1)供给细菌合成细胞物质的原料；

(2)用以产生能量；

(3)有的营养物如维生素主要用于调节新陈代谢。2、细菌的营养物质（1）水是细胞维持正常生命活动所必不可少的，一般可占细胞重量的70－90%。在微生物各种各样的生理活动中必须有水参加才能进行。水是一种最优良的溶剂，可保证几乎一切生物化学反应的进行水可维持各种生物大分子结构的稳定性，并参与某些重要的生物化学反应。水还有许多优良的物理性质，诸如高比热、高汽化热、高沸点以及固态时密度小于液态等，都是保证生命活动十分重要的特性。

（2）碳源：是构成微生物细胞和代谢产物中碳架来源的营养物。碳源既是微生物的组成成分，又是微生物的能量来源。微生物可以利用的碳源范围极广，分为有机碳源和无机碳源两大类，糖类是最广泛利用的碳源。碳源物质在细胞内经过一系列复杂的化学变化后成为微生物自身的细胞物质(如碳水化合物、脂、蛋白质等)和代谢产物，碳可占一般细菌细胞干重的一半。

（3）氮源：是能提供微生物生长繁殖所需氮元素的营养源。氮是组成微生物蛋白质、酶和核酸的成分。能利用的氮源种类十分广泛。空气中分子态的氮、无机和有机氮。氮源这类物质主要用来合成细胞中的含氮物质，一般不作为能源，只有少数自养微生物能利用铵盐、硝酸盐同时作为氮源与能源。不同种类的微生物对氮源的需要也不尽相同。微生物培养时最常用的有机氮源是牛肉膏、酵母膏等，蛋白胨（部分水解蛋白质）是许多微生物良好的氮源。（4）无机盐主要有P、S、Mg、K、Ca、Na、F微量元素等。无机盐是微生物生长必不可少的一类营养物质,它们在机体中的生理功能主要是作为酶活性中心的组成部分、维持生物大分子和细胞结构的稳定性、调节并维持细胞的渗透压平衡、控制细胞的氧化还原电位和作为某些微生物生长的能源物质等。主要元素包括磷、硫、钾、镁、钙、钠等。微量元素包括锌、锰、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼等。在配制培养基时，首选加入磷酸氢二钾和硫酸镁，基本时可以同时提供4种需要量最大的元素。

（5）生长因子通常指那些微生物生长所必需且需要量很小,而且微生物自身不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物。根据生长因子的化学结构和它们在机体中的生理功能的不同,可将生长因子分为维生素、氨基酸与嘌呤及嘧啶三大类。生长因子可以从酵母膏、玉米浆、麦芽汁、血液或血清中获得。1、自养型：能在完全为无机物的环境中生长，所需营养物质简单，他们具有完备的酶系统，能利用二氧化碳和碳酸盐作为碳源，合成菌体内所需要的有机碳化合物。例如：菌红素、菌绿素等等。即这类细菌含有特殊的色素。

2、异养型：必须利用有机物作为其碳源，不具备完备的酶系统，其代谢所需能量大多通过分解化学物质而获得。

腐生菌：从无生命的有机物中取得能量和碳源的细菌。

寄生菌：从活的动植物或微生物体内取得能量和碳源的细菌。二细菌的营养类型三细菌摄取营养的方式1、被动扩散：指疏水性双分子层细胞膜在无载体蛋白参与下，单纯依靠物理扩散方式让许多小分子、非电离分子尤其是亲水性分子被动通过的一种物质运送方式。主要有氧、二氧化碳、乙醇和某些氨基酸分子。2、促进扩散：指溶质在运送过程中，必须借助存在于细胞膜上的底物特异载体蛋白的协助，但不消耗能量的一类扩散性运送方式。促进扩散与被动扩散的主要区别在于通过促进扩散进行跨膜运输的物质需要借助与载体(carrier)的作用才能进入细胞.而且每种载体只运输相应的物质,具有较高的专一性。3、主动运输指一类须提供能量并通过细胞膜上特异性载体蛋白构象的变化，而使膜外环境中低浓度的溶质运入膜内的一种运送方式。运送对象举例：氨基酸、乳糖等糖类，Na+、Ca2+等无机离子。ATP

ADP

+Pi

恢复原构像再循环耗能构像改变膜上膜外膜内移位结合12主动运输特点：被运送的物质可逆浓度梯度进入细胞内要消耗能量，必需有能量参加。有膜载体参加，膜载体发生构型变化。被运送物质不发生任何变化。

4、基团转移指一类既需特异性载体蛋白的参与，又需耗能的一种物质运送方式，其特点使溶质在运送前后还会发生分子结构的变化，因此不同于一般的主动运送。

运送对象举例：葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸等。运送机制主要靠磷酸转移酶系统。运输方式浓度载体耗能运送分子发生变化单纯扩散高→低不需要不耗能不变化促进扩散高→低需要不耗能不变化主动运输低→高需要耗能不变化基团转位低→高需要耗能变化运输方式：1、根据各种酶所催化的反应类型，将酶分为氧化还原酶、转移酶、水解酶、裂解酶、异构酶、合成酶六大类。

2、根据酶作用的部位分为：胞外酶、胞内酶

胞外酶：是在细菌内部产生后分泌到菌体细胞外的酶。例如：水解酶：蛋白酶、脂肪酶、糖酶。

胞内酶：在细胞内产生并发挥作用。例如：生物氧化的呼吸酶。

3、按照酶的产生方式分：

固有酶：细菌本身具有，是细菌代谢中必需的酶。

例如：大多水解酶。

诱导酶：细菌在环境因素刺激下产生的酶，也称适应酶。例如：大肠杆菌的半乳糖酶，只有在环境中存在乳糖时才产生。四细菌的酶根据细菌呼吸时对氧的需要程度，可将细菌分为需氧菌、厌氧菌、微嗜氧菌、兼性厌氧菌。

1、需氧菌：如果细菌只具有催化有氧呼吸的酶系统，必须在有氧的条件下才能够完成生长和繁殖，称为需氧菌。例如：绿脓杆菌。

2、厌氧菌：细菌只能在无氧条件下才能生长繁殖，称为厌氧菌。例如：破伤风梭菌，肉毒梭菌等。

3、微嗜氧菌：细菌酶介于需氧与厌氧之间，其代谢过程中虽然需要氧，但只在一定的压强下生长最好。例如：牛流产布鲁氏菌。

4、兼性厌氧菌：细菌的酶系统较完善，既含有催化有氧呼吸的酶，又含有催化无氧呼吸的酶，在无氧和有氧的条件下均能生长繁殖。例如：大肠杆菌。

五细菌的呼吸类型1、分解产物：

（1）糖的分解产物：糖、二氧化碳、酸类、醇类、酮类等。不同种类的细菌有不同的酶，对于某种糖，有的细菌能分解，有的细菌则不能分解。

例如：大肠杆菌能分解乳糖，而沙菌不能。-----乳酸发酵试验，v--p实验，MR实验（产酸）

(2)蛋白质的分解产物：不同种类的细菌，分解蛋白质的能力有差异。

☻H2S试验：分解含硫氨基酸、产生硫化氢。

☻明胶试验：有的细菌含有明胶酶，有的不含。含有的可使明胶液化。

☻尿素试验：分解尿素---NH3

☻硝酸盐还原试验：到亚硝酸盐

六细菌的新陈代谢产物2、合成产物：

（1）维生素：人和动物体内的细菌能合成维生素Ｂ和维生素Ｋ。

（2）细菌素：是某些细菌产生的一种具有抗菌作用的蛋白质，只对亲源关系较近的细菌有抑制作用。例如大肠菌素、绿脓菌素、葡萄球菌素等。

（3）毒素：内毒素与外毒素

（4）热源质：G-产生的酯多糖物质，注入人和动物体内，可以引起发热反应。故成为热源质。它能耐高压蒸汽灭菌，故在制备注射剂和生物制品时，应将其除去。（5）酶类：细菌在代谢过程中产生毒性酶，能破坏动物的正常组织和细胞成分有助于细菌在体内扩散，增强细菌的致病能力。

