海洋钢结构中两种贝类毒素含量的测定

海洋钢结构中两种贝类毒素含量的测定

麻痹性贝类素（psp）是水中藻类或微生物的次生代谢产物。由于它食物产生的病毒在体内积聚，人类误解了含有中毒生物的外壳，导致中毒或死亡。为确保海产品的食用安全,一些受麻痹性贝类毒素危害较大的国家,在一些主要贝类海产区将PSP列为常规性监测项目。我国有关人员开展了一些PSP方面的调查研究工作,报道了食用织纹螺(Nassariussp.)、菲律宾蛤仔(Ruditapesphilipinensis)、栉江瑶(Pinnapectinata)、有鳍鱼(finfish)引起的PSP中毒案例。但整体上,我国对PSP的研究多为零星的中毒事件调查或季节性普查,缺乏系统性。因此,针对一些受麻痹性贝毒影响较大的贝类养殖区,较系统地开展贝类PSP动态变化研究,将对沿海贝类养殖的发展及其食用安全具有重要意义。1贝类毒素检测于1997年10月至1999年6月间,对受PSP影响较大的广东大亚湾、大鹏湾内养殖的主要经济贝类翡翠贻贝(Pernaviridis)(俗称青口)、华贵栉孔扇贝(Chlamysnobilis)进行每月一次采样,采样地点位于上述两湾贝类养殖区(图1)。考虑到人们在日常食用贝类时常将贝类消化腺去除,故本文将贝类的消化腺组织与其他贝类软组织所含的PSP分别测定。以美国化学家协会推荐的“麻痹性贝类毒素小白鼠的生物测定法”对贝类毒素提取和毒性测定。实验用小白鼠购于暨南大学实验动物中心,昆明种系,雄性,每只重18~21g,每组实验小白鼠数量一般为3只。2结果2.1贻贝sd-月间资格样品中所见表1深圳大亚湾东山(S2)的测定结果表明(表1):1999年1~6月,华贵栉孔扇贝PSP毒性很高,毒素主要集中在消化腺,含量为1263.0至105Mu/g,剔除消化腺的其他软组织存有一定量的毒素。贝肉平均含毒为117.1至5.5Mu/g。在时间分布上,冬季高于春季,且呈波浪性下降。用联合国粮农组织推荐的适合人类安全消费的贝类PSP含量最高限定值4Mu/g来衡量,本采样点扇贝PSP含量均已超标,尤其是一月份,超标近30倍。贻贝消化腺PSP含量1至4月均超标,剔除消化腺后的其余贻贝肉仅一月份超标,贻贝肉PSP含量平均值也仅一月份超标。整体上贻贝PSP含量的变化亦表现为由冬至春逐月波动下降的特点。大亚湾澳头(S3,S4)海域扇贝和贻贝的PSP含量不高,且均低于4Mu/g,贻贝PSP出现的高峰期约在5月,总体上,扇贝PSP的含量较贻贝高(图2)。2.2检测cdp的极限大鹏湾南澳(S1)华贵栉孔扇贝和翡翠贻贝的平均PSP含量都不高,且低于4Mu/g(表2)。扇贝消化腺中PSP含量1月份最高,并随时间的向后推移,呈波浪式降低。在扇贝的其他软组织中,检测不出PSP,仅在个别样品中发现受试的小白鼠有典型的PSP中毒反应。贻贝的消化腺中PSP含量均低于本方法的检测极限,仅在1998年12月及1999年1月的样品中发现有PSP存在的迹象。在贻贝的其他软组织中未检测出PSP。3讨论3.1贝的检测机理扇贝和贻贝在一些贝类养殖区是主要的养殖对象,也是一些国家的主要经济贝类,在进行PSP调查时,此两类贝类常作为受检对象。本研究表明,两者在积累PSP的数量及持续时间方面存在明显差异,华贵栉孔扇贝积累PSP的能力较强,排除速率慢,PSP在贝体内含量较高,保存时间较长;翡翠贻贝积累PSP的能力较扇贝低,排毒能力强,PSP在贝体组织内含量较低,保存时间短。贝类对麻痹性毒素的积累能力除取决于贝类的种类,产生毒素的有毒藻种类及数量外还与摄食的环境温度、盐度及光(包括光强、光周期)等因素有关。就贝类而言,贝类软组织的毒素含量与贝类对有毒藻的摄食行为、贝类对毒藻毒素的吸收和代谢能力等因素有关,因而,同一采样点不同种贝类间PSP含量差别很大,也就是说,在同样毒藻数量条件下,同一采样点的不同种贝类PSP含量不尽相同。一般认为,贝类可摄食含麻痹性贝毒的藻类并在体内积累PSP而自身不受影响,但进一步的实验表明,贝类摄食有毒藻后所产生的生理反应差别很大,有的种类部分个体会中毒死亡,有的种类会不同程度地关闭贝壳膜瓣,收缩水管,降低摄食率,而有的种类则未发生异常反应。这种反应与贝类种类有关,也与贝类的摄食经历有关,长期处于有毒藻中的贝类通常对毒藻有较好的适应性,其摄食受毒藻影响小。其结果,造成贝类对有毒藻的摄食率和消化吸收差异。