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文档简介

§1

实验室仪器设备§2

实验基本操作§3

植物组织培养流程植物组织培养操作流程§1

实验室仪器设备§2

实验基本操作一、母液的配制1.MS母液的配制大量元素(20倍)、微量元素(1000倍)、铁盐(100倍)、有机元素(100倍)2.激素母液的配制6-BA、KT、ZT等浓度为0.5mg/ml；NAA浓度为0.1mg/ml二、培养基的配制与灭菌培养基配制MS+6-BA

2

mg/L+琼脂粉

5.5

mg/L+糖

30

mg/LpH

6.0

1L培养基灭菌适用于各种器皿、培养基、器皿、蒸馏水、棉塞纸等。121℃

维持20～30min注意点：加足水、排尽气、气压降到0时，才能开盖。三、外植体的消毒与无菌操作1.外植体消毒消

毒

剂使用浓度(%)消毒时间(min.)效果残液去除难易乙醇70-750.1-3好易新洁尔灭10～205～30好易氯化汞0.1～12～15最好最难过氧化氢10～125～15较好最易抗菌素4～50mgl-130～60较好较难次氯酸钙/纳9

～

105～30好易1、用75%的酒精喷洒超净工作台。2、打开室内及超净工作台用紫外灯、无菌风及刀剪镊杀菌20min-30min。注意：台面上的用品不要放置太多或重叠放置，以免降低灭菌效果。3、关空间紫外灯，过5-10min进入缓冲间，以75%洗手和手臂，进入接种台。4、关闭超净台紫外灯，打开照明灯。5。、试验操作。6、完毕后关闭照明灯、刀剪镊、无菌风开关。7、收拾无菌纸、材料瓶等。2.无菌操作注意（1）进行培养时，动作要准确敏捷，但又不必太快，以防空气流动，增加污染机会。（2）不能用手触及已消毒器皿，如已接触，要重新消毒。（3）为拿取方便，工作台面上的用品要有合理的布局，原则上应是右手使用的东西放置在右侧，左手用品在左侧。（4）工作由始至终要保持一定顺序性，组织或细胞在未做处理之前，勿过早暴露在空气中。同样，培养液在未用前，不要过早开瓶；用过之后如不再重复使用，应立即封闭瓶口，直立可增加落菌机会。§3.植物组织培养流程路线一路线二路线三灭菌难，接种难，用心都不难身体好，学习好，品质更需好消

毒

剂使用浓度(%)消毒时间(min.)效果残液去除难易乙醇70-750.1-3好易新洁尔灭10～205～30好易氯化汞0.1～12～15最好最难过氧化氢10～125～15较好最易抗菌素4～50mgl-130～60较好较难次氯酸钙/纳9

～

105～30好易三、外植体的消毒与无菌操作

1.外植体消毒注意（1）进行培养时，动作要准确敏捷，但又不必太快，以防空气流动，增加污染机会。（2）不能用手触及已消毒器皿，如已接触，要重新消毒。（3）为拿取方便，工作台面上的用品要有合理的布局，原则上应是右手使用的东西放置在右侧，左手用品在左侧。（4）工作由始至终要保持一定

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