（6）色素：多种细菌在条件适宜时，能形成各种色素。

☻水溶性色素：例如绿脓杆菌产生的绿脓色素是水溶性。

☻脂溶性色素：例如葡萄球菌产生类胡萝卜素。溶于氯仿、遗传等，称为脂溶性色素，故菌落显示颜色。1、细菌生长繁殖的条件：

（1）营养物质：水分、含碳化合物、含氮化合物、矿物质。

（2）温度：病原菌的最适宜生长温度为37℃。

实验室培养细菌用恒温培养箱调至37℃。

（3）PH：最适7.2-7.6,所以往往需要在培养基内加入一定的缓冲剂。例如：K2HPO4

（4）渗透压：例如：盐腌的原理（防腐）、盐提高食品中的渗透压，细菌不能生长，有的细菌，如：副溶血弧菌，粪链球菌等能在较高的食盐浓度下生长（百分之八）。七细菌的生长与繁殖2、细菌生长繁殖的特点：

（1）细菌的繁殖方式和速度：

细菌的繁殖方式“二分裂”，环境适宜，大多细菌每秒20至30分钟分裂一次，按此速度计算，一个细菌生长繁殖10小时后，可以形成10亿个细菌，有些细菌如分枝杆菌，10多个小时才能分裂一次。

（2）细菌的生长曲线：

营养物质的消耗，细菌不可能始终保持这种高速度的繁殖，经过一段时间后，繁殖速度逐渐减慢，死亡细菌数增加。

如果将一定数量的细菌接种于适宜的培养基中，间隔不同时间取样检查，以培养时间为横坐标，以细菌数的对数为纵坐标，可以形成一条生长的曲线，称为细菌的生长曲线。细菌的典型生长曲线总菌数活菌数培养时间/h

Ⅱ.指数期Ⅲ.稳定期Ⅳ.衰亡期Ⅰ.延滞期细菌数目（个/ml）对数ⅡⅢⅣⅠ

根据细菌的生长速率常数的不同，可将生长曲线大致分为四个时期：

Ⅰ迟缓期

迟缓期出现的原因把少数单细胞细菌接种到新鲜的培养基中培养时，细胞并不立即进行分裂繁殖，微生物的增殖数为０，这时细胞需要合成多种酶，辅酶和某些中间代谢产物，因此要经历一个调整和适应过程。

迟缓期的特点

1、生长速率常数为零；

2、细胞形态变大或增长；

3、细胞内的RNA含量增高，原生质呈嗜碱性；

4、合成代谢十分活跃；

5、对外界不良环境反应敏感。

影响迟缓期长短的因素

1、菌种特性；2、接种龄；3、接种量；4、培养基成分

缩短迟缓期的方法

1、接种对数生长期的菌种，采用最适菌龄；

2、加大接种量；

3、用营养丰富的天然培养基等。

Ⅱ指数期指数期的特点

1、活菌数和总菌数接近

2、生长速率常数最大，代时最短

3、细胞进行平衡生长，细胞的化学组成及形态，生理特性比较一致

4、酶系活跃，代谢旺盛

该期的微生物生产中多被用做种子和科学试验材料影响指数期微生物代时长短的因素菌种营养成分营养物浓度培养温度生长限制因子:凡处于较低浓度范围内可影响生长速率和菌体产量的某营养物。Ⅲ稳定期稳定期的特点：

1、生长速率常数R等于零，活菌数达到最高峰，并保持相对稳定。

2、微生物细胞内代谢物积累达到最高峰。

3、芽孢杆菌这时开始形成芽孢。

4、这是产物（菌体或与菌体生长相平行的代谢产物）的最佳收获时期。稳定期到来的原因

1、营养物尤其是生长限制因子的耗尽

2、营养物的比例失调

3、有害代谢产物的积累

4、pH值、Eh值等理化条件不适宜Ⅳ衰亡期衰亡期的特点1、微生物死亡数大于增殖数，活菌数大大减少，群体衰落2、细胞出现多形态,大小不等的畸形,变成衰退型3、细胞死亡,出现自溶现象。4、有的微生物在此期合成或释放次生代谢物。5、芽孢杆菌在此期释放芽孢。

细菌的人工培养一般检验方法

主要动物细菌

一细菌的人工培养

培养基是人工配制的适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物营养基质。

根据培养基的用途来分基础培养基：满足一般微生物生长繁殖所需要的营养物质。牛肉膏蛋白胨培养基是最常用的基础培养基。

营养培养基:在自然界中各种微生物通常是混杂在一起的，了解了某一些微生物的营养要求，配制适合这种微生物生长而不适合其他微生物生长的培养基，就达到了从自然界中分离这种微生物的目的，这种培养基就称为营养培养基。一般常加入血、血清或动植物提取液等。－－－－“投其所好”

选择性培养基:根据不同的微生物对营养的特殊要求,或对物理化学条件的抗性而设计的培养基,利用这一类培养基可以把需要微生物从混杂的其他微生物分离和确定。

－－－－“取其所抗”鉴别培养基:在培养基中加入某种特殊化学物质,某种微生物在培养基中生长后能产生某种代谢产物,而这种代谢产物可以与培养基中的特殊化学物质发生特定的化学反应,产生明显的特征性变化,根据这种特征性变化,可将该种微生物与其他微生物区分开来。

根据培养基物理状态分1、液体培养基:配制后不加任何凝固剂。2、半固体培养基:在液体培养基上加进一定凝固剂,在液体培养基中如加0.5%琼脂,可以用来观察细胞运动的特征,鉴定菌种,测定抗菌素的效价等。3、固体培养基:在液体培养基中加入凝固剂(如1.5-2.0%琼脂)。固体培养基为微生物的生长提供了一个营养表面,在这个表面生长微生物可形成单个菌落,用于微生物的分离,鉴定,计数,保管。粘液型菌落菌膜菌沉淀均匀浑浊对照固体培养基液体培养基半固体培养基菌落：细菌在固体培养基上定点繁殖时，形成孤立的、肉眼可见的堆积物。

表现：大小、形态、透明度、隆起度、度、湿润度，表面光滑、粗糙、有无光泽。

菌苔：许多菌落融合成一片。

1、有丰富的营养物质

2、PH、水分

3、均匀透明，易于观察。

4、经过灭菌和无菌检验细菌的生长表现培养基的基本要求菌落形态细菌菌落特征正面图细菌菌落特征剖面图1、倾注平皿接种法：做好平皿（带有培养基）将少量液体在待检材料中加入灭菌平皿中，均匀放入培养箱培养。例如：用于鲜奶、饮水、尿液。

2、平板划线培养法：无菌操作，用灭过菌的接种环取少量材料，然后在琼脂平板培养基表面划线。

3、斜面接种法：用灭过菌的接种环将菌体材料接种于琼脂斜面上使其生长。

例如：移植细菌、保存菌种。

4、穿刺接种法：用灭过菌的接种针挑取少量菌落或液体培养基，于中心穿入，距底零点3厘米-0.5厘米时，将针原路退出。例如：半固体培养基接种，

5、液体培养基接种法：用接种环取材料，插入盛有液体培养基的试管中二至三次摇动。细菌的接种培养平板划线培养法二细菌的一般检验方法

分离培养涂片镜检取可疑菌落病料鉴定试验和药敏试验动物接种免疫学诊断结果报告初染结晶紫媒染碘液脱色乙醇复染沙黄甲菌紫色（G＋）乙菌红色（G-）革兰氏染色步骤示意图细胞壁与革兰氏染色三主要病原细菌

革兰氏阳性杆菌（G+）革兰氏阴性杆菌G-)1、葡萄球菌：G+

（1）形态：呈球形，排列成堆，如葡萄状，无鞭毛、芽胞。金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。

（2）培养：在普通培养基上产生金黄色色素，致病性葡萄球菌在血液琼脂平板上形成明显的溶血环，MR试验阳性，致病性的葡萄球菌在厌氧条件下能分解甘露醇产酸。

金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧。最适生长温度37°C，最适生长pH7.4。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm.

