医院培训课件：《抗原抗体相关内容》

抗原抗体相关内容抗原抗体反应特点1：特异性：一种抗原只能和相应的抗体结合。2：比例性：抗原抗体的浓度比例适当时，才出现可见反应。3：可逆性：一定条件下抗原抗体反应是可逆的。4：阶段性：特异性结合阶段和肉眼可见凝集阶段。

表

抗原抗体反应的基本类型表反应类型实验技术检测方法敏感度沉淀反应液相沉淀试验观察沉淀、检测浊度+，++++

琼脂凝胶扩散观察扫描沉淀线或环+

凝胶电泳技术或峰或弧++补体参与反应补体溶血试验以裸眼或光电比色仪++

补体结合试验观察测定溶血现象+++免疫标记技术荧光免疫技术检测荧光现象++++

放射免疫技术检测放射性++++

酶标免疫技术检测酶底物显色++++

发光免疫技术测定发光强度++++

生物素-亲合素技术结合其它标记技术++++

金标免疫技术检测金颗粒沉淀++++凝集反应

直接凝集试验用裸眼、放大镜或显+

间接凝集试验微镜观察红细胞或胶++

凝集抑制试验乳等颗粒和各种凝集+++

协同凝集试验现象+++

抗球蛋白试验+++中和反应病毒中和试验病毒感染性丧失+

毒素中和试验外毒素毒性丢失++抗体类型

抗体依据重链抗原性的不同分为五类：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。免疫球蛋白GIgG是生物体液内主要的Ig，约占血液中Ig总量的70～75%。由于IgG能通过胎盘，所以新生儿从母体获得的

IgG在抵抗感染方面起重要作用。婴儿出生后2～4周开始合成IgG，8岁以后血清中IgG可达到成人水平。由于IgG较其他类Ig更易扩散到血管外的间隙内，因而在结合补体、增强免疫细胞吞噬病原微生物和中和细菌毒素的能力方面，具有重要作用，能有效地抗感染，这是对人体有利的一面。但某些自身免疫病，如自身免疫性溶血性贫血、血小板减少性紫癜、红斑狼疮以及类风湿等中的自身抗体都是IgG。一旦它与相应的自身细胞结合，反而加强了组织损伤作用。免疫球蛋白M

IgM在Ig中分子量最大，通常称为巨球蛋白，占血清Ig总量的10%。在电子显微镜下观察，IgM由五个基本结构相同的单体组成。各单位间由一条连结链(J链)连结成“星状”的五聚体。IgM是在个体发育过程中最早产生的抗体，也是经抗原刺激的动物体内最先出现的抗体，因此检查IgM的含量，有助于传染病的早期诊断。IgM在胎儿3个月后即开始合成，但水平很低，1～2岁时血清中IgM含量达到成人水平。通过结合补体，IgM有溶解细菌和溶解血细胞的作用，并能中和病毒，其效能比IgG高100倍以上。很多抗微生物的天然抗体、同族血凝素（抗A型与抗B型血）、类风湿病中的类风湿因子以及梅毒的补体结合抗体都属于IgM。检验科的应用乙肝两队半(ELISA)乙肝表面抗原HBsAg是HBV感染后第一个出现的血清学标志物，HBsAg（+）表明体内有乙肝感染，但不反映乙肝病毒有无复制，复制程度，传染性强弱。方法：

双抗体夹心法:①将含有已知抗体的抗血清吸附在微量滴定板上的小孔里，洗涤一次；②加待测抗原，如两者是特异的，则发生结合，然后把多余抗体洗除；③加入与待测抗原呈特异反应的酶联抗体，使形成“夹心”；④加入该酶的底物，若看到有色的酶解产物产生，说明在孔壁上存在相应的抗原。乙肝表面抗体

HBsAb是乙肝病毒中和抗体，意味着人体对乙肝产生了抵抗力。乙肝感染者出现HBsAb说明病毒已基本清除。接种疫苗或感染乙肝病毒靠自身免疫力清除病毒的人也会产生此抗体。方法：

