药分课件上药第六章芳酸类

第六章芳酸类非甾体抗炎药物的分析

AnalysisofAromaticcarboxylicacids&esters一类不含甾体骨架的抗炎药代表：阿司匹林（1898）、对乙酰氨基酚、吲哚美辛、萘普生、萘普酮、双氯芬酸、布洛芬、尼美舒利、罗非昔布、塞来昔布等，药理作用：具有抗炎、抗风湿、止痛、退热和抗凝血等作用，在临床上广泛用于骨关节炎、类风湿性关节炎、多种发热和各种疼痛症状的缓解。非甾体抗炎药（NonsteroidalAntiinflammatoryDrugs，NSAIDs）结构特点化学结构中含有芳酸或其酯羧基直接与苯环相连使芳酸的酸性强度各有不同本章重点掌握水杨酸类，苯甲酸类药物的化学结构；掌握苯甲酸钠，阿司匹林及其制剂的鉴别、含量测定掌握阿司匹林中特殊杂质的项目、来源及检查方法了解其它芳酸类药物的结构、鉴别含量测定方法进一步了解体内药物分析第一节典型芳酸类非甾体抗炎药物的结构与性质可呈游离状态水杨酸、阿司匹林

具有羧基可呈盐或呈酯双氯芬酸钠可呈酰胺结构吡罗昔康

具有苯环有不同的结构特征

有硫、氯、氟等元素，也可作为鉴别的依据

一、典型药物与结构特点

1、苯甲酸类阿司匹林

水杨酸钠1结构：羧基和苯环直接相连决定了酸性较强的特征。2苯环及其取代基，具有特征的紫外和红外吸收光谱，可用于鉴别和含量测定。代表性药物水杨酸类结构特点：羧基和苯环不直接相连。与前两类相比酸性较弱。邻氨基苯甲酸苯乙酸甲芬那酸双氯芬酸钠代表性药物结构特点：羧基和苯环不直接相连，酸性较弱。邻芳基苯丙酸布洛芬（芬必得）代表性药物吲哚乙酸类吲哚美辛苯骈噻嗪甲酸类吡罗昔康其他非甾体抗炎药对乙酰氨基酚二、主要理化性质（一）物理性质（1）固体具有一定的熔点（2）溶解性游离芳酸类药物几乎不溶于水，易溶于有机溶剂；芳酸碱金属盐及其它盐易溶于水，难溶于有机溶剂。（二）化学性质酸性：芳酸具游离羧基，呈酸性，其pKa在3～6之间，属中等强度的酸或弱酸

—X、—NO2、—OH等吸电子取代基存在使酸性增强

—CH3、—NH2等斥电子取代基存在使酸性减弱分子内氢健，酸性大为增强

pKa=2.952、水解性具有酯键：阿司匹林、双水杨酯具有酰胺键：吲哚美辛、吡罗昔康、对乙酰氨基酚◆利用其水解得到酸和醇的性质可进行鉴别◆利用酯水解定量消耗氢氧化钠的性质，可用水解后剩余滴定法测定含量◆芳酸类药物还应检查因水解而引入的特殊杂质

3.UV：具有苯环，所以具有紫外吸收。吸收带E1带：

*184nm(

＞10000)E2带：

*203nm(

≈7400)B带：

*254nm(≈200)苯在环己烷中的紫外吸收光谱

4.IR：具有苯环，所以具有紫外吸收。乙苯的红外光谱图苯环的=C-H伸缩振动烷基-C-H伸缩振动苯环的骨架振动1600~1450cm-1苯环上取代基弯曲振动5.基团或元素特性：对乙酰氨基酚的酚羟基酮洛芬的二苯甲酮与苯肼缩合显色美洛昔康中的硫元素显色反应沉淀反应红外紫外吸收色谱法第二节鉴别试验第二节鉴别试验一、FeCl3反应紫堇色配合物1.水杨酸反应++反应适宜条件：

反应溶液pH4~6(强酸易使配合物分解)反应宜在稀溶液中进行一、三氯化铁反应（显色反应）水杨酸反应药物试验方法结果水杨酸水溶液紫堇色阿司匹林加热水解后反应紫堇色双水杨酯氢氧化钠试液中煮沸紫色二氟尼柳溶于乙醇深紫色2、酚羟基反应对乙酰氨基酚水溶液蓝紫色吡罗昔康三氯甲烷溶液玫瑰红色美洛昔康三氯甲烷溶液淡紫红色

酮洛芬

具有二苯甲酮结构，酸性条件下与二硝基苯肼缩合生成橙色偶氮化合物二、缩合反应三、重氮化－耦合反应（芳香伯胺类的特征鉴别反应）对氨基水杨酸钠具有芳伯胺基结构，在盐酸酸性溶液中，与亚硝酸钠试液发生重氮化反应，生成重氮盐，与碱性β-萘酚偶合产生橙红色沉淀。橙黄～猩红色-

对乙酰氨基酚的鉴别（间接）三、氧化反应甲芬那酸＋H2SO4

深蓝色△黄色并产生绿色荧光随即变为棕绿色四、氧化反应四、水解反应阿司匹林五、水解反应六、紫外分光光度法1.最大吸收波长法：丙磺舒(20μg/ml,95%乙醇溶液)

λmax=225nm,249nm;A249nm≈0.67最大2.吸光度法：甲酚那酸(20μg/ml,1mol/L盐酸-甲醇1:99)

λmax=279nm,350nm;A279nm≈0.69~0.74,A350nm≈0.56~0.604.吸收度比值法：二氟尼柳(20μg/ml,0.1mol/L盐酸

乙醇)

λmax1=251nm;