（3）致病性与抵抗力

致病力主要是毒素和酶,所致的疾病为畜禽的化脓性疾病，如：创伤感染、脓肿、皮炎、乳房炎、败血症等。

抵抗力是在不形成芽胞的细菌中是最强的，80℃30分钟才被杀死，碳酸效果最好。

对青霉素、庆大霉素高度敏感。耐药菌株逐年增多。（4）检查：

根据病型采集病料，如取血液，乳汁，脓汁等直接镜检：分离培养与鉴定：血液琼脂平板，有无溶血，菌落的颜色，甘露醇发酵试验。

2、链球菌：G+

（1）形态：球形、卵圆形，呈链状排列，无芽胞、鞭毛，

（2）培养

根据链球菌在血液琼脂平板上的溶血现象分为三类：

1、甲型（α）溶血性链球菌：菌落周围有1～2毫米的草绿色溶血环，本类型致病力较弱。

2、乙型（β）溶血性链球菌：菌落周围形成2～4毫米的透明溶血环，致病力强。

3、丙型（r）链球菌：无溶血环，无致病性。

根据抗原构造分类：将乙型（β）溶血性链球菌分19个血清群。（3）致病性与抵抗力：产生多种酶和外毒素，不同的血清群的链球菌所致动物的疾病不同，引起急性败血症，肺炎，淋巴结脓肿，脓毒败血症。

本菌抵抗力不强，青霉素是首选药物。（4）检查根据不同的疾病，采集相应的病料，如取血液，乳汁，脓汁、渗出物等。

1、直接涂片镜检：链状排列的球菌。分离培养：病料接种于血液琼脂平板。链球菌的检验方法

3、多杀性巴氏杆菌G-

（1）形态：球杆菌，不形成芽胞，鞭毛，病畜的血液涂片或组织触片经美蓝或瑞氏染色呈两级浓染。

美蓝或瑞氏染色呈两级浓染（2）培养

在普通培养基上生长不旺盛，在加有血液或血清琼脂培养基上生长良好，培养24h形成灰白色、湿润、边缘整齐、表面光滑闪亮的露珠状小菌落。无溶血现象。（3）致病性与抵抗力

根据血清培养基上形成的菌落，可以分Fg型：对猪、牛、羊为强菌，对禽类毒力弱。Fo型：对禽类及兔强毒菌。常存在于畜禽的上呼吸道内，引起猪肺疫，禽霍乱等。抵抗力不强，一般消毒剂可杀灭。（4）检查镜检：病料触片，用美蓝或瑞氏染色，两极浓染。分离培养：血液琼脂平板上，有白色，不溶血小菌落。动物试验：4、炭疽杆菌G+

(1)形态：单个排列或呈短链状，相连的菌端平直而呈竹节状。无鞭毛，有芽孢、荚膜。

(2)培养炭疽杆菌为兼性需氧菌。在普通琼脂平板上生长呈灰白色，表面粗糙的菌落，边缘在低倍镜检查时呈卷发状。

(3)致病性与抵抗力：产生很强的炭疽毒素，引起皮肤水肿，中毒症状等。主要感染草食动物。有芽胞的抵抗力强，干燥下22年，20%漂白粉和5%碘酊是适用本菌芽胞的消毒药。

(4)检查：疑似炭疽病死动物尸体应严禁解剖

猪对炭疽的抵抗力较强。有的为咽部炭疽，咽喉部和附近淋巴结明显肿胀。5、大肠杆菌：大肠埃希氏菌G-（1）形态：中等大小，两端钝圆杆菌，无芽胞，周身鞭毛和菌毛。

(2)培养：在普通培养基上生长良好，伊红美兰琼脂平板上，形成紫黑色菌落，麦康凯培养基上形成红色菌落，分解乳糖，MR试验阳性，O（菌体）抗原，鞭毛（H）抗原，K（荚膜）抗原。

(3)致病性：仔猪黄痢、仔猪白痢；鸡引起心包炎、肺炎、输卵管炎、腹膜炎；犊牛、羔羊下痢、败血症。

在选择性培养基上比较好识别，以下是在SS培养基上的菌落特点

仔猪白痢：病猪排出的乳白色糊状粪便

仔猪黄痢：病猪排出的黄色稀便

六、沙门氏菌

（1）形态：与大肠杆菌相似，无芽胞，除鸡沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌无鞭毛外，其余都有。

（3）致病性与抵抗力

1、马流产沙门氏菌

2、猪霍乱沙门氏菌：仔猪副伤寒

3、鸡白痢沙门氏菌：20日龄以内，卵巢炎。

4、鸡伤寒沙门氏菌

破伤风梭菌猪丹毒杆菌G+

病毒2-1病毒的形态结构一病毒的发展

中国从公元十世纪宋真宗时代就有接种人痘预防天花的记载了。先后传至俄国、日本、朝鲜、土耳其及英国。1796英国医生琴纳（Jenner），才得出了结论，牛痘可能使人预防天花。法国人巴斯德（Pasteur）在1884年发明了狂犬疫苗。第一个记载的植物病毒病的是郁金香碎色病，据记载一个得病郁金香球茎竟能换来牛、猪、羊甚至成吨的谷物或上千磅的奶酪。细菌病毒--噬菌体的结构

二病毒的分类根据宿主的不同，有动物病毒、植物病毒、细菌病毒（噬菌体）和拟病毒（寄生在病毒中的病毒）等多种类型。病毒的基本类型名称基本特征（真）病毒至少含有蛋白质和核酸两类物质亚病毒类病毒含有具有单独侵染性的核糖核酸拟病毒只含有不具备侵染性的RNA

朊病毒没有核酸而有感染性的蛋白质颗粒三病毒的特点没有细胞结构只含有一种核酸（DNA或RNA）病毒的增值方式为复制病毒为严格的寄生生活病毒对抗菌素不敏感

四病毒的大小与形态

（一）大小：测量单位为NM，20—30NM

（二）形态：多为球形，有的呈砖形，丝状，子弹形。

有囊膜：砖形：痘病毒子弹形：狂犬病圆形

无囊膜：近似圆形：20面体立体对称圆柱形：螺旋对称

五病毒的结构与化学组成（一）核酸：即芯髓，既DNA或RNA，是病毒遗传的（二）衣壳：蛋白质，既有多肽链构成的壳粒组成。（三）囊膜：脂类、蛋白质构成的囊膜，是病毒通过宿主细胞膜或核膜时获得的。容易被脂溶剂如乙醚、氯仿和胆盐等溶解。对病毒起保护作用，并与病毒吸附有关。病毒的结构示意图核衣壳的对称形式A、螺旋对称型B、复合对称型C、二十面体立体对称型复合对称的代表－

－T偶数噬菌体二十面体对称的代表－－腺病毒螺旋对称的代表－－烟草花叶病毒七病毒的增殖

病毒的感染：只有当病毒与细胞相互作用，才能发挥生物活性，这种病毒与细胞相互作用。这种作用会出现两个结果：

1、溶解性相互作用

2、转化性相互作用病毒缺乏增殖所需要的酶系统，只能在活的宿主细胞内增殖（自我复制）。绝大多数病毒复制过可分为下列五阶段：吸附、侵入、脱壳、生物合成、组装和释放。吸附：非特异性吸附，特异性吸附、。侵入：细胞内吞、注射式侵入、膜融合。脱壳：有囊膜和无囊膜

生物合成：（1）mRNA转录与蛋白质合成（2）核酸复制。

装配与释放：装配、释放方式：

(1)破胞释放；

(2)芽生。病毒的复制吸附细胞吞饮脱壳（脱囊膜和衣壳）生物合成装配与释放吸附膜融合（囊膜脱去）脱壳（衣壳）生物合成装配与释放吸附注射式侵入（脱壳）生物合成装配与释放

经细胞膜内陷形成吞噬泡，使病毒粒子进入细胞质中，经蛋白酶的降解，先后脱去囊膜和衣壳。注射式侵入的噬菌体和某些直接侵入的病毒可以直接在细胞膜或细胞壁表面同步完成侵入和脱壳有包膜病毒侵入过程中病毒囊膜与细胞膜融合。其囊膜在与细胞膜融合时即已脱掉，核衣壳被移至脱壳部位并在酶的作用下进一步脱壳。