双抗原夹心法乙肝E抗原HBeAg是体内HBV复制及血清具有传染性的指标。HBeAg在体内存在的时间一般不超过10周，否则表明乙肝慢性化。HBeAg转阴表明病毒复制水平降低，病变趋于停止。方法：双抗体夹心法乙肝病毒E抗体HBeAb常出现于HBeAg转阴后，预示患者传染性已显著或相对降低。持续HBeAb说明乙肝传染性较弱。方法：竞争法：检测时加入待测样本，使样本中的待测抗体与酶标板上的抗原结合。然后加入酶标记的抗体，此抗体也可与酶标板上的抗原结合，由于酶标板上固著的抗原数量有限，因此当样本中抗体的量越多，则酶标记抗体可结合的包被抗原就越少，两种抗体竞争结合包被抗原，所以称为竞争法。乙肝核心抗体HBcAb常紧继HBsAg、HBeAg之后在血清中检出，HBcAb主要分为HBcAbIgM和HBcAbIgG。HBcAbIgM在乙肝急性期为高滴度，是判断急性乙肝的重要指标。随着急性乙肝的恢复，抗HBcAbIgM滴度降低乃至消失，如果持续高滴度，常表明慢性化倾向。急性感染恢复期和慢性持续感染以HBcAbIgG为主。方法：竞争法乙肝两对半结果解释1.乙肝五项第1项阳性，其余四项阴性，说明是急性病毒感染的潜伏期后期。2.乙肝五项第1、3、5项阳性，其余两项阴性，俗称乙肝大三阳，说明是急、慢性乙肝，传染性相对较强。3.乙肝五项第1、4、5项阳性，其余两项阴性，俗称乙肝小三阳，说明是急、慢性乙肝，传染性相对较弱。4.乙肝五项第1、3项阳性，其余三项阴性。说明是急性乙肝的早期。5.乙肝五项第1、3、4、5项阳性，说明急性乙肝感染趋向恢复，或者为慢性乙肝病毒携带者。6.乙肝五项第1、4项阳性，其余三项阴性，说明慢性乙肝表面抗原携带者易转阴，或者是急性感染趋向恢复。7.乙肝五项第1、5项阳性，其余三项阴性，说明是急、慢性乙肝，即：①急性HBV感染；②慢性HBsAg携带者；③传染性弱。8.乙肝五项第5项阳性，其余四项阴性，说明：①既往感染未能测出抗-HBs；②恢复期HBsAg已消，抗-HBs尚未出现；③无症状HBsAg携带者。9.乙肝五项第2、4、5项阳性，其余两项阴性，说明是乙肝的恢复期，已有免疫力。10.乙肝五项第2项阳性，其余四项阴性，说明：①曾经注射过乙肝疫苗并产生了抗体，有免疫力；②曾经有过乙肝病毒的感染，并且有一定的免疫力；③假阳性。11.乙肝五项第2、5项阳性，其余三项阴性，说明是接种了乙肝疫苗以后，或是乙肝病毒感染后已康复，已有免疫力。12.乙肝五项第4、5项阳性，其余三项阴性，说明是急性乙肝病毒感染的恢复期，或曾经感染过病毒。13.乙肝五项全阴，说明过去和现在未感染过HBV，但目前没有保护性抗体。案例患者因停经33天，不规则少量阴道流血16天，加重1天，前来就诊，留取中段尿测HCG，结果弱阳性。

接着护士送来此病人的血液，要测其血β-HCG含量，这弱阳性尿要测血β-HCG含量在临床中也司空见惯了，也没太多在意，在测定其血β-HCG定量的时候，按照习惯用早早孕试纸测一下看看是否阳性，从而决定是否需要稀释样本上机测定，试剂盒：总人绒毛膜促性腺激素测定试剂盒（直接化学发光法）。早早孕试纸测试血显示如图，此时看到是和尿HCG结果是相符合的：

凭着以往的经验，不用稀释直接可以上机测定，结果仪器报：hCG值大于浓度范围。

这时候，有了怀疑，在仪器上选择了稀释200倍，继续测定，结果，hCG值再次报大于浓度范围，结果仍然无法测出，已经超出仪器的自动检测范围了，最大自动稀释200倍，到底是什么原因？查看病人的诊断：阴道流血查因，查质控，质控在控，这到底哪里出了问题？后来手工稀释4倍，再在ADVIA@CentaurCP系统上选择200倍，最终稀释800倍，结果出来了，hCG：579476.4mIU/ml。而就在此时，得知B超检查示：子宫增大，声像图改变符合葡萄胎。

问题到这里大家应该知道是什么原因了，葡萄胎因滋养细胞增生，产生大量HCG，血清中HCG浓度大大高于正常妊娠时相应月份值，因此利用这种差别可作为葡萄胎的辅助诊断。由于正常妊娠时HCG分泌峰值在第60～70天，可能与葡萄胎发病时间同期，而造成诊断困难，若能连续测定HCG或B超检查同时进行，即可作出鉴别。这是一个典型的钩状效应，此例胶体金免疫层析实测定尿液中hCG时，反应中hCG（抗原）过量导致免疫夹心复合物不能正常形成，抗原抗体比例失调，影响反应结果。最后附上此标本不同倍数稀释后测试的情况，供大家参考：原液，5倍，10倍，1