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猪链球菌2型江苏分离株溶血素基因缺失株的构建及特性分析的开题报告论文题目:猪链球菌2型江苏分离株溶血素基因缺失株的构建及特性分析研究背景和意义:猪链球菌(Streptococcussuis)是一种重要的猪和人类病原菌,已被认为是猪医学和人医学上的重要问题。2型猪链球菌是具有较高致病性的亚型之一,已被广泛研究。其中,溶血素成为2型猪链球菌致病性的重要因素之一。然而,近年来有越来越多的研究表明,溶血素缺失株也可以引起疾病。江苏省作为我国重要的生猪养殖区之一,关于2型猪链球菌的研究较少,特别是缺失溶血素基因的疾病毒株的研究更少。因此,开展猪链球菌2型溶血素缺失株的构建及特性分析研究,对于解析2型猪链球菌的致病机理及提供制备缺失溶血素基因的病毒株的技术手段等方面有重要意义。研究主要内容和方法:本文拟通过以下方法完成研究:1.收集测序已知的2型猪链球菌的溶血素基因序列,对江苏省分离的2型猪链球菌菌株进行PCR检测溶血素基因是否存在,并对PCR产物进行DNA测序验证。2.设计引物,构建缺失溶血素基因的2型猪链球菌株,通过PCR扩增、聚合酶链式反应等方法,获得多个单克隆菌株。3.对构建的缺失溶血素基因的菌株进行生物学特性和致病性的比较研究,如对细胞增殖的影响、可溶性蛋白质的检测等。研究预期结果:1.确认江苏分离的2型猪链球菌中溶血素基因是否存在,并对其序列进行分析。2.构建缺失溶血素基因的2型猪链球菌株,并鉴定其纯度和稳定性。3.通过生物学和致病性的比较研究,探讨缺失溶血素基因的2型猪链球菌株的致病性和生长特性等方面的影响。4.为探索猪链球菌致病机理以及提供缺失溶血素基因的2型猪链球菌株制备的技术手段等方面提供指导和依据。论文框架:第一章绪论1.1研究背景与意义1.2研究现状及进展1.3研究思路和方法1.4论文结构与内容安排第二章猪链球菌的溶血素基因2.1猪链球菌2.2猪链球菌的溶血素及其功能2.3菌株的溶血素基因差异分析第三章猪链球菌2型江苏分离株的溶血素基因检测及突变株的构建3.1江苏分离株的菌株鉴定及分离3.2溶血素基因的检测及序列分析3.3基因敲除突变株的构建3.4基因敲除突变株的验证第四章缺失溶血素基因的2型猪链球菌株的纯化和鉴定4.1缺失溶血素基因的2型猪链球菌株的菌种保存及扩增4.2纯化和表型鉴定4.3PCR和Westernblot分析第五章生物学特性和致病性的比较研究5.1细胞增殖和溶血性的比较研究5.2可溶性蛋白质浓
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