膜融合生物合成

病毒借助宿主细胞提供的原料、能量和场所合成核酸和蛋白质，期间所需的多数酶也来自宿主细胞。在病毒进入宿主细胞后生物合成阶段，胞浆中无病毒颗粒，称为隐蔽期。2-2病毒的其他特性与培养

干扰现象1、概念：两种病毒感染同一种细胞或机体时，常常发生一种病毒抑制另一种病毒复制的现象，称为干扰现象。2、病毒干扰的类型：自身干扰同种干扰异种干扰名词解释：缺陷型病毒：这是因为病毒基因组缺少一段特殊的RNA，干扰了病毒的复制，这种缺陷病毒又称缺陷性病毒粒颗，能干扰同种的正常病毒在细胞内的复制，如流感病毒。3、干扰现象发生的原因：（1）两种病毒感染都是需要细胞膜上同一受体。一种病毒感染后，由于阻断或破坏了细胞的受体部位，从而阻止了另一个病毒吸附或穿入。（2）一种病毒在细胞内复制时，已经启动了细胞的某种主要物质、关键性酶或有限的复制部位。（3）受病毒感染的宿主细胞产生了干扰素，可以抑制病毒复制。干扰素：是病毒作用于宿主细胞（病毒寄生的机体），诱导机体产生抑制病毒复制的蛋白质。病毒的滤过特性

病毒微小，能通过孔径为0.02微米的滤膜过滤器，细菌不能透过，可将病毒、细菌分开。

病毒的血凝现象

许多的病毒表面有血凝素，能与鸡、豚鼠的红细胞表面受体结合，而出现红细胞凝集现象，简称病毒的血凝现象。病毒的血凝现象是非特异性的。病毒的红细胞凝集抑制试验：病毒的血凝现象是非特异性的，当加入特异性抗病毒血清时，血凝素的作用被抑制，凝集现象即不会发生。其特异性很高。例如：用于诊断鸡的ND，流感，流行性乙型脑炎病毒的培养（一）动物接种：

病毒经注射、口服等途径进入易感动物的体内后可大量增殖，并使动物产生特定的反应。

优点：操作方面易行，经济。缺点：受机体免疫力的影响，常用无菌动物。

运用：分离、增殖病毒，疫苗效力试验，疫苗和抗血清的生产。（二）鸡胚培养：

一般用9至12日龄的鸡胚，分别接种于卵黄囊内，羊膜腔，尿囊腔等部位。

病毒生长的标志为鸡胚死亡、畸型和出血。用于病毒分离与疫苗生产。卵黄囊接种法羊膜腔接种法

鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内，生长后，鸡胚全身皮肤出现出血点，以脑后最显著。

（三）组织培养：在离体活细胞上培养病毒的方法

1、组织块培养：取组织片（如一段胎儿气管或一小块鼻黏膜）进行培养。

2、细胞培养：病毒感染细胞后，大多数引起细胞病变，称为病毒的致细胞病变作用。表现为细胞变形，胞浆内出现颗粒化，核浓缩、核裂解等。2-3病毒的一般诊断程序及主要动物病毒

病料的采取包涵体检查病毒的分离培养病毒的血清学试验动物接种鸡胚培养组织培养中和试验补体结合试验

病毒的红C凝集荧光抗体技术免疫酶标记技术免疫扩散试验一病毒的一般诊断程序（一）病料的采取常用于病毒分离的病料有血液、粪便、渗出液、脑脊液、水疱病、活检组织或尸检组织等。进行畜禽病毒性传染病的实验室诊断时，应注意以下几点：1、采集适宜的病料一般应采集病畜禽体内含病毒最多的器官或组织。2、注意采集病料的时间以症状刚出现时最佳。检查抗体时，则应采取一头病畜的发病初期和恢复期的血清，以便了解抗体滴度的消长程度。3、保存与运送病毒对外界因素特别是热很敏感。（1）必须将病料放在灭菌的保存液（50%甘油磷酸盐缓冲液）中。（2）液体病料可加适量的抗生素以防污染。（3）盛有病料的器皿应封口，再放入冰瓶内（内放冰块和食盐或干冰和酒精）。4、防止病料污染采集病料时，必须无菌操作。（1）为防止液体病料被污染，加入适量的青霉素和链霉素或其他抗生素，如庆大霉素；（2）若防止霉菌污染，可加霉菌素。

(3)供抗体检测的血清可加入防腐剂。（二）包涵体检查

不同类型的包涵体有些动物病毒于感染宿主细胞后，在胞核或细胞质内形成具有特殊染色特性的内含物，称为包涵体，如痘病毒的细胞质内包涵体和疱疹病毒的胞核内包涵体。这些包涵体有的是由未成熟或成熟的病毒粒构成，有的是宿主细胞的反应产物，有的是两者的混合物。有些昆虫病毒的病毒粒包埋在蛋白基质中，形成包涵体如核型多角体病毒。（三）病毒的分离培养（3种）（四）病毒的血清学试验（1）中和试验应用的原则有两种，一是可用已知抗原检查末知抗体。二是用已知抗体鉴定末知病毒。（2）补体结合试验常用已知的病毒抗原测定动物体内有无相应的抗体，以对某些传染病做出诊断。如用于诊断马流行性乙型脑炎和马传染性贫血等。（3）病毒的红细胞凝集和红细胞凝集抑制试验用已知的抗血清鉴定病毒。可用于诊断鸡新城疫、流行性乙型脑炎、流感、减蛋综合征等。用已知的病毒测定被检动物血清中抗体情况。可用于监测鸡群对新城疫等病的免疫状况及发病情况。（4）荧光抗体技术荧光抗体技术能较快地测出少量抗原或抗体在细胞内或组织内的分布，也是测定血清抗体的一种比较敏感的方法。已用于口蹄疫、马传贫、狂犬病、猪瘟、猪水疱病、猪传染性胃肠炎等的诊断。（5）免疫酶标技术免疫酶标技术是目前比较先进的诊断技术，它具有敏感性高的特点。现已广泛应用于牛腹泻病毒、猪瘟病毒、鸡新城疫病毒和流感病毒等的检查以用法医鉴定。（6）免疫扩散试验用已知抗体鉴定病毒，或用已病毒抗原检查待检血清中的相应抗体。常用于诊断马传贫、鸡马立克氏病、鸡传染必法氏囊病、鸡白血病、伪狂犬病、小鹅瘟、禽流感等。二主要动物病毒口蹄疫病毒（1）病毒的主要特性属于微核糖核酸病毒科，口蹄疫病毒属，单股RNA，呈20面体对称，近似球形，无囊膜，有七个血清学主型，每个主型又有若干个亚型，70多亚型。各主型之间无交互免疫力。本病毒是已知最小的动物RNA病毒。（2）病原性与抵抗力病原性：干扰能力强，偶蹄兽如牛、羊、猪、骆驼、鹿等动物的口腔、蹄部位发生水泡。抵抗力：不耐高温，易灭活，常用消毒方法1%NaOH来消毒车、船等运输工具或饲槽等用具。（3）检查

取水疱皮和水疱液，以补体结合反应和中和试验来检验，各主型口蹄疫病毒不能交叉免疫，必须确定其血清型才能用同型疫苗免疫。在唇内面、齿龈、舌面和颊部粘膜发生蚕豆至核桃大的水疱病猪以蹄部疱为主要特征，主要症状是跛行