λmax2=315nm A1/A2=4.2～4.63.最大与最小吸收波长法：布洛芬(0.25mg/ml,0.4%氢氧化钠溶液)

λmax=265nm,273nm;

λmin=245nm,271nm;

λsh=259nm七、红外光谱法八、薄层色谱法九、高效液相色谱法（阿司匹林片、泡腾片、肠溶片、肠溶胶囊）第三节、特殊杂质检查副产物ASA阿司匹林一、阿司匹林中特殊杂质的检查Salicyclicacid1.游离水杨酸目的：乙酰化不完全或水解产生对人体有毒性的水杨酸，结构中酚羟基易被氧化，生成有色的醌型物质，使药物成品变色原理：①05年版药典：水杨酸结构中有游离的酚羟基，在酸性的条件下与高铁盐反应生成紫堇色（可以检出1µg的水杨酸）检查方法05版药典检查原理:

对照比色法灵敏度:1g②10年版药典：反相法，为防止阿司匹林水解，用1%冰醋酸甲醇溶液制备供试品，外标法计算限量（HPLC法）

原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林肠溶片：1.5%；阿司匹林肠溶胶囊：1.0%泡腾片、阿司匹林栓：3.0%①未反应完全的酚类②水杨酸精制时温度过高产生脱羧副反应的苯酚③合成工艺过程中由副反应生成的醋酸苯酯、水杨酸苯酯和乙酰水杨酸苯酯等10年版药典：反相色谱法，采用不加校正因子的主成分自身对照法，所有杂质峰（要扣除水杨酸峰）之和不得大于对照液主成分峰面积（P208)2.有关物质第四节

含量测定含量测定一、酸碱滴定法直接滴定法水解后剩余滴定法两步滴定法非水溶液滴定法二、紫外分光光度法1.直接紫外分光光度法2.柱分配色谱－紫外分光光度法三、高效液相色谱法第四节、含量测定一、酸碱滴定法（一）

直接滴定法

原理：阿司匹林具有游离羧基，具有酸性，以标准碱滴定液直接滴定COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O反应摩尔比为1∶1阿司匹林ChP

取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。碱性区变色测定方法及计算滴定度(titer)——单位容量滴定液相当于被测物质的质量aA+bB

cC+dD优点：简便、快速缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定） 酸性杂质干扰（如水杨酸超限时）适用范围：不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定温度对滴定结果影响不大中性乙醇①溶解供试品；②防止酯水解；③“中性”是对中和法所用指示剂而言第四节、含量测定（二）剩余量滴定法－美洛昔康原理：自身不溶，其盐溶，加入过量碱，然后用酸回滴多余碱。2NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O剩余滴定：第四节、含量测定（三）水解后剩余滴定法－酯的一般含量测定方法原理：阿斯匹林酯结构在碱性溶液中易于水解，加入定量过量的氢氧化钠滴定液，加热使酯水解,剩余的碱用酸回滴。2NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O剩余滴定：特点：消除了酯键水解的干扰注意：需做空白试验校正，原因：NaOH在加热时易吸收CO2，影响结果方法：每1mL的氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)相当于45.04mg的C9H8O41.5gNaOH滴定液(0.5mol/L)50ml煮沸10min/酚酞指示液3滴H2SO4滴定液(0.25mol/L)3.讨论：空白试验——氢氧化钠受热时易吸收CO2酸回滴定时消耗减少,结果偏高(三)水解后剩余滴定法滴定度——阿司匹林:氢氧化钠(0.5mol/L)(1:2)T=1/2×0.5×180.16=45.04mg/mL第四节、含量测定（四）

两步滴定法－适用于阿斯匹林片剂片剂稳定剂（酒石酸或枸橼酸）+分解产物（水杨酸和醋酸）第一步中和第四节、含量测定第二步水解后剩余滴定水解剩余滴定2NaOH（过量）＋H2SO4＝Na2SO4＋2H2O

反应摩尔比为1∶1

本法消除了酸性稳定剂的干扰，降低了酯键水解的干扰

终点：溶液显粉红色每1ml的NaOH滴定液(0.lmol/L)相当于18.02mg的阿司匹林（C9H8O4）。片剂含量测定结果的计算HPLC法用于测量阿司匹林栓剂的含量1.色谱条件

色谱柱：C18柱（填料为十八烷基硅烷键合硅胶）

流动相：乙腈：四氢呋喃：冰醋酸:水=20：5：5：70

检测波长：276nm

2.系统适用性

理论塔板数（n）：按阿司匹林峰计应不低于3000

分离度：阿司匹林、水杨酸之间的分离度（Rs)应大于1.53、计算方法：外标法抑制阿司匹林的解离三、高效液相色谱法计算题某片剂（规格0.5g）用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水-甲醇-醋酸钠溶液为流动相；做色谱条件与系统适用性试验：取本品对照品，精密称定0.0748g，置50ml量瓶中，加水约6ml，超声使溶解，再加流动相稀释至刻度，摇匀。取本品20片，精密称定重量为16.8452g，研细，取片粉0.1124g，置50ml量瓶中，加流动相约35ml，超声使溶解，再加流动相稀释至刻度，摇匀，取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图峰面积为2768；另取上述对照品溶液同法测定作对照，峰面积为3251。计算该片剂每片的量。

两步滴定法测定阿司匹林片或阿司匹林肠溶片时，第一步滴定反应的作用是A.测定阿司匹林含量B.消除共存酸性物质的干扰C.使阿司匹林反应完全D.便于观测终点本章小结TEXT分类和理化性质鉴别试验体内药物分析一、典型药物与结构特点二、主要理化性质酸性水解性吸收光谱基