课时跟踪检测（二） 微生物的基本培养技术

课时跟踪检测（二）微生物的基本培养技术一、概念检测1．判断正误，正确的画“√”，错误的画“×”。(1)液体培养基含有水，而固体培养基不含水。 (×)提示：液体培养基和固体培养基都含有水，它们的区别为是否含有凝固剂。(2)获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌污染。 (√)(3)用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基都要进行消毒。 (×)提示：用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基都要进行灭菌。(4)培养基分装到培养皿后进行灭菌。 (×)提示：培养基分装到培养皿之前要进行灭菌。(5)平板冷凝后应将平板倒置，防止皿盖上的冷凝水落入培养基，造成污染。 (√)(6)转换划线角度后需要灼烧接种环再进行划线。 (√)2．某杆菌只有在含蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和微量维生素的培养基中才能生长，此时微量维生素对该菌的培养而言属于 ()A．碳源 B．氮源C．激素 D．特殊营养物质解析：选D碳源是指能为微生物生长发育提供所需碳元素的营养物质，如蛋白胨、牛肉膏均可作为碳源；氮源是指能为微生物生长发育提供所需氮元素的营养物质，如蛋白胨、牛肉膏；激素不是细菌培养基的成分；特殊营养物质是指微生物生命活动不可缺少，而微生物自身又不能合成的微量有机物，如维生素。3．高温灭菌的原理是 ()A．每种微生物生长的最适温度是一定的B．微生物不适宜生活在高温的环境中C．高温破坏了细菌体内的蛋白质和核酸D．高温降低了环境中氧的浓度解析：选C蛋白质和核酸是细胞表现生命活动的最重要物质，它们都是高分子化合物，具有复杂的空间结构，高温能使他们的空间结构受到破坏而失去活性，所以高温灭菌的原理是高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动。4．冷凝后的固体培养基平板要倒置，其目的是 ()A．有利于大肠杆菌的接种B．防止杂菌落入而造成污染C．有利于培养基的冷却和保存D．防止冷凝水倒流入培养基解析：选D平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。5．下列关于消毒和灭菌方法的说法，错误的是 ()A．酒精擦拭属于消毒方法B．高压蒸汽法、干热法、灼烧法的灭菌原理相同C．消毒处理可以杀死所有类型的活细胞D．巴氏消毒法属于一种低温消毒法解析：选C酒精擦拭属于消毒方法，A正确；微生物的培养过程中常用的灭菌方法有灼烧法、干热灭菌法、高压蒸气灭菌法，原理都是杀死环境中的所有微生物(包括芽孢和孢子)，B正确；消毒只能杀死部分生活状态的微生物细胞，不能杀死芽孢、孢子，C错误；巴氏消毒法属于一种低温消毒法，D正确。二、综合迁移6．下列关于培养基的叙述，正确的是 ()A．在配制培养基时，除满足营养需求外，还应考虑pH、O2及特殊营养物质的需求B．获得假单胞杆菌菌落后，在进行扩大培养时，应选用固体培养基C．从土壤中获取乙草胺降解菌，为了防止杂菌的污染，可在培养基中加入青霉素D．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上解析：选A培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质，此外培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质(如维生素)以及O2的需求，A正确；获得假单胞杆菌菌落后，在进行扩大培养时，应选用液体培养基，B错误；青霉素抑制细菌的繁殖，在培养基中加入青霉素，在抑制杂菌繁殖的同时，也会抑制目的菌(乙草胺降解菌)的繁殖，C错误；倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基(约10～20mL)倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，D错误。7．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作错误的是 ()①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢②接种操作要在酒精灯火焰旁进行③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌④培养基要进行高压蒸汽灭菌⑤加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌A．①③⑤ B．①④⑤C．③④⑤ D．③⑤解析：选D100℃煮沸5～6min可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢，①正确；酒精灯火焰附近存在一个无菌区，为了防止杂菌污染，接种操作要在酒精灯火焰附近进行，②正确；家庭制作葡萄酒利用的是附着于葡萄皮表面的野生型酵母菌，所以制作葡萄酒时葡萄不进行灭菌，以免杀死酵母菌，③错误；培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，④正确；指示剂和染料可能混有微生物，故加入培养基前需灭菌，⑤错误。8．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中，下列关于倒平板的描述正确的是 ()A．等培养基冷却至40℃左右时，方可进行倒平板B．将灭过菌的培养皿放在桌面上，打开培养皿盖C．等待平板冷却5～10s，将平板倒过来放置D．倒平板后无需将培养基进行高压蒸汽灭菌解析：选D等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板，防止杂菌污染，A错误；倒平板时，用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，不能打开皿盖，B错误；等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上，C错误；倒平板后无需将培养基进行高压蒸汽灭菌，灭菌应在倒平板之前进行，D正确。9．下列有关无菌技术的叙述，错误的是 ()A．对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒B．用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基要进行灭菌C．高压蒸汽灭菌锅需将冷空气彻底排出后才能将锅密闭D．煮沸消毒法可以杀死所有微生物包括芽孢和孢子解析：选D为避免杂菌污染，对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒，A正确；用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基要进行灭菌，一般是进行高压蒸汽灭菌，B正确；高压蒸汽灭菌锅需将冷空气彻底排出后才能将锅密闭，否则冷空气的存在会影响灭菌效果，C正确；煮沸消毒法可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢，D错误。10．下图是从葡萄果实上获取酵母菌菌种的简要操作步骤。下列相关叙述错误的是 ()A．图中接种的方法只有平板划线法B．图中①②③步骤都必须确保是无菌操作C．图中选择培养基为固体，而扩大培养的培养基为液体D．