严格封死疫点，捕杀病畜及同群畜狂犬病病毒（一）主要特性：属于弹状病毒科，狂犬病病毒属。单股RNA，弹状病毒，具有囊膜，感染动物的脑组织细胞浆内可见到包涵体。内基氏小体，呈圆形或卵圆形，染色后呈嗜酸性反应。（二）病原性与抵抗力病原性：侵害动物神经系统、能引起人和各种家畜的神经兴奋，意识障碍，麻痹和死亡。Ｖ存在于神经系统与唾液中，经咬伤而直接传播。抵抗力：56℃经30min即可灭活病毒。0.1%升汞、1%来苏儿等均可迅速使其灭活。（三）检查1、内基氏小体检查2、动物接种3、荧光抗体检查4、病毒分离猪瘟病毒（一）主要特性属于黄病毒科，瘟疫病毒属，单股RNA，病毒呈球形，核衣壳呈20面体对称，有囊膜。野毒株的毒力变化很大，强毒株急性疾病、中等毒力引起亚急性和慢性。（二）病原性与抵抗力病原性：感染慢性温和性猪瘟，会导致生长阻滞和发育不全，最后死亡。妊娠母猪感染中、低毒力毒株后会引起以繁殖障碍为主要症状的“带毒母猪综合症”，引起先天性流产，木乃伊胎、弱胎和产出仔猪颤抖症。抵抗力：猪瘟病毒抵抗力较强72∽76℃1h、1%∽2%烧碱或石灰水15∽60min才能杀灭病毒,对对紫外线和0.5%石炭酸溶液抵抗力较强。（三）检查临床实验室：冰冻切片直接荧光抗体：常用扁桃体，应注意区别是否感染ELISA：猪传染性胃肠炎（一）主要特性

属冠状病毒科、冠状病毒属、单股RNA病毒。二病原性与抵抗力病原性：猪，2周以内仔猪死亡率高，架子猪、成猪一般的良性经过。犬、猫可发病。抵抗力：病毒对乙醚敏感，但耐酸、乃胰蛋白酶，在低温下极为稳定。（三）检查1、细胞培养2、中和试验3、荧光抗体检查：空肠、回肠粘膜刮取物或空肠、回肠制备冷冻切片、直接或间接IF染色。4、动物试验

免疫概述免疫：机体识别自我物质和排除异己物质的复杂的生物学反应，是动物在长期进化中所形成的一种保护性生理功能。

基本功能：

1、免疫防御：病原微生物侵入时，机体的防御机制，消灭病原微生物，防止感染。

2、自身稳定：指免疫具有清除体内衰老或损伤的组织细胞，维持正常的机体内环境。

3、免疫监视：指免疫具监视体内肿瘤细胞的出现，并在其尚未发展之前将其歼灭。一、免疫学的发展简历

(一)经验免疫学时期：

11世纪——18世纪，积累了大量的免疫学知识。如：观察到很多传染病，其康复后，很少再患同一类疾病。我国民间医学家创立了预防天花的种痘法，应用良好天花患者的干燥痂皮制成粉末进行吹鼻免疫接种。引用强毒接种，具有很大危险性。1798年英国医生琴纳受到挤奶女工大多不感染天花，创立了牛痘脓疮制成预防天花的接种方法，宣告了免疫学的诞生。

（二）实验免疫学时期：18世纪—20世纪初，

提出了“细胞免疫学说”“体液免疫学说”补体等。

（三）免疫学的飞跃期：20世纪以后，免疫化学，

免疫血清学，分子免疫学等。二非特异性免疫

（一）

屏障结构

（二）吞噬细胞

（三）体液中的杀菌因素

（一）屏障结构：

1、皮肤和黏膜屏障：结构完整的皮肤和黏膜能阻挡大多数病原微生物的侵入，汗腺分泌的乳酸，泪液，唾液等都有抑菌和杀菌作用。

2、血脑屏障：由脑毛细血管壁、软脑膜和胶质细胞等组成，防止中枢神经系统感染的重要防卫机构。

3、胎盘屏障：防止母体内的多种病原微生物通过胎盘感染胎儿，但猪瘟、布氏杆菌感染母畜后能经胎盘感染胎儿。（二）吞噬细胞

1、吞噬细胞：

（1）小吞噬细胞：血液中以嗜中性粒细胞为代表，具有高度移行性和非特异性吞噬功能。嗜酸性粒细胞具吞噬作用，抗寄生虫感染，过敏反应。

（2）大吞噬细胞：属于单核吞噬细胞系统。包括血液中的单核细胞及单核细胞移行至各组织的多种巨嗜细胞。如：肺脏中的尘细胞，肝脏中的枯否氏细胞，皮肤和结缔组织中的组织细胞，骨组织中的破骨细胞，神经组织中的小胶质细胞等。

2、吞噬细胞的吞噬、杀菌过程：

吞噬细胞与病原菌接触后，能伸出伪足将其包围，吞入细胞浆内形成吞噬体，吞噬体向溶酶体靠近，融合成吞噬溶酶体，溶酶体扩散后，消化和破坏异物。

3、吞噬的结果：

（1）完全吞噬：动物整体抵抗力和吞噬细胞的功能较强，病原微生物被杀灭，消化后连同溶酶体内容物残渣排出细胞外。

（2）不完全吞噬：有些病原菌（结核，布菌，病毒）不被杀灭，反而可在吞噬细胞内生长、繁殖，随吞噬细胞的游走而扩散，引起更广泛的感染。图二：（三）正常体液中的杀菌灭毒因素。

1、补体系统：

（1）概念：正常人和动物血清中存在的一类与免疫有关的具有酶活性的球蛋白。它们可辅助特异性抗体的作用，是抗体发挥作用的必要补充条件，故称为补体。

（2）生物学特性：正常情况下，补体没有活性，只有在抗原抗体复合物及其他激活因子作用下激活。使细菌细胞发生溶解，起到杀菌溶菌、溶血作用。也可增强抗体对病毒的中和作用。

2、溶菌酶：单核细胞和巨噬细胞产生的碱性蛋白酶，分布于唾液、泪液、鼻液、血清、乳汁中，杀灭G+，与补体一起杀灭G-。二、影响非特异性免疫的因素：

1、遗传（种属）因素：不同种或不同品种的动物，对病原微生物的易感性和免疫反应性有差异。如：炭疽感染草食动物，家禽无感受性。马不感染牛瘟等。

2、年龄因素：不同年龄对病原微生物的易感性和免疫反应性不同。幼龄易感。而布病感染性成熟的。老年防御能力降低，易发生肿瘤与反复感染。

3、环境因素：气候、温度、湿度等。如：寒冷使呼吸道黏膜抗力下降。VA缺黏膜发病。加强饲养管理，可增强非特异性免疫能力。

三特异性免疫

(一）免疫器官与免疫细胞（二）抗原（三）免疫应答（四）免疫应答中的效应物质（五）特异性免疫的抗感染作用

一．免疫器官

☻中枢免疫器官

——免疫细胞产生与成熟场所（一）

骨髓长骨髓源生各种免疫细胞。哺乳动物B细胞成熟，直接进行免疫应答，产生大量抗体，约占40%。（二）

胸腺诱导淋巴干细胞成熟T细胞（三）

禽法氏囊诱导淋巴干细胞成熟为B细胞

外周免疫器官

——免疫细胞分布及进行免疫应答的场所（一）淋巴结皮质区：B细胞25%副皮质区：T细胞75%髓质区：巨噬细胞(Mφ)、树突状细胞(DC)作用：对淋巴液来的抗原（注射的疫苗）进行免疫应答

（二）脾脏(spleen)

白髓淋巴鞘——T细胞25%

脾小结——B细胞65%

红髓巨噬细胞(Mφ)、树突状细胞(DC)

作用对来自血液的抗原进行免疫应答，主要产生抗体

二、抗原1、概念

2、构成抗原的条件异物性大分子物质一定的化学组成与结构

3、抗原的特异性与交叉性

4、抗原类型：(1)完全抗原和不完全抗原

(2)胸腺依赖性抗原和胸腺非依赖性抗原

(3)天然抗原和人工抗原

(4)微生物抗原支持☻完全抗原免疫原性物质（细菌）机体免疫细胞免疫产物

（效应细胞、抗体）+物质特异反应

反应原性

不完全抗原（半抗原）

物质(激素)+蛋白载体机体免疫细胞免疫产物

（抗体）+物质特异反应

☻完全抗原（免疫原）的基本条件异物性，大分子，化学组成、结构复杂一．异物性亲缘关系越远的物质，免疫性越强自身物质可以形成“天然免疫耐受”自身物质结构、成分改变后成为“自身抗原”自身也有一些“隐蔽抗原”——眼球晶体、精子、甲状腺等蛋白二．大分子通常在10000dal以上三．化学组成、结构复杂明胶蛋白分子量10万dal，但免疫原性差

