高效液相色谱法在食品中的应用

高效液相色谱法在食品分析中的应用化工1001李伟15简介分类食品分析中的应用仪器推荐高效液相色谱工作原理

储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附-解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号.

流程图

高效液相色谱仪的系统组成泵储液器进样器色谱柱记录仪检测器试样1.高压：液体流经色谱柱，受到阻力较大，为了迅速地通过色谱柱，必须对流动相施加高压。2.高速：一般可达1～10ml/min。3.高效：颗粒极细（一般为10mm以下）、规则均匀的固定相，传质阻抗小，柱效高，分离效率高。4.高灵敏度：高效液相色谱已广泛采用高灵敏度的检测器，进一步提高了分析的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达10-11g。另外，用样量小，一般几个微升。5.高选择性：6.适应范围宽：气相色谱法虽具有分离能力好，灵敏度高，分析速度快，操作方便等优点，但是受技术条件的限制，沸点太高的物质或热稳定性差的物质都难于应用气相色谱法进行分析。而高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大的有机物原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。高效液相色谱的特点有：反相色谱与正相色谱主要类型分配色谱法（partitionchromatography）吸附色谱法（adsorptionchromatography）离子交换色谱法（IEC）空间排阻色谱法（SEC）化学键合相色谱法(bondedphasechromatography；BPC)亲合色谱法（affinitychromatography；AC）手性色谱法（chiralchromatography；CC）胶束色谱法（micellarchromatography；MC）电色谱法（electrochromatography；EC）糕点中的色素样品的前处理称取10.0g粉碎后，加入30mL乙醇-氨-水（7:2:1）溶液。将烧杯置于超声波清洗器中超声30min。将上清液倒入离心管中离心，8000r/min,15min，取上清液于100mL容量瓶中。重复提取3次，合并上清液，用乙酸调pH值至7.0，最后用水定容，摇匀，0.2um滤膜过滤。色谱条件仪器：岛津高效液相色谱仪，LC-20ADXR高压泵、二极管阵列检测器、自动进样器、CTO-20A柱温箱、CBM-20A系统控制器。色谱柱：

C18,150*4.6mm;流动相：甲醇：0.02mol/L乙酸铵；梯度洗脱：乙酸铵0-5min,85%-15%;5-10min,60%-40%;10-15min,20%-80%;15-20min,15%-85%;流速：1.0Ml/min;检测波长：410nm;进样量：20.0uL。标准曲线的绘制：样品前处理技术高速离心过滤、超滤选择性沉淀萃取索氏抽提衍生化反应样品浓缩—旋蒸等新技术—加速溶剂萃取（ASE）

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高效液相色谱测定苯甲酸、山梨酸

仪器和试剂

美国Waters公司液相色谱仪、2487双通道紫外检测器、自动进样器。标准品：苯甲酸（纯度99.2%），去离子，甲醇为HPLC级试剂，其他试剂为分析纯。标准溶液的配制

色谱参数和条件色谱柱：WatersSymmetryShieldTMRP18(5um,3.9mm*150mm)；流动相：甲醇+0.02mol/L乙酸铵水溶液（3:97），流速：1.0ml/min；进样量：10uL；检测波长：230nm。样品制备

取均质后的肉及肉制品样品2.5g，加入10mL乙醚，高速匀浆2min,将上清液转移至浓缩瓶中，重复提取一次。清夜合并于浓缩液瓶中。35℃浓缩至约5mL，加入3mL饱和NaCl溶液、5mL0.5moL/LNaOH溶液，混匀1min。静置分层后，取水相，重复萃取一次，合并水相。滴加HCl酸化至PH≈1。加入10mL乙醚，重复萃取一次，合并乙醚，35℃浓缩，过滤。2mL甲醇+水（1:1）溶液定容，用于HPLC分析。标准曲线的绘制:三聚氰胺的检出应用岛津

LC-10AHPLC仪器测定奶粉及奶制品中三聚氰胺的残留量。样品经三氯乙酸、乙酸铅溶液超声提取，再用混合型阳离子交换树脂固相萃取，洗脱剂用氮气吹干，溶于甲醇溶液，过

0.45µm滤膜后，上机测定。本法分析条件：色谱柱采用

c18。流动相为

10mmol/L醋酸铵水溶液

-乙晴（50：

50）流速为

1.5mL/mL，检测波长:243nm保留时间为

6.9min，空白无干扰。检出限为

:1.0ug

HPLC对食品加工及贮藏过程产生毒素的分析

检测食品中致癌物丙烯酰胺检测器：二极管阵列色谱柱：反相高效液相色谱测定，采用C18固相流动相：甲醇:水(体积比5∶95)检测波长210nm。方法：外标法----丙烯酰胺在0.1～10mg/L浓度范围内线性良好，方法检出限为10ng/g。用建立的方法分析面包、谷类、豆类、坚果类和土豆类、油炸类食品结果显示:(1)食品炸焦的程度越深，则丙烯酰胺含量越高。(2)食品贮藏不当，会引起真菌生长，造成食品的腐败变质，同时有些霉菌产生的霉菌毒素，具有较强的毒性和耐热性。P230II型高效液相色谱仪检测器UV230Ⅱ紫外-可见检测器波长范围190～700nm波长准确度±1.0nm检测池分析池体积光源氘灯工作站EC2006数据处理工作站价格：90000元Waters600泵100µl泵头流量范围0.01到20.0ml/min检测器二极管阵列、紫外可见价格：200000左右Waters600

HPLC对食品添加剂的测定

苏丹（Sudan）色素是一种人工合成染料，在化工生产中主要用于对油类、蜡和肥皂的染色。有关研究表明，苏丹Ⅰ号（SudanⅠ）会导致鼠类患癌，它对人类肝细胞也显现出可能致癌的特性。液相色谱法采用乙腈提取后经凝胶渗透色谱法对样品进行净化，利用反相高效液相色谱法，以乙腈－酸性水溶液为流动相，采用梯度洗脱，以二极管阵列检测器定性定量测定食品中的4种苏丹色素，结果最低检出限分别为