扩大培养酵母菌过程中，为加快酵母菌繁殖需要通入无菌空气解析：选A微生物培养中常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，A错误；微生物培养过程必须保证无菌操作以防止杂菌污染，B正确；在进行酵母菌筛选时用固体培养基，而进行扩大培养时用液体培养基，C正确；酵母菌为兼性厌氧菌，所以在扩大培养酵母菌过程中为加快酵母菌繁殖需要通入无菌空气，否则会造成杂菌污染，D正确。11．下表是某微生物培养基的成分及含量，请据此回答下列问题：编号成分含量①粉状硫10g②(NH4)2SO40.4g③K2HPO44.0g④MgSO49.25g⑤FeSO40.5g⑥CaCl20.5g⑦H2O—(1)上表培养基可培养的微生物类型是_______________________________________。(2)若除去成分②，加入(CH2O)，该培养基可用于培养____________。(3)表中营养成分共有________类。(4)使用后的培养基在丢弃前，要进行的是__________________________________。(5)上表中各成分含量确定的原则是__________________________________________________________________________。(6)若要利用上表培养基观察菌落，应该增加的成分是____________。解析：(1)分析题表中该微生物培养基的成分及含量可知，该培养基中没有添加有机碳源，由此说明该培养基培养的是能够自身合成有机碳源的微生物，因此该培养基可培养的微生物类型是自养型微生物。(2)若除去成分②，加入(CH2O)，也就是除去氮源加入有机碳源，则该培养基培养的生物类型能够进行固氮作用合成氮源即为固氮微生物。(3)表中培养基的成分包括水、无机盐和氮源，总共是3类。(4)使用后的培养基为了避免污染环境以及感染人类，在丢弃之前要进行严格的灭菌处理。(5)培养基的制备一般是根据所要培养的微生物的生长需要来确定，以满足不同微生物对营养物质的不同需求，使微生物正常的生长。(6)要利用该培养基来观察菌落，通常要制备固体培养基，因此该培养基中还需要添加凝固剂，常用的凝固剂是琼脂。答案：(1)自养型微生物(2)固氮微生物(3)3(4)灭菌(5)根据所要培养的微生物的生长需要确定(6)琼脂(或凝固剂)12．在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。实验基本步骤如下，请回答下列有关问题：(1)无论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是________。(2)倒平板的适宜温度是50℃左右，原因是____________________________________。待平板冷凝后，要将平板倒置，这样既可避免培养基表面的水分过快地挥发，又可防止____。(3)若使用平板划线法进行接种，应选择的接种工具是图中的________(填选项)。(4)划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_____________________________________________________________________(答出两点)。(5)若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及培养物必须经过__________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。解析：(1)微生物生长需要一定的pH，所以培养基装瓶前需要调节pH。(2)倒平板时要选择适宜的温度，温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝固，不容易倒出来，因此选用50℃左右的温度倒平板最适合。将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。(3)分析题图可知，A为接种环，B为涂布器，C为胶头滴管，D为接种针，平板划线法应选择的接种工具是接种环(A)。(4)第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落，造成此现象的原因可能有两个：一是接种环灼烧后未冷却，菌种接触到高温的接种环死亡；二是划第二划线区域第一条线时未从第一区域末端开始，因此没有菌落。(5)有的大肠杆菌会释放一种强烈的毒素，因此，若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。答案：(1)调节pH(2)温度过高会烫手，过低培养基又会凝固皿盖上的水珠落入培养基，造成污染(3)A(4)接种环灼烧后未冷却；划线未从第一区域末端开始(5)灭菌三、应用创新13．下列有关微生物培养和平板划线法的叙述，正确的是()A．培养基分装到培养皿后要进行灭菌B．转换划线角度时，需在酒精灯火焰上灼烧接种环后直接进行划线C．蘸取菌液和划线要在酒精灯火焰旁进行D．划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连解析：选C培养基需灭菌后再分装到培养皿中，A错误；转换划线角度时要先灼烧接种环，待冷却后再从上次划线的末端开始进行划线，B错误；为防止杂菌污染，蘸取菌液和划线应在酒精灯附近操作，C正确；划线时，为挑选出单个菌落，最后一区的划线(细菌数最少)和第一区(细菌数最多)的划线不能相连，D错误。14．MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。为了研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结果如下表，下列说法错误的是()项目培养基中的添加物MRSA菌1100μg/mL蛋白质H生长正常220μg/mL青霉素生长正常32μg/mL青霉素＋100μg/mL蛋白质H死亡A.细菌的死亡不能通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定B．第2、3组对比表明，使用低浓度的青霉素可杀死MRSA菌C．实验还需设计用2μg/mL青霉素做处理的对照组D．此实验设计不能揭示蛋白质H的作用机理解析：选B细菌是原核生物，其细胞中无细胞核，因而不能通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定细菌的死亡与否，A正确；第2组和第3组对比表明，使用低浓度青霉素和高浓度蛋白质H可杀死MRSA菌，B错误；由于2μg/mL青霉素＋100μg/mL蛋白质H可以杀死MRSA菌，所以实验还需设计用2μg/mL青霉素做处理的对照组，C正确；此实验设计只能表明低浓度青霉素和高浓度蛋白H的混合物可杀死MRSA菌，但不能揭示蛋白质H的作用机理，D正确。15．某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题：(1)培养基中加入化合物A的目的是_____________，这种培养基属于__________培养基。(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________________。实验需要振荡培养，由此推测目的菌的代谢类型是______________。(3)在上述实验操作过程中，获得纯净目的菌的关键是__________________________。(4)转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是______________，操作时采用__________灭菌的方法。(5)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是___