—因是直链AA组成胰岛素只有5734dal，但免疫原性好—因组成、结构复杂凡含有苯环、杂环AA和糖的蛋白，结构都较复杂，免疫原性好三、免疫应答（一）免疫应答的概念。（二）免疫应答的基本过程：识别阶段

增殖阶段

效应阶段（三）体液免疫应答：1、概念2、基本过程：B细胞在抗原的刺激下分化为浆细胞，浆细胞进一步分化成抗体，抗体和抗原结合将抗原清除。（四）细胞免疫应答：1、概念2、基本过程：T细胞在抗原的刺激下分化为淋巴因子，淋巴因子与抗原结合，将抗原清除。

四、免疫应答中的效应物质（一）抗体：1、概念：B细胞受抗原刺激后产生的能与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。

2、免疫球蛋白结构：Y字型结构，三个功能区铰链区恒定区可变区抗体3、各类免疫球蛋白的特性与功能：（1）免疫球蛋白G：它占整个免疫球蛋白70-80%，抗感染的主力，持续时间长。（2）免疫球蛋白M：10%，体液免疫反应出现最早.（3）免疫球蛋白A：血清型免疫球蛋白A：分泌型免疫球蛋白A：（4）免疫球蛋白E：参与一型变态反应，抗寄生虫感染。（5）免疫球蛋白D:

4、抗体产生的一般规律：（1）初次应答：抗原第一次进入机体后,要经过较长的诱导期才出现抗体，低，时间短，

（2）再次应答：初次应答后，抗体降低，用同种抗原再次免疫机体时，诱导期显著缩短，抗体含量达到几倍、几十倍，时间延长。

4、影响抗体产生的因素：

（1）抗原方面：

a、抗原的性质：活病毒进入机体后2-3天出现抗体，活细菌需5-7天，类毒素需2-3周。

B、抗原的用量、次数与间隔时间：

c、免疫途径：注射、滴鼻、点眼、吸入、刺种等。

D、佐剂的作用：增强抗原的免疫原性。如：明矾、氢氧化铝、磷酸钙、磷酸铝等。

（2）机体方面：*先天和后天性免疫缺陷

*动物的年龄、品种、营养状况等。

5、单克隆抗体：

#克隆：指由一个细胞无性增殖而来的细胞群体。#B细胞克隆：由一个B细胞增殖而来的B细胞群体为—。#单克隆抗体：由一个B细胞分化增殖的子代细胞（浆细胞）产生的针对单一抗原决定簇的抗体。

6、免疫球蛋白的抗原性：免疫球蛋白结构复杂，分子量大，对另一动物说构成抗原。如：一种动物抗体免疫异种动物，获得抗这种抗体的抗体，即Ig的抗抗体。（二）细胞因子：主要由激活的淋巴细胞所产生的除抗体以外的免疫效应分子。包括淋巴因子和白细胞介素。1、淋巴因子：指T细胞被抗原激活后产生的非抗体，非补体的具有多种生物学活性的蛋白质分子。包括：

#移动抑制因子（MIF）#特意性巨噬细胞武装因子（SMAF）

#巨噬细胞趋化因子（MCF）#粒细胞淋巴毒素（LT）

#促有丝分裂因子（MF）#转移因子（TF）

#皮肤反应因子（SRF）2、白细胞介素：IL，在白细胞间发挥作用的一些糖蛋白分子。18种，由B、T细胞、单核巨噬细胞产生。增强细胞免疫与体液免疫的功能。五、特异性免疫的抗感染作用：（一）体液免疫的抗感染：

1中和作用2抗吸附作用3调理作用4免疫溶解作用

5、抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用（二）细胞免疫的抗感染作用：

1、抗细菌感染：

T细胞致敏释放淋巴因子促进巨噬细胞，使细胞内寄生菌杀灭

2、抗病毒感染：

T细胞直接杀死病毒，T细胞释放淋巴因子杀死病毒，致敏T细胞增强巨噬细胞吞噬作用，杀灭病毒

变态反应变态反应定义：以被致敏的机体再次接触相应变应原（抗原）后所发生的一种异常或病理性的免疫反应，主要表现为机体的生理功能紊乱或组织细胞损伤，又称变态反应或过敏反应。基本特点：引起超敏反应的变应原种类繁多，这种反应具有免疫学反应的特异性和记忆性的特征，可涉及细胞和体液免疫的整个过程，但以某一种类型的反应为主。分型：常分为四型，即I、II、III和IV型，又分别称为速发型、细胞毒型、免疫复合物型和迟发型超敏反应，其中前三型均由体液免疫介导，第IV型由细胞免疫介导。

Ⅰ型变态反应主要特点：1.发生快、消退快，一般不易造成组织细胞的损伤，多表现为功能的紊乱；2.参与的抗体为IgE和IgG4，参与的细胞为肥大细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞等；3.补体不直接参与其反应；4.有明显的个体差异和遗传倾向；5.可经血清被动转移。参与的细胞嗜酸性粒细胞：通过1)直接吞噬、破坏肥大细胞等脱出的颗粒；2)释放组胺酶灭活组胺；3)释放芳基硫酸酯酶灭活白三烯；4)释放磷酯酶D灭活血小板活化引子，从而对Ⅰ型超敏反应有负反馈调节作用嗜碱性粒细胞：同肥大细胞一样，其表面有大量的FcR，胞浆内有含多种生物活性介质的大量嗜碱性颗粒。当IgE与其FcR结合形成“桥联”后可导致细胞脱颗粒，释放出生物活性介质而引起过敏反应。参与的抗体抗体与受体结合导致细胞脱颗粒Ⅰ型超敏反应的发生过程和机制机体致敏阶段：变应原初次进入机体后，刺激机体的B细胞产生特异性IgE/IgG4抗体，这些抗体同肥大/嗜碱性粒细胞表面的FcR结合，形成致敏的肥大/嗜碱性粒细胞，这种致敏状态可维持半年至数年。发敏阶段：机体再次接触相同的变应原后，可迅速同结合在肥大/嗜碱性粒细胞表面FcR上的紧密相连的IgE/IgG4抗体形成“桥联”结合，使肥大/嗜碱性粒细胞脱颗粒，释放出胞内的生物活性介质，引起过敏反应。触发肥大细胞脱颗粒的几种方式I型超敏反应的基本过程Ⅰ型超敏反应的早期相和晚期相反应急性过敏反应的常见疾病：过敏性休克：以青霉素等药物和再次使用抗毒素血清时容易出现；其它如过敏性哮喘、过敏性鼻炎；过敏性肠炎和特应性皮肤超敏反应等也常出现。防治原则预防原则：

1.查明变应原并避免接触；

2.特异性脱敏治疗：短期内进行小剂量、多次注射特异性变应原进行脱敏治疗；

3.减敏疗法：采用多次、少量、长间隔（5~7天）皮下注射特异性必要性进行减敏治疗；药物治疗：

1.抑制活性介质释放的药物：

2.生物活性介质拮抗药：

3.改善器官反应性的药物：

4.某些调节免疫反应的中药Ⅱ型超敏反应（细胞毒型）特点：1.IgG、IgM类抗体直接作用于细胞表面的抗原或半抗原；2.激活补体系统、单核吞噬细胞及其它细胞参与造成细胞损伤和溶解。发生机制：1.受攻击靶细胞表面的抗原：存在于自身正常细胞的表面成分、结合于正常细胞表面的半抗原等；2.细胞损伤机制：1)抗原-抗体复合物经经典途径激活补体系统，靠补体的攻膜复合体杀伤细胞；2)对体内游离并结合IgG抗体的血细胞，通过位于单核吞噬细胞表面的FcR，或C3bR的介导产生调理吞噬作用；3)对固定的组织细胞，在特异性IgG的介导下，具有FcR的NK细胞参与下产生ADCC效应而杀伤靶细胞。常见疾病：1.血型不合的输血反应：2.新生儿溶血症：见下图3.自身免疫性溶血性贫血：因感染或药物引起4.药物过敏性血小板减少症：5.链球菌感染后引起的肾炎：6.特殊的II型超敏反应－抗体刺激型：如桥本氏甲状腺炎等Ⅲ型超敏反应（免疫复合物型）特点：可溶性抗原与相应IgG、IgM类抗体结合形成可溶性复合物，沉积于全身或局部血管的基底膜，激活补体系统，吸引白细胞和血小板聚集，导致在复合物沉积部位出现一系列的炎症反应。常见病如初次接受一种动物抗血清治疗1~2周后出现的反应、链球菌感染后的肾小球肾炎、过敏性休克样反应等疾病。Ⅳ型超敏反应（迟发型）特点：致敏T细胞与相应致敏原作用而引起的以单个核细胞（巨噬细胞和淋巴细胞）浸润和细胞变性坏死为主要特征，其发生较慢（一般在抗原刺激后24~72h发生），与抗体和补体无关。发生机制：与常规的细胞免疫应答的过程和机制一样。常见病：如胞内寄生菌引起的感染、接触性皮炎、器官抑制排斥反应和某些自身免疫病等。