PSP在贝组织内的转化和转移机理目前尚不十分清楚,但已认识到不同贝类的不同组织PSP含量差异很大且依季节变化,有的转移到水管、生殖腺等组织的毒素与贝体结合,不易为贝体代谢释出而逐渐积累,长期带毒。基于上述原因,不同贝类对毒素积累与排除的速率不同。已有资料证明,与冲浪蛤Spisulasolidissima和蛤Myaarenaria相比,翡翠贻贝M.edulis能迅速在其组织中积累和排除毒素,据此,加拿大在其东部沿海主要贝类养殖区,美国在缅因湾主要贝类养殖区附近均设有PSP常年监测点,选取翡翠贻贝为监测对象,据以往的历史资料,可提前一周对养殖对象的PSP作出预报。本实验表明,与华贵栉孔扇贝相比,翡翠贻贝积累和排除PSP较快(图2),其亦可作为大亚湾贝类PSP监测首选对象之一。3.2pcd含量的测定虽然贝类各器官PSP含量存在较大差异且依季节而变化,但一般而言,PSP主要蓄积在贝类的消化腺中。比较S2取样点PSP在扇贝及贻贝不同组织中的分布可知,PSP含量在扇贝消化腺与扇贝其他软组织之比为64至113,平均约为79,贻贝之比则为2.5至40,平均约为15,在PSP含量较高的1月份,这种比值较高,表明扇贝的PSP主要集中在消化腺中,PSP在其体内可能需经较长时间代谢才可缓慢转移到其他组织。由此似可推测,贝类PSP积累能力越强,贝类消化腺所含毒素量与其他组织所含毒素量之比就越高。由于本研究所涉及贝类种类少,上述推论是否可作为判定贝类积累PSP能力强弱的标准,尚待进一步研究。3.3采样点水质及季节不同取样点间同种贝类PSP含量的差异因时间而变化,在同一时间的同种贝类间PSP含量的差异则因取样地点而变化。比较各采样点贝类毒素测定结果可知,在同一时间内,S2采样点的扇贝和贻贝的PSP含量比其他取样点高,尤其在PSP含量高的1月份,S2采样点两种贝类PSP含量远较其他采样点高。有趣的是,这些采样点间的地理间距并不远,水体的营养成分差别不大,不过,S2采样点的水湾出口较浅,水体交换能力差,这可能是造成该湾贝类PSP含量高的原因。Sekiguchi等人比较相邻的Yamada湾和Ofunato湾的扇贝Patinopectenyessoensis所含PSP年变化时发现,有毒赤潮生物塔玛亚历山大藻(Alexandriumtamarense)与扇贝PSP含量密切相关,后者湾内扇贝PSP含量比前者高得多,持续时间也比后者长。造成此差异的原因是前者海湾为宽口袋型,湾口深,与外界水体交换强,湾内水体中高密度有毒藻主要来自外部水体,但其在湾内滞留时间短,很快会被沿岸流带出湾外;后者则为狭长口袋型,湾口窄浅,水体交换差,水体中的高密度有毒藻主要来自湾内底泥中孢囊的萌发。本文S2采样点地理特点与Ofunato湾十分相似,在该点亦发现有丰富的A.tamarense孢囊,所以S2采样点贝类PSP含量较高的原因应与Ofunato湾相同。不过,在间距不大,地理条件相近的采样点间,同一种贝类PSP含量及高峰出现时间差异不明显(图2)。因此,在规划贝类养殖区PSP监测方案时,既要保持采样点间有一定的间距,减少工作强度,又要考虑局部水体的地理特点,合理布局。贝类PSP含量变化除与贝类的种类及地点有关外,其季节性变化也十分明显。Chan报道,1978~1990年香港海域贝类PSP含量通常每年有一大一小两个高峰期,主峰于3~4月份出现在港岛的东南海域,次峰于7~11月份出现在港岛西部珠江口水域。1992~1994年对香港市售海产贝类(来自当地海产养殖筏)的监测结果还显示,次高峰出现的时间扇贝为8~10月,贻贝为7~10月,而蛤和牡蛎的主峰分别出现在9月和11月,次峰出现在3~4月。因此,不同种贝类PSP的高峰期不尽相同,在不同年份,同种贝类的PSP含量季节变化也有一定差异。S2采样点的检测结果显示,1998~1999年翡翠贻贝和华贵栉孔扇贝PSP的峰值出现在冬春季,而S3采样点则显示1998年贝类PSP的峰值出现在春夏季,其它季节变化不大,保持在很低的水平。这与林燕棠等人的结果有一定的差别,他们经过1990~1991年的调查后认为,大亚湾的这两种贝类PSP含量季节变化大致为春季最高,秋季最低。造成这种差异的原因可能有两种,其一为如上所述的不同年份贝类PSP含量的季节变化差异,其二为调查方法的差异。他们采取的是每季节检测一次的方法,检测结果有一定偶然性,难以全面地代表贝类PSP含量的季节变化。当然,本调查进行的时间不长,积累的数据有限,这也是造成差异的原因。因而,零星、短期的调查难以全面真实反应贝类养殖区PSP含量的分布变化规律,只有经长期、广泛的调查后,才可建