其它微生物一真菌真菌是一类有细胞壁结构、没有根茎叶分的异养型单细胞或多细胞真核微生物。能危害人和动植物，造成一些病害，称为病毒性真菌。

真菌的分类（一）分类：黏菌门真菌门鞭毛菌亚门接合菌亚门子囊菌亚门担子菌亚门半知菌亚门通常人为地把真菌区分为3大类。酵母菌霉菌蕈菌这些不是分类上的名词，但在应用上给人类带来很大的方便。（二）形态结构

1、酵母菌类单细胞菌体，有细胞壁、细胞膜、细胞质和细胞核四种结构。2、丝状菌类：（1）菌细结构（2）细胞结构（三）繁殖1、无性孢子2、有性孢子（四）培养

1、培养条件：20∽28℃，pH5.6∽5.8，需氧。2、分离方法：常用的有孢子分离法、组织分离法、基内菌分离法三种。3、培养特性：酵母菌的菌落有黏稠性，乳白色或奶油样；霉菌的菌落呈绒毛状、棉絮状或蜘蛛网状。（五）致病性及防治1、烟曲霉菌预防措施：定期对笼舍、用具进行福尔马林熏蒸消毒，保持禽舍干燥，禁止用发霉的饲料和垫草。2、黄曲霉菌防治措施：防止饲料发生霉变，禁止使用霉变饲料。3、甘薯黑斑病霉菌预防措施：加强对甘薯黑斑病的检疫和处理，禁止用病薯及其糟粕饲喂家畜。酵母菌酵母菌是一个通俗名称，一般泛指能发酵糖类的各种单细胞真菌。

一酵母菌的形态和构造大多数酵母菌为单细胞，一般呈卵圆形、圆形、圆柱形或柠檬形。有些酵母菌细胞与其子代细胞连在一起成为链状，称为假丝酵母。酵母菌无鞭毛，不能游动。酵母菌的细胞形态子细胞芽痕二酵母菌的繁殖方式

无性繁殖有性繁殖芽殖裂殖产无性孢子产子囊孢子三酵母菌的菌落特征酵母菌的菌落形态特征与细菌的相似，但较细菌菌落大而厚，较湿润，表面较光滑，多数黏稠且不透明，菌落颜色单调，多数呈乳白色，少数红色，个别黑色。酵母菌生长在固体培养基表面，容易用针挑起，菌落质地均匀，正、反面及中央与边缘的颜色一致。有些种因培养时间太长使菌落表面皱缩。酵母菌的菌落一般会散发出酒香味。凡是不产假菌丝的酵母菌，其菌落更为隆起，边缘极为圆整；然而会产生大量假菌丝的酵母菌，则其菌落较扁平，表面和边缘较粗糙。菌落的颜色、光泽、质地、表面和边缘特征，均为酵母菌菌种鉴定的依据。在液体培养基中有的长在培养基底部并产生沉淀；有的在培养基中均匀生长；有的在培养基表面生长并形成菌膜以上特征对分类也具有一定意义。

啤酒酵母的菌落

红酵母的菌落

各种酵母菌的菌落霉菌霉菌(mold)霉菌分属于鞭毛菌亚门、接合菌亚门、子囊菌亚门和半知菌亚门。霉菌通常是指那些菌丝体较发达又不产生大型肉质子实体结构的真菌。一霉菌的形态和构造（一）霉菌的菌丝霉菌营养体的基本单位是菌丝。

霉菌菌体均由分枝或不分枝的菌丝构成。许多菌丝交织在一起，称为菌丝体。

在固体培养基上，部分菌丝伸入培养基内吸收养料，称为营养菌丝；另一部分则向空中生长，称为气生菌丝。有的气生菌丝发育到一定阶段，分化成繁殖菌丝。霉菌的菌丝有两类：

1、无隔菌丝整个菌丝为长管状单细胞，细胞质内含有多个核。其生长过程只表现为菌丝的延长和细胞核的裂殖增多以及细胞质的增加。如根霉属、毛霉属、犁头霉属等低等真菌所具有。

2、有隔菌丝(多数)

菌丝由横隔膜分隔成成串多细胞，每个细胞内含有一个或多个细胞核。如：曲霉属和青霉属等高等真菌所具有。

有些菌丝，从外观看虽然像多细胞，但横隔膜上具有小孔，使细胞质和细胞核可以自由流通，而且每个细胞的功能也都相同。如青霉菌、曲霉菌、白地霉等绝大多数霉菌菌丝均属此类。无隔菌丝有隔菌丝霉菌的菌丝霉菌的繁殖方式无性繁殖有性繁殖节孢子厚垣孢子孢囊孢子分生孢子子囊孢子卵孢子接合孢子（一）霉菌的无性孢子

无性繁殖是指不经过两性细胞结合而直接由菌丝分化形成孢子的过程，所产生的孢子叫无性孢子。常见的有孢囊孢子、分生孢子、厚垣孢子和节孢子，此外还有游动孢子、芽孢子、掷孢子。分生孢子节孢子（二）霉菌的有性孢子

有性繁殖是不同性别细胞结合后，经质配、核配、减数分裂形成孢子的过程，而产生的孢子称为有性孢子。在霉菌中，有性繁殖不及无性繁殖普遍，仅发生于特定条件下，一般培养基上不常出现。霉菌的有性孢子主要有：卵孢子、接合孢子、子囊孢子。

卵孢子子囊孢子三霉菌的菌落特征

由于霉菌的菌丝较粗而长，因而霉菌的菌落较大，有的霉菌的菌丝蔓延，没有局限性，其菌落可扩展到整个培养皿，有的种则有一定的局限性，直径1～2cm或更小。菌落质地一般比放线菌疏松，外观干燥，不透明，呈现或紧或松的蛛网状、绒毛状或棉絮状；菌落与培养基的连接紧密，不易挑取；菌落正反面的颜色和边缘与中心的颜色常不一致。同一种霉菌，在不同成分的培养基上形成的菌落特征可能有变化。但各种霉菌，在一定培养基上形成的菌落大小、形状、颜色等却相对稳定。故菌落特征也是鉴定霉菌的重要依据之一。

各种类型的子囊孢子红曲霉的菌落形态各种曲霉的菌落微生物类别菌落特征单细胞微生物菌丝状微生物细菌酵母菌放线菌霉菌主要特征菌落含水情况很湿或较湿较湿干燥或较干燥干燥外观特征小而突起或大而平坦大而突起小而紧密大而疏松或大而致密参考特征菌落透明度透明或稍透明稍透明不透明不透明菌落与培养基结合度不结合不结合牢固结合较牢固结合菌落的颜色多样单调十分多样十分多样菌落正反面颜色差别相同相同一般不同一般不同细胞生长速度一般很快较快慢一般较快气味一般有臭味多带酒香常有泥腥味霉味四大类微生物的细胞形态和菌落特征的比较放线菌放线菌是一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物。与细菌十分接近，几乎都呈革兰氏阳性。因菌落呈放射状而得名。放线菌最突出的特性之一是能产生大量的、种类繁多的抗生素。全世界共发现4，000多种抗生素，其中绝大多数由放线菌产生。有的放线菌还用于生产维生素、酶制剂、烃类发酵、污水处理等方面。

一放线菌的形态放线菌的形态比细菌复杂些，但仍属于单细胞。在显微镜下，放线菌呈分枝丝状，我们把这些细丝一样的结构叫做菌丝。菌丝无隔膜，直径与细菌相似，小于1微米,呈多核的单细胞状态。放线菌菌落的横界面孢子丝气生菌丝琼脂表面基内菌丝放线菌在固体培养基上形成与细菌不同的菌落特征：放线菌菌丝相互交错缠绕形成质地致密的小菌落，干燥、不透明、菌落和培养基的连接紧密，难以挑取，当大量孢子覆盖于菌落表面时，就形成表面为粉末状或颗粒状的典型放线菌菌落，由于基内菌丝和孢子常有颜色，使得菌落的正反面颜色常不一致，在菌落边缘的琼脂平面有变形的现象。放线菌的菌落特征放线菌的菌落特征

A：诺尔斯氏链霉菌B：皮疽诺卡氏菌C：酒红指孢囊菌D：游动放线菌E：小单胞菌F：皱双孢马杜拉放线菌

产抗菌素的放线菌的菌落特征

A：卡特利链霉菌B：弗氏链霉菌C：吸水链霉菌金泪亚种D：卡那霉素链霉菌E：除虫链霉菌F：生磺酸链霉菌

放线菌主要通过形成无性孢子方式进行繁殖，成熟的分生孢子或孢囊孢子散落在适宜环境里发芽形成新的菌丝体。二、放线菌的繁殖从土壤中分离的放线菌放线菌与畜禽关系较大的属一、分枝杆菌属引起人和畜禽的结核病。二、放线菌属引起牛放线菌病。支原体一、形态与染色：无细胞壁，基本形态为球状、杆状和丝状，尚有梨状、分枝状、环状、螺旋状等不规则形状。革兰氏染色阴性；姬姆萨染色，呈淡黄色。二、增殖与培养：以二分裂为主,也可出芽增殖。三、抵抗力：对一般消毒剂较敏感；对醋酸铊、结晶紫、亚硝酸盐有较强的抵抗力；对抗生素敏感。四、致病性和防治：多为寄生性，寄生于多种动物呼吸道、泌尿生殖道、消化道黏膜以及乳腺关节等处，导致人和畜禽患病；加强综合防治措施，治疗可选用敏感

螺旋体

是一类细长、柔软、螺旋状、运动活泼的原核细胞型微生物。一、形态结构与染色：呈螺旋状或波浪形，有一个或多个完整的螺旋，均体大小极为悬殊。革兰氏染色阴性。二、培养特性：有的为严格厌氧，有的为严格需氧。三、致病性及防治：大部分为非致病性；目前尚无有效疫苗预防钩端螺旋体，治疗可选广谱抗生素。黄疸出血热群钩端螺旋体立克次氏体专性寄生、二分裂繁殖与节肢动物关系密切，寄生在吸血节肢动物体内，或为寄生宿主、或为储存宿主、或同时为传播媒介多形态，革兰染色阴性，大小介于细菌和病毒之间大多是人兽共患病的病原体对多种抗生素敏感

衣原体与人类关系较大的有鹦鹉衣原体和沙眼衣原体。一、概述：呈球形。为严格细胞内寄生的微生物，必须用活细胞培养；对外界环境抵抗力弱。二、致病性和防治：鹦鹉衣原体可致人和畜禽的多种疾病；沙眼衣原体可引起人的沙眼、新生儿肺炎、泌尿生殖道感染。

微生物与外界环境一、自然界中的微生物的分布：(一)土壤中的微生物：10-20cm的土壤中微生物最多。（表层，4-5米深层几乎无）大多为有益的，少数为病原微生物（来自患病动物的尸体、粪便、排泄物等）（二）水中的微生物：1、水中细菌总数：1ML水样中的细菌菌落总数。（我国〈100/ML〉2、水中大肠菌群数：每1000ML水样中含有大肠菌群数的最近似数来表示。（我国〈3个/1000ML〉。（三）空气中的微生物：

二、动物体的微生物：（一）正常菌群：存在于动物体与外界相通的部位，在正常情况下，对机体无害。补充：保持消化道微生物正常菌群的重要性：

1、维持家畜的正常消化代谢，维持器官的正常生理机能。

2、形成局部保护膜

3、合成动物必需的营养物质。（导致：长期口服抗生素，引起菌群失调，反刍动物采食含糖、蛋白质过多的饲料，使瘤胃正常微生物区系改变，导致前胃疾病（二）无菌动物和无特定病原体动物：

1、无菌动物：GF，用无菌操作从母体取出未接触微生物的健康胎儿，专门在室内无微生物的环境中养育而成。GF动物的体表和体内不含任何微生物。

2、无特定病原体动物：SPF，含有特定病原体以外的一般微生物，而不含特定种类的微生物的动物。

杀菌灭菌：彻底杀灭（一切微生物）杀灭法溶菌消毒：部分杀灭（仅杀灭病原菌）控制有害菌的措施防腐：抑制霉腐微生物抑制法化疗：抑制寄主体内的病原菌一几个基本概念

灭菌（sterilition）

：采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。消毒(disinfection)

：采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体或动、植物有害的病原菌。而对被消毒的对象基本无害的措施。

防腐(antisepsis)：利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，即通过制菌作用防止食品、生物制品等对象发生霉腐的措施。化疗(chemotherapy)：利用具有高度选择毒力即对病原菌具高度毒力而对其宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖，借以达到治疗该宿主传染病的一种措施。物理因素对微生物的影响高温灭菌（重点介绍）低温抑菌辐射干燥和渗透压过滤除菌超声波

高温灭菌

干热灭菌法热空气灭菌法高温灭菌火焰灭菌法煮沸消毒法流通蒸汽灭菌法湿热灭菌法间歇灭菌法巴氏消毒法连续加压灭菌法

湿热灭菌效果比干热灭菌效果好火焰灭菌法此法灭菌彻底，迅速简便，但使用范围有限。常用于接种工具、污染物品以及实验动物尸体等废弃物的处理。热空气灭菌法主要在干燥箱中利用热空气进行灭菌。通常160℃处理1～2h便可达到灭菌的目的。如果被处理物传热性差、体积较大或堆积过挤时，需适当延长时间。此法只适用于玻璃器皿、金属用具等耐热物品的灭菌。其优点是可保持物品干燥。★湿热消毒、灭菌法：湿热的穿透力强。杀灭微生物速度快，比干热灭菌的效果好。★煮沸法：煮沸10-20MIN可杀灭绝大多数细菌的繁殖体，水中加入2-5%石炭酸，能增强杀菌力。水中加入1%碳酸钠，增强杀菌力。同时减缓金属氧化，防锈作用。如：刀、剪、注射器、针头的消毒。★间歇灭菌法：经第一次流通蒸汽灭菌后的物品放于室温或37度温箱过夜，使芽孢发育成繁殖体，再用同样的方法进行灭菌。如此连续3次，即可保证杀灭全部细菌和芽孢。这种灭菌法，称为--。用于不耐高温的某些培养基的灭菌。★巴氏消毒法：是利用不太高的温度杀死食品中的病原菌或一般杂菌，同时又不致严重损害其质量的消毒方法。用于牛奶、酒类的消毒。如：加温63度消毒牛奶30MIN或72度、20MIN。85-90度，10S。杀死非芽孢的病原菌。超高温巴氏灭菌法，132度，1-2S。★高压蒸汽灭菌法：用高压蒸汽灭菌器进行。在密闭的情况下加热，产生蒸汽不能外溢，器内压力持续增高，温度也升高，杀菌力增强。温度121.3度，20-30MIN，压力0.105MP。凡是耐高温，不怕潮湿的物品。如：外科手术器械，生理盐水，玻璃器皿，普通培养皿等。高压蒸汽灭菌(normalautoclvi